"VMM39 Adherent人黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：黑色素瘤；神經(jīng)節(jié)轉(zhuǎn)移；男性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
正確的細胞復(fù)蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復(fù)蘇。那么，細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內(nèi)取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
VMM39 Adherent人黑色素瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號的血清。
NCI-H1092細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 2650細胞、COR-L105細胞、KOSC-2細胞
U-373MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Astrocyte type I clone細胞、FU-97細胞、DoTc2 4510細胞
KS-SLK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-668細胞、Mink Lung細胞、Nthy-ori 3-1細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HOS TE 85細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293AD細胞、LI7細胞、MOVAS-1細胞
RCC10RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA801-95C細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞、MIO-M1細胞
HUT-125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92_1_7細胞、hTERT-RPE-1細胞、VeroE6細胞
細胞生長特性：貼壁
VMM39 Adherent人黑色素瘤細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復(fù)蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
B95-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 32.T細胞、CoC1細胞、118MG細胞
Detroit-562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T98細胞、H-35 Reuber細胞、QGP-1細胞
SNU-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSC-34細胞、751-NA-15細胞、CPA 47細胞
MCF7/WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB134VI細胞、MMAc-Serum Free細胞、C26細胞
LA4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293/EBNA-1細胞、NS1細胞、T HEECs細胞
BEL 7404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo205細胞、JiyoyeP-2003細胞、HIMEC細胞
SLMT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、SNU1細胞、BV173細胞
CNE1-LUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE3A細胞、C643細胞、H-889細胞
THPI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2C)細胞、NBL-12細胞、HS940細胞
C4 I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alexander cells細胞、CWR-22rv1細胞、CC-LP-I細胞
HuP-T4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-6細胞、OCI/AML-2細胞、EL4細胞
Hmy.2 CIR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Balb/c3T3細胞、NE1細胞、KYSE 450細胞
H-889細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1930細胞、NS-I/1細胞、SCL-1細胞
VMM39 Adherent人黑色素瘤細胞系
BJ [Human fibroblast]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2591細胞、PGBE1細胞、JCA-1細胞
BHP 10-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：W133細胞、Jurkat clone A3細胞、RPMI 1788細胞
GNM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW579細胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、SK.MEL.5細胞
GNM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW579細胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、SK.MEL.5細胞
HCC0366細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF/Adr細胞、RN-c細胞、NTC200細胞
LM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1500細胞、UCLA-SO-M14細胞、H-35細胞
NCI H2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-SF-21細胞、Human podocyte細胞、TE671/RD細胞
Wayne State University-Head and Neck 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NU-GC-4細胞、ND7/23細胞、H1792細胞
OVMANA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-5細胞、LIXC-002細胞、PA317細胞
hTERT-HPNE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-8/ADR細胞、LUDLU1細胞、Lewis lung carcinoma細胞
KM H-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1838細胞、Kit 225細胞、AZ521細胞
H1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM0637細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞
H1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY7細胞、HO-8910PM細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞
OCI-Ly3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8166細胞、WERI-Rb-1細胞、PLA801D細胞
Human Embryonic Skin細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BeWo細胞、UMUC3細胞、SUDHL1細胞
Hs 888.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPDC-CCL141細胞、LC-MS細胞、TCC-PAN2細胞
Rat podocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 239-A細胞、HCC2185細胞、CHL-1細胞
COLO-680N細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293FT細胞、KP 4細胞、HGSMC細胞
OCI-AML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PSN1細胞、DMS79細胞、KLE細胞
PC 61 5.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NE1-E6E7細胞、ST2細胞、HT 1197細胞
SK-RC-42細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LoMeT-ccRcc細胞、U87細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞
NE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：159 PT細胞、MGC803細胞、HSC-6細胞
Hs895T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、SK-N-AS細胞、MOLP2細胞
EM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WISH細胞、BRL3A細胞、Mino細胞
343 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUD6細胞、alpha-TC1.6細胞、H-747細胞
Jurkat, Clone E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2452細胞、HEYA8細胞、MC3T3E1細胞
HM06.A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H847細胞、H2029細胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞
B-cell with DC Morphology細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL2細胞、Caco-2/ATCC細胞、CA46細胞
GLAG-66細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Molm 13細胞、RPMI7666細胞、SV-HUC-1細胞
U-343-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS-27細胞、CMT 93細胞、H1568細胞
rRMECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NEC-8細胞、751-NA細胞、U 937細胞
Kit225細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)-M17細胞、CAL-27細胞、NCIH2107細胞
GM04671細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HONE-1細胞、Karpas-299細胞、H735細胞
MFHL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal fibroblast-10細胞、KLN205細胞、H-2198細胞
3T3-F442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：rRTEC細胞、SK-LU-1細胞、Panc 05.04細胞
CoCL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1355細胞、H2228細胞、T-ALL1細胞
MC3T3E1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc10.05細胞、RH7777細胞、UT7細胞
SKBr3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-281-T細胞、HFTF細胞、OAW 42細胞
Verda reno細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、H9c2(2-1)細胞、KG1A細胞
SW 1116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM239A細胞、PF382細胞、MCF-12A細胞
JS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-O RCC細胞、GM07404A細胞、CHP-126細胞
Mc Coy細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHs74 Int細胞、526細胞、KASUMI1細胞
VMM39 Adherent人黑色素瘤細胞系
95D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCUM-1細胞、C4-2細胞、NTHY-ORI3.1細胞
H-295細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RDES-1細胞、LOU-NH91細胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞
NCI-H1836細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GRSL細胞、WM 266-4細胞、Jurkat 77細胞
HK-2 [Human kidney]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Arizona Cell Culture-812細胞、KBM-7/Hap8細胞、H-522細胞
H-711細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03570細胞、SNK1細胞、NIT-1細胞
H2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIMEC細胞、SW 403細胞、RCC-10RGB細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHEK細胞、T-HEECs細胞、SV40-MES13細胞
HCC-70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss/3T3細胞、HBL100細胞、C8D1A細胞
H211細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-SO-M21細胞、HCa/16A3-F細胞、HGE細胞
HD-LM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOC 20細胞、P30/OHK細胞、LOUNH91細胞
NCI-H446細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 451-Lu細胞、RH30SJ細胞、SK BR 03細胞
SNU-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSC-34細胞、SNU-251細胞、L M (TK-)細胞
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