"C166 Adherent小鼠血管內(nèi)皮細胞系
細胞背景資料：血管內(nèi)皮
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良好，當補液時，需避免反復吹打。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
C166 Adherent小鼠血管內(nèi)皮細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
H-748細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel624細胞、MARC 145細胞、SK-RC 39細胞
LC-2/ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-85 clone 5細胞、SDBMSC細胞、AG 9細胞
HSAEC1-KT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-403細胞、Duke University 4475細胞、H-1623細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
S3-HeLa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hi-five細胞、RPTEC/TERT 1細胞、HNTEC細胞
rRMECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NEC-8細胞、751-NA細胞、U 937細胞
SNU520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2170細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞、MPASMC細胞
細胞生長特性：貼壁
C166 Adherent小鼠血管內(nèi)皮細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
以下對初次培養(yǎng)細胞人員來說，是非常好的開門教程：準備室的設(shè)備：單蒸餾水蒸餾器、雙蒸餾水蒸餾器、酸缸、烤箱、高壓鍋、儲品柜(放置未消毒物品)、儲品柜(放置消毒過的物品)、包裝臺；配液室的設(shè)備：扭力天平和電子天平(稱量藥品)、PH計(測量培養(yǎng)用液PH值)、磁力攪拌器(配置溶液室攪拌溶液)；培養(yǎng)室的設(shè)備：液氮罐、儲品柜(存放雜物)、日光燈和紫外燈、空氣凈化器系統(tǒng)、低溫冰箱(-８０℃)、空調(diào)、二氧化碳缸瓶、邊臺(書寫實驗記錄)；必須放在無菌間的設(shè)備：離心機(收集細胞)、超凈工作臺、倒置顯微鏡、CO２孵箱(孵育培養(yǎng)物)、水浴鍋、三氧消毒殺菌機、４℃冰箱(放置serum和培養(yǎng)用液)。無菌室的滅菌：定期打掃無菌室：每周打掃一次，先用自來水拖地、擦桌子、超凈工作臺等，然后用３‰來蘇爾或者新潔爾滅或者０.５％擦拭；CO２孵箱(培養(yǎng)箱)滅菌：先用３‰新潔爾滅擦拭，然后用７５％酒精擦拭或者０.５％，再用紫外燈照射；實驗前滅菌：打開紫外燈、三氧殺菌機、空氣凈化器系統(tǒng)各２０-３０分鐘；實驗后滅菌：用７５％酒精(３‰新潔爾滅)擦拭超凈臺、邊臺、倒置顯微鏡的載物臺；實驗人員的無菌準備：肥皂洗手、穿好隔離衣、帶好隔離帽、口罩、放好拖鞋、用７５％酒精棉球擦凈雙手。
National Medical Center-Glioma 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE 135-E6E7細胞、HSCT6細胞、KYSE 410細胞
HIT clone T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NL20細胞、SVEC4-10細胞、NW-38細胞
PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT 4細胞、Swiss-3T3細胞、H-2087細胞
ABC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1869細胞、L 363細胞、NCIH1930細胞
H-711細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03570細胞、SNK1細胞、NIT-1細胞
MSCs（mUCMSCs）細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH64細胞、NIH:OVCAR4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞
PaTu-8988s細胞系相關(guān)產(chǎn)品：8305-C細胞、EBC-1/original細胞、SCC154細胞
CA46細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-69細胞、C22 (Clara)細胞、Kasumi-6細胞
NCIH524細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SDBMSC細胞、MDA-415細胞、Kit225細胞
NCIH82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT55細胞、NTera 2細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞
Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SSP-25細胞、H6c7細胞、HANK細胞
NCI-H250細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-295細胞、H1341細胞、NCI-H226細胞
Huh7.5.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H716細胞、MM96L細胞、LoMeT-ccRcc細胞
C166 Adherent小鼠血管內(nèi)皮細胞系
MES-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSK-1細胞、CTLL(2)細胞、Calu3細胞
IEC-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH7777細胞、CTV1細胞、Kit 225細胞
Lung cancer-1/squamous細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC-3細胞、QBC-939細胞、H220細胞
Lung cancer-1/squamous細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC-3細胞、QBC-939細胞、H220細胞
NTC-200細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-05.04細胞、MDAMB-231細胞、K7M2 wt細胞
H-128細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H125細胞、UO-31細胞、H-9細胞
H-1581細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H841細胞、HLE細胞、YH細胞
H69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-50細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞、PG [Human lung carcinoma]細胞
SK-MEL28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 606.T細胞、Hs863T細胞、FRTL-5 Cl 2細胞
CCD 966 SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780 CP70細胞、149PT細胞、BE2-C細胞
Hs746-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU 4475細胞、NCI-H2126細胞、KY-270細胞
HCC-1806細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D324 Med細胞、RBL 2H3細胞、HCS2/8細胞
HCC2218細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 819.T細胞、rHSC-99細胞、HCC-78細胞
HS-68細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1438細胞、CCD-112 CoN細胞、ChaGo-K-1細胞
mREC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE(2c)細胞、16-HBE14o細胞、LLC-PK-1細胞
F81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI-SCC-90細胞、Natural Killer-92細胞、BHK21細胞
C57 Mouse Tumor 93細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos(RA1)細胞、HeLa-229細胞、Sf21細胞
R 1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品：E0771細胞、PA1細胞、MLE12細胞
SUSM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2073細胞、Hs604T細胞、MKN45細胞
ISHI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF17細胞、MC-26細胞、NCI-SNU-387細胞
NCIH64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo-201細胞、HL-1細胞、HOP62細胞
MM-1S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C12細胞、Human Embryonic Skin細胞、G 292 Clone A 141B1細胞
HUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FK81細胞、HuT78細胞、OSK-1細胞
P3-x63-Ag8 653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H23細胞、NCIH2126細胞、MV3細胞
PK-136細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1876細胞、NCI-H295細胞、DHL-8細胞
MHCC97L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSADX5細胞、COLO 741細胞、CEM-C7細胞
293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA87細胞、HT-144細胞、A875細胞
MCF-7B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6.1細胞、TFK-1細胞、NCIH1703細胞
UCH-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC10RGB細胞、LA-N-5細胞、H1944細胞
BCaP-37細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-FET細胞、High Five細胞、H22-H8D8細胞
HBE 135-E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SaOS細胞、HPAEpiC細胞、Clone 929細胞
NCI-BL2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UO31細胞、H3255_DA細胞、HO8910/PM細胞
NCI-H-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMDC細胞、HOS-TE85細胞、M619細胞
GS9L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse INsulinoma 6細胞、RAMOS2G64C10細胞、RGE細胞
Hs675T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780/CP70細胞、Tu-177細胞、624 MEL細胞
MDCKII-WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMAc-SF細胞、HRGEC細胞、JVM2細胞
GAK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSC-364細胞、C-28I2細胞、SVEC4-10細胞
NE1-E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU668細胞、H-1105細胞、MOLT 4細胞
NCIH28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJRH 30細胞、Tu 177細胞、3 LL細胞
SL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cates-1B細胞、NCI-H2347細胞、TFK1細胞
GB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DLD-1細胞、RPVSMC細胞、MOLT3細胞
HGE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs343T細胞、ECGI10細胞、A-2058細胞
C166 Adherent小鼠血管內(nèi)皮細胞系
MDA-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKOAS451細胞、BNL-CL.2細胞、HUT28細胞
Hs445細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-39細胞、CAL85-1細胞、CEM-C1細胞
SUPT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN14B細胞、Hs852T細胞、Cates 1B細胞
H64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC109細胞、NCI H82細胞、PLC PRF 5細胞
HOPC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC-893細胞、Normal Rat Kidney細胞、H209細胞
NCCIT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-929細胞、Ca Ski細胞、NPC-TW01細胞
CORL105細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-29細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞、MDA-MB 361細胞
BALL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wien 133細胞、HEH2細胞、UCLA-SO-M21細胞
JTC-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G 292 Clone A 141B1細胞、HSC2細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞
C-4-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan2細胞、TJ905細胞、NCI-H1395細胞
MC 116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM06141細胞、SW-13細胞、SKNO1細胞
PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT 4細胞、HCC1588細胞、RLE-6TN細胞
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