"Anip-973 Adherent人肺腺癌細胞系
細胞背景資料：肺腺癌
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質(zhì)，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
Anip-973 Adherent人肺腺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
NCIH441細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ASH-3細胞、HA細胞、A-204細胞
Nb2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-4I細胞、C32-mel細胞、U-251MG細胞
LPC-H12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC 42細胞、MCF7/WT細胞、Kuramochi細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Vero from pool #76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM-3細胞、DoTc2 4510細胞、HCE-2 [50.B1]細胞
JHH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 153細胞、KCL22細胞、675T細胞
Ca-Ski細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIM1215細胞、KPNRTBM1細胞、L-1210細胞
細胞生長特性：貼壁
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細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié)：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔毎硕嗫陔s，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當風衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
HFB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU484細胞、SUSM-1細胞、BA/F3細胞
STTG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY 7701細胞、LNCaP-Clone-FGC細胞、SKRC20細胞
L02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1651細胞、NCI-H1435細胞、B958細胞
NCI-SNU-119細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK clone 49F細胞、MDAMB134細胞、H-2172細胞
MOLT 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H676B細胞、NBLAN5T細胞、TMK-1細胞
B16-BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C6661細胞、COLO 357細胞、HLEC-B3細胞
Rat Basophilic Leukemia-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/O-Ag14細胞、PG-LH7細胞、CAL-27細胞
PANC-02-03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-EBNA細胞、MSTO211H細胞、MeWo細胞
MDBK (NBL-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H378細胞、RIN-m細胞、COR-L23/P細胞
H1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu-1細胞、U20-S細胞、Centre Antoine Lacassagne-39細胞
L- cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMR 106細胞、32D CL3細胞、SK MEL-28細胞
NCI-H1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC26細胞、H2030細胞、D-283 Med細胞
L cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMC3細胞、M619細胞、MKN 28細胞
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Caco-2BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 954細胞、SCC-9細胞、NCI-H2141細胞
NCIH2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品：16-HBE細胞、CFPAC1細胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細胞
UM-UC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1A細胞、H1299細胞、HD-LM-2細胞
Hs611T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F0細胞、MFD-1細胞、NCIH1385細胞
Hep-3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs445細胞、T24細胞、HOS/MNNG細胞
SK MEL 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA 420細胞、AKR細胞、Case 3細胞
SKMEL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-20細胞、GC-2spd(ts)細胞、BAC1.2F5細胞
HCC0078細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT144細胞、OVCAR-4細胞、HRCEC細胞
AtT20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U138MG細胞、HS-766T細胞、PA12細胞
WM-266-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-966SK細胞、T-HSC細胞、MCF-7/ADR-RES細胞
HSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB435S細胞、AC29細胞、D407 RPE細胞
Farage Original Line細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-Van細胞、HO1N1細胞、HEL 299細胞
L cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C38細胞、CHO-K1細胞、Hep-G2細胞
SK-N-BE(2C)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP8細胞、INS1E細胞、LM2-4175細胞
H-128細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H125細胞、UO-31細胞、H-9細胞
NCIH647細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225-K6細胞、Tca-83細胞、CX1細胞
SU-DHL-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CII細胞、HMrSV5細胞、MCA38細胞
NCTC1469細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SkChA1細胞、RL952細胞、Madison 109細胞
SUM-149PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AU 565細胞、LIM 1215細胞、HEYA8細胞
KMS-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARH-77細胞、H-2110細胞、HME1細胞
L23/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ETCC007細胞、Mink細胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞
NCI-446細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RM1細胞、H1522細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞
ST 486細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEC-B4G12細胞、KLN 205細胞、BMF細胞
M4e細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GBCSD細胞、JeKo 1細胞、H676B細胞
293S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL-34細胞、LC1sq細胞、RBL-2H3細胞
SO-RB50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U118-MG細胞、NP69SV40T細胞、H-660細胞
PC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb2細胞、HOP92細胞、HLEB3細胞
H-322細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LOU-NH91細胞、NCI-H125細胞、KLM1細胞
HuTu-80細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alpha Mouse Liver 12細胞、3T3-L1 ad細胞、Vero from pool #76細胞
HuH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H747細胞、Wien133細胞、AKR細胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1/P細胞、HFL細胞、RBSMC細胞
NCIH1793細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-324 Med細胞、GM04154B細胞、NCIH82細胞
A 172細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A427細胞、BEAS2B細胞、Tissue Culture-1細胞
L-540細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRO 81-2細胞、NCI-H2405細胞、RL-95-2細胞
MDCC-MSB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-33-A細胞、RDES-1細胞、NCI-H1623細胞
VSC4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCH-1細胞、KE-37細胞、118 MG細胞
ML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HARA-B細胞、H-526細胞、SGC996細胞
SK MEL 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Human Colon細胞、NP69細胞、HREC細胞
PTK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC97L細胞、SUDHL-1細胞、Ramos (RA 1)細胞
RL-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266S細胞、MNNG-HOS (Cl#5)細胞、MDA468細胞
SK Mel28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：USMC細胞、KU 812F細胞、RWPE-2細胞
UMUC14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono Mac 1細胞、CT26-clone 25細胞、MNNG-HOS細胞
Anip-973 Adherent人肺腺癌細胞系
DV90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA01/04 (HLE)細胞、RenCa細胞、373 MG細胞
Co 205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs1.Tes細胞、KNS81細胞、KYSE 270細胞
NCIH2342細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RTMC細胞、ssMCF-7細胞、CAL148細胞
hADSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CLONE M3細胞、MESSA Dx5細胞、J82COT細胞
SVOG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-1-P細胞、HCC94細胞、B10BR細胞
BE2-M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO680N細胞、CDC/EU.HMEC-1細胞、SW1222細胞
E304細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SR-786細胞、3LL細胞、U138細胞
HOP-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LK2細胞、HUTU80細胞、T24細胞
NCIH929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251MG細胞、HuCCT-1細胞、MARC145細胞
OVCA5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-10-05細胞、AR4-2J細胞、A-704細胞
NBL-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL952細胞、C4-1細胞、HCC0044細胞
L-02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4IIE細胞、NALM6細胞、CCRF-CEM C1細胞
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