"DLM8 AdherentC3H小鼠骨肉瘤細胞系
細胞背景資料：Dunn's骨肉瘤；雌性；C３H
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
DLM8 AdherentC3H小鼠骨肉瘤細胞系
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞復蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴，浸入了液氮，取出后因安剖內液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應帶有防護眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細胞懸液，裝入離心管中，再補加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉/分）５分鐘，取上清后再重復用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細胞時，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即通知細胞實驗室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細胞回溫至３７°C，并讓運送過程中少數脫落的細胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內取出flask內之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內，依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中，或細胞已長滿盤，則將細胞做傳代培養(yǎng)。
SHSY-5Y細胞系相關產品：HEL-1細胞、SKLMS-1細胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞
L Wnt-3A細胞系相關產品：HANK1細胞、FRO細胞、Ball 1細胞
H-508細胞系相關產品：LLCPK1細胞、NCIH727細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
KP4細胞系相關產品：NS653細胞、F9細胞、VP229細胞
Hs-729-T細胞系相關產品：RPMI8226細胞、OCILY-10細胞、MM96L細胞
EA.Hy926細胞系相關產品：NCI-H1770細胞、SCCVII細胞、P36細胞
細胞生長特性：貼壁
DLM8 AdherentC3H小鼠骨肉瘤細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當地溫度，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
H-2030細胞系相關產品：OCIAML4細胞、HCC827細胞、H-128細胞
UT7細胞系相關產品：MEG01細胞、TE-671細胞、T/GHA-VSMC細胞
RN-c細胞系相關產品：BSC-1細胞、X63細胞、NTERA-2細胞
H2052_MM細胞系相關產品：SNU-368細胞、GBCSD細胞、WM 451-Lu細胞
SK-CO-1細胞系相關產品：H-1734細胞、NCI-H1437細胞、CV 1細胞
W256細胞系相關產品：HUC細胞、SNU-739細胞、SKMES1細胞
EOC20細胞系相關產品：COV-434細胞、AgC11x3A細胞、Madin-Darby Canine Kidney細胞
BEL 7405細胞系相關產品：NCI-H128細胞、D-341細胞、IOSE80UBC細胞
TGBC11TKB細胞系相關產品：NCIH2085細胞、NCTC-3960細胞、OVCAR-433細胞
G361細胞系相關產品：EBNA-293細胞、H-1755細胞、Ly10細胞
Ly3細胞系相關產品：NCI-H295R細胞、MDA-MB-330細胞、LLC-WRC 256細胞
Kit225 K6細胞系相關產品：2780細胞、PA12細胞、NCI-H508細胞
KNS-62細胞系相關產品：UMNSAH-DF-1細胞、SK-N-BE(2)細胞、MNNG/HOS細胞
DLM8 AdherentC3H小鼠骨肉瘤細胞系
CCD18Co細胞系相關產品：HLE B-3細胞、NCI-H1385細胞、HBL 100細胞
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OUMS-23細胞系相關產品：210RCY3-Ag1.2.3細胞、SF 763細胞、COLO206F細胞
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SW-1353細胞系相關產品：AZ521細胞、NCIH146細胞、C42細胞
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Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞系相關產品：UACC 893細胞、JVM2細胞、LS-411N細胞
WSU-DLCL(2)細胞系相關產品：MDCK細胞、V 79-4細胞、HCV 29細胞
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HeLa/DDP細胞系相關產品：COLO 320細胞、KATO 3細胞、L-6 myoblast細胞
TE 85.T細胞系相關產品：BE(2)M17細胞、RPTEC/TERT1細胞、GA-10 (Clone 4)細胞
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Hs604T細胞系相關產品：TSCCa細胞、P3X63細胞、GA-10 clone 4細胞
EM-3細胞系相關產品：WERI-Rb-1細胞、SUP T1細胞、CNE-2細胞
Mel624細胞系相關產品：NCIH847細胞、CAL 148細胞、SK Mel 24細胞
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SUDHL-4細胞系相關產品：NCI H345細胞、NW-MEL-38細胞、H-676B細胞
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KM-H2細胞系相關產品：HMC-1細胞、CaSki細胞、KP-2細胞
SK-MES細胞系相關產品：624-mel細胞、BBE細胞、MPP 89細胞
ZR75-30細胞系相關產品：NCI-H1522細胞、SCC VII細胞、HEC1-B細胞
SNU-719細胞系相關產品：HcerEpic細胞、P36細胞、Sp2/0-Ag14細胞
OCI-AML5細胞系相關產品：JURKAT E-6.1細胞、HCe-8693細胞、GM07404A細胞
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NKM-1細胞系相關產品：ZYM-SVEC01細胞、SCL-1細胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細胞
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MCF-7ADR細胞系相關產品：Walker-Ca.256細胞、KASUMI1細胞、EJ 138細胞
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DLM8 AdherentC3H小鼠骨肉瘤細胞系
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NCI-H1648細胞系相關產品：CT26-clone 25細胞、UPCI:SCC154細胞、MSTO-211H細胞
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GLC82細胞系相關產品：NCTC 929細胞、Panc5.04細胞、TE-8細胞
SCLC21H細胞系相關產品：OCM-1A細胞、Balb/c3T3細胞、MDA-MB-231 #4175細胞
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