"SNU-119 Adherent人卵巢癌細胞系
細胞背景資料:卵巢癌;女性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞復蘇相關(guān)注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
SNU-119 Adherent人卵巢癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。
WML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMR-106細胞、BCP1細胞、K7M2細胞
IGR.OV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1197細胞、C38細胞、GM17346細胞
PLC/PRF/5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos.G6.C10細胞、HEY A8細胞、OS-RC-2細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
A-172MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEpiC細胞、SKG IIIa細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞
NCM-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2227細胞、H-220細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞
QGP 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-35細胞、LTEPsm細胞、CATH.a細胞
細胞生長特性:貼壁
SNU-119 Adherent人卵巢癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難,最關(guān)鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
C4-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-II-E-C3細胞、FRO81-2細胞、LCD細胞
SKGT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 895 T細胞、SK LU 1細胞、TE 32細胞
MEL-526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tj-905細胞、HEK 293-H細胞、WILL2細胞
KYSE450細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NALM 6細胞、HEK293FT細胞、KMBC細胞
P31-FUJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:801-D細胞、HCT 15細胞、SL-29細胞
MS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1522細胞、MS-751細胞、YES-2細胞
COR-L88細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FLC-7細胞、JCA1細胞、H-1385細胞
MV-1-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIU-87/Adr細胞、NOZC-1細胞、T 98 G細胞
EVSA/T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-5細胞、NCI-H196細胞、A9細胞
PZ-HPV-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-216細胞、174xCEM.T2細胞、HEK-293FT細胞
SJ-Rh 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC PK1細胞、H716細胞、RKN細胞
BIC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1563細胞、Adeno 293細胞、Panc-3_27細胞
D6P2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL1細胞、SAS細胞、Hs 675.T細胞
SNU-119 Adherent人卵巢癌細胞系
BEL 7404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo205細胞、JiyoyeP-2003細胞、HIMEC細胞
WM239A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M-IE8細胞、OVCAR420細胞、TCMK1細胞
EC-GI-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-180細胞、NOR10細胞、P31FUJ細胞
EC-GI-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-180細胞、NOR10細胞、P31FUJ細胞
HAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney 21細胞、A-72細胞、DU4475細胞
HET1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L279細胞、Mv 1 Lu細胞、HAVSMC細胞
H889細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB415細胞、MDA.MB.435細胞、Ramos 2G6 4C10細胞
Hs-274-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GI-1細胞、HeLa S-3細胞、Pfeiffer細胞
MKN-74細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMS 1598細胞、IHHA-1細胞、alpha-TC1-6細胞
HO-8910PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T6細胞、TYKnu細胞、T98G細胞
L5178Y-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:mIMCD3細胞、RT-BM細胞、HK2細胞
WEHI 164細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFLS-OA細胞、H-250細胞、Neuro-2a細胞
NCI-H929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:S3-HeLa細胞、Glioma 261細胞、NCI-H865細胞
H-1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb 1-Lu細胞、ES2細胞、EoL-1細胞
Hs 895.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 79細胞、SRA01/04細胞、HOP 92細胞
HCV29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GS9L細胞、HCC-1171細胞、WEHI 164細胞
HSC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 900細胞、AR42J細胞、H-510A細胞
KYSE-30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:95-D細胞、NCTC929細胞、3T3 L1細胞
RH35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs606T細胞、SK-N-BE(2)C細胞、HCE-T細胞
LICR-LON-HN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW-38細胞、HOP-62細胞、H2023細胞
Hs-281-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW01細胞、OVCA432_Bast細胞、HT 1080細胞
IEC-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:McA-RH7777細胞、CTV1細胞、Kit 225細胞
LTEPsm細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H596細胞、ONS76細胞、LC-1/sq細胞
HSAS3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE/CA-PJ-34細胞、Buffalo Rat Liver-3A細胞、HUTU80細胞
MPASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_03_27細胞、H-1672細胞、T-HSC細胞
HGSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE12細胞、RC92A細胞、NCI H82細胞
H2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Molm14細胞、CALU1細胞、L 1210細胞
HDLM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC-97細胞、D407細胞、H2106細胞
NCI-H920細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEC-B3細胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞、CORL279細胞
KBM-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY-50細胞、GS-9L細胞、SK-N-MC細胞
TOV-21G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H22-H8D8細胞、H865細胞、SNU-251細胞
Neukoplast細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HKF細胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細胞、TOV21G細胞
HCEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2BBe1細胞、Meat Animal Research Center-145細胞、RFL-6細胞
EM-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI-Rb-1細胞、SUP T1細胞、CNE-2細胞
H1238細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dysplastic Oral Keratinocyte細胞、PC-3M-IE8細胞、A549-Taxol細胞
LM(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0015細胞、373 MG細胞、B/C3T3細胞
H-510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-2 ad細胞、FHL124細胞、SK-BR3細胞
Tregs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epstein-Barr-3細胞、SCC9細胞、SKNBE2細胞
KHYG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cates 1B細胞、OVCAR8/ADR細胞、H2172細胞
LP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE520細胞、Colon26細胞、HIBEC細胞
AtT20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U138MG細胞、HS-766T細胞、PA12細胞
UCW 100細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTEC/TERT 1細胞、SW839細胞、TCam 2細胞
SNU-119 Adherent人卵巢癌細胞系
SP-2/0-AG14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAD2細胞、MN60細胞、KP-N-NS細胞
Panc-03.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320F細胞、NKT細胞、B16-BL6細胞
SW-48細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 16細胞、H-2030細胞、B16 F1細胞
NCIH446細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Medical University of Graz-Chordoma 1細胞、Ketr3細胞、HRA 19細胞
MIA Paca2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT-28細胞、rRTEC細胞、BL2141細胞
Hs940.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 HEK細胞、UMNSAH-DF 1細胞、IGROV細胞
no.11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCE-2 [50.B1]細胞、THC-8307細胞、HCA-7細胞
CEK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEAS 2B細胞、HS 445T細胞、Calu-1細胞
MDAMB134細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT.T15細胞、Panc-10.05細胞、Nittby-Salford 1細胞
U-373MG ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-Sf21-AE細胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細胞、GOS-3細胞
NCIH716細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03573A細胞、YTMLC-90細胞、LAN6細胞
MEL-526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tj-905細胞、D283-MED細胞、Panc 03.27細胞
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