"VMM39 epithelioid cells人黑色素瘤細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:黑色素瘤;神經(jīng)節(jié)轉(zhuǎn)移;男性 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測試工作帶來了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細(xì)胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細(xì)胞的生長與形態(tài)等會(huì)有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性,有時(shí)還會(huì)由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞,以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍,細(xì)胞內(nèi)外的水分會(huì)很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細(xì)胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細(xì)胞膜通透性的改變,使細(xì)胞內(nèi)容物丟失。如果細(xì)胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細(xì)胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細(xì)胞死亡。因此,細(xì)胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細(xì)胞內(nèi)水分,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細(xì)胞,可以使冰點(diǎn)下降,提高細(xì)胞膜對水的通透性,且對細(xì)胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機(jī)會(huì),從而減少冰晶對細(xì)胞的損傷。 LOU-NH91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-33細(xì)胞、MDA-MB-468細(xì)胞、RINm-5F細(xì)胞 Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LPC-H12細(xì)胞、NCI-H1417細(xì)胞、Duke University 145細(xì)胞 H520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EoL-1 cell細(xì)胞、NCIH660細(xì)胞、MLA-144細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 VMM39 epithelioid cells人黑色素瘤細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前,細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細(xì)胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細(xì)胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細(xì)胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存:計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細(xì)胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以1×10(7)到5×10(7)細(xì)胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存:使用分離試劑從基層分離細(xì)胞,分離時(shí)盡可能溫和,使對細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細(xì)胞,確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以5×10(6)到1×10(6)細(xì)胞/ml密度,在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 KMS-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOR10細(xì)胞、NCIH2106細(xì)胞、BT細(xì)胞 Hs68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 114細(xì)胞、OCI-LY-1細(xì)胞、M21細(xì)胞 MB-49細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT29細(xì)胞、KOPN-8細(xì)胞、UC-3細(xì)胞 MDAMB134VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R2C細(xì)胞、HCC0015細(xì)胞、RPMI 1846細(xì)胞 KLM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EU-4細(xì)胞、ESC-410細(xì)胞、NCIH2110細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 VMM39 epithelioid cells人黑色素瘤細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯(cuò)誤;冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心;懸渾細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞;培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤;細(xì)胞置于-80℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動(dòng)物細(xì)胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時(shí)間過長都將造成細(xì)胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機(jī)轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機(jī)每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。 MOLT-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、HT 144細(xì)胞、NCIH1437細(xì)胞 LADMAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TO175T細(xì)胞、MRC 5細(xì)胞、FHCRC subclone 11細(xì)胞 GM03671C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JTC-28細(xì)胞、MCF7ADR細(xì)胞、U-118 MG細(xì)胞 Sf21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251_MG細(xì)胞、NHRF細(xì)胞、HT-3細(xì)胞 CWR22R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAhy926細(xì)胞、A72細(xì)胞、SK_N_BE2C細(xì)胞 HIT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-52細(xì)胞、PLA801C細(xì)胞、MEL-526細(xì)胞 EBC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 04.03細(xì)胞、NK 10a細(xì)胞、KNS-62細(xì)胞 SEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-a2細(xì)胞、OC-3-VGH細(xì)胞、WM115細(xì)胞 SHIN-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ball 1細(xì)胞、N2a細(xì)胞、HTR8細(xì)胞 H889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB415細(xì)胞、MDA.MB.435細(xì)胞、Ramos 2G6 4C10細(xì)胞 VMM39 epithelioid cells人黑色素瘤細(xì)胞系 HEK293-FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVEC 4-10細(xì)胞、LM2-4175細(xì)胞、PL12細(xì)胞 NCI-H28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nittby-Salford 1細(xì)胞、L929(NCTC)細(xì)胞、H774細(xì)胞 VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hce8693細(xì)胞、Calu3細(xì)胞、IGROV 1細(xì)胞 SuDHL 10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞、CATHa細(xì)胞、SK-MEL 28細(xì)胞 H1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-209細(xì)胞、HuH1細(xì)胞、Ku812細(xì)胞 BGC-823細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa17C細(xì)胞、7404細(xì)胞、H-2106細(xì)胞 BGC-823細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa17C細(xì)胞、7404細(xì)胞、H-2106細(xì)胞 TGHAVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC70細(xì)胞、Hs839.T細(xì)胞、Raji細(xì)胞 H-1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-28細(xì)胞、U-343-MG細(xì)胞、PT67細(xì)胞 NCI-H1876細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-647細(xì)胞、RBL細(xì)胞、RKO細(xì)胞 CL-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞、MGH-U3 (RN)細(xì)胞、RC13細(xì)胞 A375-MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 746.T細(xì)胞、SKLU-1細(xì)胞、Porcine Kidney-15細(xì)胞 HuH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H747細(xì)胞、Wien133細(xì)胞、AKR細(xì)胞 Cor L51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NU-GC-3細(xì)胞、8305C細(xì)胞、MeSoTheliOma-211H細(xì)胞 Panc02.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2198細(xì)胞、U118MG細(xì)胞、UWB1-289細(xì)胞 T-47D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:149 PT細(xì)胞、HT115細(xì)胞、BCaP-37細(xì)胞 PK 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC-MSB1細(xì)胞、HCC95細(xì)胞、Panc 3.27細(xì)胞 3T3-L1 ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283 Med細(xì)胞、Hs 819.T細(xì)胞、H2009細(xì)胞 SK_HEP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2 S細(xì)胞、Panc 03.27細(xì)胞、Hk-2細(xì)胞 WC00044細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293 EBNA細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞、MDA-175細(xì)胞 Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞、High 5細(xì)胞、CD 18細(xì)胞 HTR-8/SVneo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DV-90細(xì)胞、hCMEC/D3細(xì)胞、PC-12細(xì)胞 EMT-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLL2細(xì)胞、MCM細(xì)胞、GA-10細(xì)胞 COLO320 DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC 7860細(xì)胞、A431/P細(xì)胞、MDA-1386細(xì)胞 NCIH522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa16C細(xì)胞、CAL 120細(xì)胞、OVCAR433細(xì)胞 LS1034細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK-52E細(xì)胞、NCL-H548細(xì)胞、SK-N-F1細(xì)胞 MBT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-9/GR細(xì)胞、M-14細(xì)胞、MHCC97H細(xì)胞 alpha TC1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Namalva細(xì)胞、H-1688細(xì)胞、NCIH2228細(xì)胞 FBHE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1781細(xì)胞、A2780/CP細(xì)胞、MHCC97L細(xì)胞 Nthy-ori 3-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 636 T細(xì)胞、LYR細(xì)胞、L 929細(xì)胞 Colo16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBMEC細(xì)胞、NCIH520細(xì)胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細(xì)胞 BC-3H-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H766T細(xì)胞、BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞、MCA 205細(xì)胞 NCI-H1838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A3細(xì)胞、Strain V細(xì)胞、B16細(xì)胞 159 PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T2細(xì)胞、H526細(xì)胞、HCC1937細(xì)胞 NCI660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:87 MG細(xì)胞、NCI-H23細(xì)胞、MV 4;11細(xì)胞 SNU1040細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE14o-細(xì)胞、PLA-801D細(xì)胞、RSC 96細(xì)胞 DSL6A/C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-4細(xì)胞、SW 900細(xì)胞、LK-2細(xì)胞 NCIH1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC-JF細(xì)胞、D283細(xì)胞、SK-OV-433細(xì)胞 REC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL21細(xì)胞、SUD6細(xì)胞、C4-2B細(xì)胞 COLO 738細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T 98 G細(xì)胞、Hs 688(A).T細(xì)胞、P560細(xì)胞 PGLH7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-11細(xì)胞、293 EBNA細(xì)胞、OACP4C細(xì)胞 CCD-841CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fao細(xì)胞、NuTu 19細(xì)胞、UPCI-SCC-090細(xì)胞 Hs 274.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU.812細(xì)胞、HECV細(xì)胞、NCIH23細(xì)胞 H283細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266 Bl細(xì)胞、beta TC6細(xì)胞、Gerner 7666細(xì)胞 MDA-MB 468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U373細(xì)胞、SKMEL5細(xì)胞、ARPE19細(xì)胞 NCI-H358細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly3細(xì)胞、3T3F442A細(xì)胞、WPMY1細(xì)胞 COLO357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H810細(xì)胞、WM-239-A細(xì)胞、Anip-973細(xì)胞 LAN-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10細(xì)胞、HCC941122細(xì)胞、HEM-L細(xì)胞 M2-10B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT 64細(xì)胞、IOSE-Van細(xì)胞、H522細(xì)胞 HPAF-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM.12細(xì)胞、HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞、Hs 832(C).T細(xì)胞 Rat Chondrosarcoma Swarm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL1細(xì)胞、HEK-293A細(xì)胞、MES 23.5細(xì)胞 VMM39 epithelioid cells人黑色素瘤細(xì)胞系 RERFLCMS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DI TNC-1細(xì)胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞 IBRS2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoTc2-4510細(xì)胞、SP2細(xì)胞、J82 COT細(xì)胞 NIH 3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR42J細(xì)胞、PC 61-5-3細(xì)胞、HFLS細(xì)胞 GM03573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞、U373細(xì)胞、LICR-HN-6細(xì)胞 "
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