"EO771 Adherent小鼠髓樣乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：惡性乳腺癌；雌性；C５７BL/６
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
貼壁消化難題：１，先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍，使瓶內(nèi)沒有血清了，減少對胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細(xì)胞有些消化下來時(shí)，拿著瓶口，運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體，這樣細(xì)胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團(tuán)、絮狀：消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話，一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng)，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來的趨勢)，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細(xì)胞，收集全部的細(xì)胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會(huì)死亡脫落，在換液的時(shí)候可以清除掉！
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
EO771 Adherent小鼠髓樣乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗(yàn)分享：支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長，營養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個(gè)世界性問題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達(dá)，又不能通過可視法對其進(jìn)行檢測，而且它對細(xì)胞的生長率影響較小，不易引起注意。國內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細(xì)胞的支原體種類是很多的，國外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞，有的細(xì)胞株可以同時(shí)污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材帶來的污染和用來制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個(gè)方面來預(yù)防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作；細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后，特別是重要的細(xì)胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細(xì)胞壁，一般來講，對作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素，如萬古霉素等完全不敏感；對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用，所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
SU.86.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D6P2T細(xì)胞、U031細(xì)胞、IMR90細(xì)胞
CMT-167細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCLC21H細(xì)胞、Hs-578-T細(xì)胞、SU8686細(xì)胞
Mc Coy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHs74 Int細(xì)胞、526細(xì)胞、KASUMI1細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
A2780-CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578.T細(xì)胞、NG10815細(xì)胞、KM-H2細(xì)胞
VM-CUB-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHIN-3細(xì)胞、HFL 1細(xì)胞、HOS(TE85)細(xì)胞
MDAMB361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH-6細(xì)胞、SW1783細(xì)胞、HT1080細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁
EO771 Adherent小鼠髓樣乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng)：１)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞，而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決；２)貼壁細(xì)胞生長緩慢；適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過２０%)，或可根據(jù)該細(xì)胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長不均：貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細(xì)胞進(jìn)行消化，重懸打散細(xì)胞，加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
WEHI-279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31FUJ細(xì)胞、LICCF細(xì)胞、PC14細(xì)胞
P36細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGSMC細(xì)胞、NCIH2227細(xì)胞、NHDF細(xì)胞
SW 1222細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2029細(xì)胞、T. T細(xì)胞、CAL 51細(xì)胞
NK-92 MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2291細(xì)胞、GP293細(xì)胞、BE(2)M17細(xì)胞
K7M2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03569D細(xì)胞、Pro-Lec1.3C細(xì)胞、NCI-H1092細(xì)胞
RPMI-1788細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1693細(xì)胞、LK2細(xì)胞、SCC-1395細(xì)胞
HUVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1436細(xì)胞、H2081細(xì)胞、SKMEL-1細(xì)胞
RERF-LCMS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1882細(xì)胞、MAntle cell VERona-1細(xì)胞、BLO-11細(xì)胞
KMS-26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARH-77細(xì)胞、H-2110細(xì)胞、HME1細(xì)胞
RAOEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS62細(xì)胞、WSU-HN13細(xì)胞、H-1355細(xì)胞
EC-9706細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-s細(xì)胞、BaF3細(xì)胞、G292細(xì)胞
M-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCCC9810細(xì)胞、CAL148細(xì)胞、MUVEC細(xì)胞
P3JHR-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV40-MES13細(xì)胞、NCI-H920細(xì)胞、SKNBE細(xì)胞
EO771 Adherent小鼠髓樣乳腺癌細(xì)胞系
SK-GT-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：6-10B細(xì)胞、H1963細(xì)胞、M2-10B4細(xì)胞
RPMI1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE50細(xì)胞、RSC-96細(xì)胞、HASMC細(xì)胞
SKNO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-151細(xì)胞、IEC-18細(xì)胞、C32 [Human melanoma]細(xì)胞
SKNO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-151細(xì)胞、IEC-18細(xì)胞、C32 [Human melanoma]細(xì)胞
LAN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-8細(xì)胞、AD-293細(xì)胞、U373細(xì)胞
HT 1197.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBSMC細(xì)胞、RMS 13細(xì)胞、KNS-42細(xì)胞
IMR90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Natural Killer-92細(xì)胞、Line 522細(xì)胞、COLO684細(xì)胞
MeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly3細(xì)胞、HBVSMC細(xì)胞、OPM-2細(xì)胞
HuCC-T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP 62細(xì)胞、P3HR1-BL細(xì)胞、H-209細(xì)胞
NCI-BL2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UO31細(xì)胞、H3255_DA細(xì)胞、HO8910/PM細(xì)胞
F98細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-CAR細(xì)胞、YES 2細(xì)胞、YAC-1細(xì)胞
HTori-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM6細(xì)胞、Hs 746T細(xì)胞、MUG-Chor1細(xì)胞
NCIH510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-9細(xì)胞、HCT GEO細(xì)胞、SNU-886細(xì)胞
JHH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC-9細(xì)胞、LP1細(xì)胞、IM95細(xì)胞
KTC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM39細(xì)胞、3T3 Swiss Albino細(xì)胞、HCC-94細(xì)胞
ETCC007細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP303細(xì)胞、Panc 08.13細(xì)胞、RCS細(xì)胞
F-36P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepa 1-6細(xì)胞、NB9細(xì)胞、PLMVEC細(xì)胞
AR4-IP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：S3 HeLa細(xì)胞、Scott and White No. 13細(xì)胞、Rat Fetal Lung-6細(xì)胞
JEG-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-295R細(xì)胞、GM02131A細(xì)胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞
NCIH1048細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1573細(xì)胞、OCIAML5細(xì)胞、MDCC-MSB1細(xì)胞
NCI.H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE450細(xì)胞、751細(xì)胞、AG06814-J細(xì)胞
Epstein-Barr-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HK2細(xì)胞、MLTC-1細(xì)胞、SKMES細(xì)胞
NCIH226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-524細(xì)胞、LTPA細(xì)胞、COLO320DM細(xì)胞
NCI-H2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H102細(xì)胞、Mouse podocyte細(xì)胞、Evsa-T細(xì)胞
A-172MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEpiC細(xì)胞、SKG IIIa細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞
Panc 5.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WBF344細(xì)胞、CA-OV-3細(xì)胞、MESSA Dx5細(xì)胞
rRMECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NEC-8細(xì)胞、751-NA細(xì)胞、U 937細(xì)胞
MC3T3-E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2228細(xì)胞、RAW-264.7細(xì)胞、Hs 729T細(xì)胞
MCF.10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEP-3B2細(xì)胞、P1-Raji細(xì)胞、F442A細(xì)胞
MCF.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNEP1細(xì)胞、HCEC細(xì)胞、AGS細(xì)胞
3D4/21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D CL3細(xì)胞、MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞、TFH細(xì)胞
NCI-H2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 684細(xì)胞、D6P2T細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞
95C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT474細(xì)胞、Lu-99A細(xì)胞、UO.31細(xì)胞
HCC1171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wistar Institute-38細(xì)胞、MiaPaCa-2細(xì)胞、DSL-6A/C1細(xì)胞
DMS114細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2細(xì)胞、Nb 2細(xì)胞、HCC-9204細(xì)胞
Hs 688(A).T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC25細(xì)胞、E.G7-OVA細(xì)胞、SK LU 1細(xì)胞
HSC-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H69細(xì)胞、Co 205細(xì)胞、HKC細(xì)胞
MDA 1386細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC2/Ad細(xì)胞、Huh-7.5.1細(xì)胞、HCC2185細(xì)胞
BT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 19細(xì)胞、SHP-77細(xì)胞、SCC25細(xì)胞
BCECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC403細(xì)胞、MCF-7/ADR-RES細(xì)胞、MDA-MB 468細(xì)胞
KM933細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi-2 DAP細(xì)胞、SK-Mel1細(xì)胞、BT549細(xì)胞
NCI H69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU.86.86細(xì)胞、CAL51細(xì)胞、SNU-387細(xì)胞
EO771 Adherent小鼠髓樣乳腺癌細(xì)胞系
U-118-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP4細(xì)胞、Hs611T細(xì)胞、NB-9細(xì)胞
OCI-LY-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 445細(xì)胞、L6細(xì)胞、SMMC7721細(xì)胞
Okayama University Medical School-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EHEB細(xì)胞、HT 1080.T細(xì)胞、2008細(xì)胞
Tn5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞、B16/F10細(xì)胞、RCC10RGB細(xì)胞
Farage Original Line細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-Van細(xì)胞、HO1N1細(xì)胞、HEL 299細(xì)胞
RCC 7860細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-205細(xì)胞、WEHI231細(xì)胞、CAKI 2細(xì)胞
751-NA-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA-560細(xì)胞、SW 480細(xì)胞、KYSE 70細(xì)胞
P815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL2細(xì)胞、NPA'87細(xì)胞、hFOB 1.19細(xì)胞
NCI-H1869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-1034細(xì)胞、ssMCF7細(xì)胞、TGHAVSMC細(xì)胞
MFE-280細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAS3細(xì)胞、Calu 6細(xì)胞、Panc08.13細(xì)胞
Rat 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR4IP細(xì)胞、U251-MG細(xì)胞、HS940細(xì)胞
SW 1222細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2029細(xì)胞、HFL-1細(xì)胞、Ramos 2G6 4C10細(xì)胞
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