"NCI-H2591 Adherent人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：上皮樣間皮瘤；男性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時(shí)，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時(shí)更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時(shí)，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時(shí)，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時(shí)，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H2591 Adherent人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動作輕，避免晃動。細(xì)胞生長挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長：二、細(xì)胞細(xì)化太過，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
P30 OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly1細(xì)胞、M-1細(xì)胞、SK-MEL-31細(xì)胞
HMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-CCRF (CAMR)細(xì)胞、624 MEL細(xì)胞、GM2132細(xì)胞
LS 174 T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WILL2細(xì)胞、HepG2-luc細(xì)胞、MPP89細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SHEP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-39細(xì)胞、Panc-08.13細(xì)胞、Hs940T細(xì)胞
HIC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hA549細(xì)胞、GP2d細(xì)胞、SF 763細(xì)胞
Rat 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMrSV5細(xì)胞、NCI-H1792細(xì)胞、ACT-1細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁
NCI-H2591 Adherent人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候，它就會停止生長，及時(shí)傳代后，細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補(bǔ)加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
Tu 212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-187細(xì)胞、769P細(xì)胞、ssMCF7細(xì)胞
Capan2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-460細(xì)胞、KMB 17細(xì)胞、DI TNC1細(xì)胞
LNCaP subline C4-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss3T3細(xì)胞、SK_HEP1細(xì)胞、CHO/dhFr-細(xì)胞
HSC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M-2B4細(xì)胞、OVCAR.8細(xì)胞、Ca Ski細(xì)胞
RPTEC/TERT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK-2細(xì)胞、H1819細(xì)胞、NT2細(xì)胞
OVCAR5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NSH細(xì)胞、C3H10T1/2 clone8細(xì)胞、H524細(xì)胞
OE21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H508細(xì)胞、ECV304細(xì)胞、H64細(xì)胞
HCET細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H295R細(xì)胞、FM88細(xì)胞、EA.hy 926細(xì)胞
MBT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEY-A8細(xì)胞、HT-1376細(xì)胞、EC109細(xì)胞
AE1201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 357細(xì)胞、WM-266-mel細(xì)胞、MM1S細(xì)胞
MIA-PaCa-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dakiki細(xì)胞、HSC3細(xì)胞、HCPEpiC細(xì)胞
ECC 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-2細(xì)胞、J774細(xì)胞、3T3 J2細(xì)胞
MUTZ3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero-76細(xì)胞、HCC202細(xì)胞、HUCCT1細(xì)胞
NCI-H2591 Adherent人肺癌細(xì)胞系
BHP-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel 2細(xì)胞、FCCH1018細(xì)胞、OE33細(xì)胞
PTK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIII細(xì)胞、OVCAR3細(xì)胞、MDA-MB-435 S細(xì)胞
Vero-E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-513細(xì)胞、KMH-2細(xì)胞、PSN1細(xì)胞
Vero-E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-513細(xì)胞、KMH-2細(xì)胞、PSN1細(xì)胞
WPMY-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：8226細(xì)胞、K7M2-WT細(xì)胞、VM Cub 1細(xì)胞
Calu-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-140細(xì)胞、BCAP37細(xì)胞、NCI-BL2141細(xì)胞
WSU-DLCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL-95-2細(xì)胞、MIO-M1細(xì)胞、CEM/C1細(xì)胞
SRA01/04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-149PT細(xì)胞、MAEC細(xì)胞、Colo-201細(xì)胞
C2BBe1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3-M細(xì)胞、GT39細(xì)胞、HPAF2細(xì)胞
X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MX1細(xì)胞、FRH-0201細(xì)胞、H-1581細(xì)胞
NCI-H2195細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細(xì)胞、HEK 293 EBNA細(xì)胞、VMCUB1細(xì)胞
HEK-293-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32Dcl3細(xì)胞、Bac 1.2F5細(xì)胞、BALB/3T3 clone A31細(xì)胞
H676細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC38細(xì)胞、SKMES-1細(xì)胞、BC-025細(xì)胞
Ramos(RA1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPEC-J2細(xì)胞、SK-Mel 2細(xì)胞、COLO320/DM細(xì)胞
OAW 42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMG-I細(xì)胞、ME-180細(xì)胞、RPMI no 8226細(xì)胞
SEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-a2細(xì)胞、OC-3-VGH細(xì)胞、WM115細(xì)胞
MMAc-SF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEB細(xì)胞、Kit-225-K6細(xì)胞、MB157細(xì)胞
NCI-H1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1618細(xì)胞、COLO-1細(xì)胞、T 24細(xì)胞
OP9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU354細(xì)胞、P3X63 Ag8細(xì)胞、HCC-1187細(xì)胞
M109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JAR細(xì)胞、RGC5細(xì)胞、Hs895.T細(xì)胞
MonoMac 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231-luc細(xì)胞、LA795細(xì)胞、AMC-HN-8細(xì)胞
KBM-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BPH-1細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞、Oregon J-111細(xì)胞
MHCC-LM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-28I2細(xì)胞、JROECL19細(xì)胞、Hs934T細(xì)胞
Hs 578Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1171細(xì)胞、Tu686細(xì)胞、J82細(xì)胞
Mv1Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63-Ag8.653細(xì)胞、KU-812細(xì)胞、BIU-87細(xì)胞
J.E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL 33細(xì)胞、SU86_86細(xì)胞、18G3.cl 1細(xì)胞
SUDHL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H841細(xì)胞、RAOEC細(xì)胞、ATN-1細(xì)胞
Mouse INsulinoma 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251MG細(xì)胞、H1436細(xì)胞、WI38細(xì)胞
HuCC-T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP 62細(xì)胞、P3HR1-BL細(xì)胞、H-209細(xì)胞
EOC 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(1)n細(xì)胞、HRMC細(xì)胞、CORL23細(xì)胞
KCL22S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞、SHG-44細(xì)胞、SK UT 1細(xì)胞
MDAMB330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞、OsA-CL細(xì)胞、MADISON LUNG TA-109細(xì)胞
Hopkins-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKBr3細(xì)胞、H1650細(xì)胞、Panc 4.03細(xì)胞
SUM-159-PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/0-Ag-14細(xì)胞、SW1271細(xì)胞、OVCAR4細(xì)胞
SCC 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VeroC1008細(xì)胞、NCI-H522細(xì)胞、MV4-11細(xì)胞
P3/NS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3LL細(xì)胞、SUM-102PT細(xì)胞、IPLB-Sf21細(xì)胞
SW626細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：XWLC-05細(xì)胞、VMRC-LCD細(xì)胞、HCV29細(xì)胞
RDES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-4B/C細(xì)胞、CD 18細(xì)胞、BT 549細(xì)胞
MuM-2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG細(xì)胞、KYSE 70細(xì)胞、CL34細(xì)胞
K 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker/LLC-WRC 256細(xì)胞、RPMI2650細(xì)胞、H-1568細(xì)胞
T47D:A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-45細(xì)胞、FLC7細(xì)胞、OACP4 C細(xì)胞
H1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL細(xì)胞、NCI-H446細(xì)胞、NCI-H1395細(xì)胞
NCI-H2591 Adherent人肺癌細(xì)胞系
MDA-MB-435S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs_578t細(xì)胞、EoL-1 cell細(xì)胞、G402細(xì)胞
H-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH295R細(xì)胞、HEL 299細(xì)胞、PG-BE1細(xì)胞
TF-1a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas299細(xì)胞、KYSE-140細(xì)胞、S37細(xì)胞
H929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：639 V細(xì)胞、VK-2/E6E7細(xì)胞、NOK細(xì)胞
SK BR 03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3NIH細(xì)胞、KTC1細(xì)胞、Hs 739.T細(xì)胞
SUDHL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T98-G細(xì)胞、NEC-8細(xì)胞、KP 4細(xì)胞
EA.Hy926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1770細(xì)胞、SCCVII細(xì)胞、P36細(xì)胞
WEHI-164細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC 3細(xì)胞、3T3(A31)細(xì)胞、PC-3M-1E8細(xì)胞
NCI H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-747細(xì)胞、C4-2B細(xì)胞、SCCVII細(xì)胞
H341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MTEC1細(xì)胞、KYSE-30細(xì)胞、C8D1A細(xì)胞
MDA-MB415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMCUB-1細(xì)胞、HEK 293 EBNA細(xì)胞、OV-CA 432細(xì)胞
LNCaP subline C4-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss3T3細(xì)胞、HS578T細(xì)胞、HCMEC細(xì)胞
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