"Mahlavu Adherent人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:肝癌;女性
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細(xì)胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細(xì)胞先脫落,對腫瘤細(xì)胞來說,這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞!
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Mahlavu Adherent人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認(rèn)為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認(rèn)為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應(yīng)不會影響細(xì)胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。
A-704細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM C7細(xì)胞、HCV29細(xì)胞、NCI-H676B細(xì)胞
SU4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW38細(xì)胞、MCA-38細(xì)胞、CAL-39細(xì)胞
SUM-149PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU 565細(xì)胞、LIM 1215細(xì)胞、HEYA8細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MPC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U2OS細(xì)胞、SJSA細(xì)胞、HIT.T15細(xì)胞
MC-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE-21細(xì)胞、SUDHL8細(xì)胞、HeLa S3細(xì)胞
Sup T-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2 cl.D1細(xì)胞、MC116細(xì)胞、SK-MEL-MeWo細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁
Mahlavu Adherent人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間,通常控制在1-2min);2)鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
SW.620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-215細(xì)胞、MCCAR細(xì)胞、SK-NMC細(xì)胞
IEC 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H865細(xì)胞、alpha-TC1-6細(xì)胞、CL-40細(xì)胞
SHSY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1666細(xì)胞、MEF細(xì)胞、FL-83B細(xì)胞
NIE-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRASMC細(xì)胞、Hs852細(xì)胞、L5178Y細(xì)胞
OCI-AML-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PSN1細(xì)胞、DMS79細(xì)胞、KLE細(xì)胞
NCIH2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-865細(xì)胞、SHG 44細(xì)胞、143TK-細(xì)胞
L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC-12細(xì)胞、HCC2108細(xì)胞、CHP 100細(xì)胞
Mc Ardle 7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC-PRF-5細(xì)胞、MBMEC細(xì)胞、SUDHL-6細(xì)胞
GM05887A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK Type II細(xì)胞、H2196細(xì)胞、CORL51細(xì)胞
NCIH1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1385細(xì)胞、Madison lung細(xì)胞、PL11細(xì)胞
8226/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LCD細(xì)胞、HCC-4006細(xì)胞、293細(xì)胞
MDAMB134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT.T15細(xì)胞、Panc-10.05細(xì)胞、Nittby-Salford 1細(xì)胞
H711細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMCD-3細(xì)胞、SW 982細(xì)胞、MGHU3細(xì)胞
Mahlavu Adherent人肝癌細(xì)胞系
Human Epithelioma-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1171細(xì)胞、SNK6細(xì)胞、TEV-1細(xì)胞
RKO-AS-45-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC996細(xì)胞、SuDHL 5細(xì)胞、Vero 76 clone E6細(xì)胞
MPC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-886細(xì)胞、NCIH1703細(xì)胞、MOLM-14細(xì)胞
P30-OHKUBO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞、SW13細(xì)胞、Renal Carcinoma細(xì)胞
MC3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-Li-7細(xì)胞、BV2細(xì)胞、MES-SA-Dx5細(xì)胞
LAN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-8細(xì)胞、AD-293細(xì)胞、U373細(xì)胞
LNCaP-FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL26細(xì)胞、NCI-H250細(xì)胞、RA 1細(xì)胞
KU1919細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC9細(xì)胞、NMC-G1細(xì)胞、Panc 04.03細(xì)胞
BHT-101細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSTO211H細(xì)胞、DV-90細(xì)胞、JeKo 1細(xì)胞
HBMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP clone FGC細(xì)胞、U-266 AR1細(xì)胞、LS-174T細(xì)胞
PC-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-13細(xì)胞、P3X63NS1細(xì)胞、KM933細(xì)胞
THC-8307細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 123細(xì)胞、SW-403細(xì)胞、Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞
U20-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-12F細(xì)胞、OPM-2細(xì)胞、HuT-102細(xì)胞
UCLA RO-81-A-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 EBNA細(xì)胞、Molm 13細(xì)胞、SUDHL8細(xì)胞
LO2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE 29細(xì)胞、NR 8383細(xì)胞、Hs 695T細(xì)胞
Epstein-Barr-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT T-15細(xì)胞、HCC1359細(xì)胞、MDCC-MSB-1細(xì)胞
SKMEL28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 05.04細(xì)胞、Pt K1細(xì)胞、PC3M-1E8細(xì)胞
Sf-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KAT5細(xì)胞、MiaPaca.2細(xì)胞、PC10細(xì)胞
Pa017C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA802細(xì)胞、CWR22Rv1細(xì)胞、Li-7細(xì)胞
PaTu 8988s細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:22Rv1細(xì)胞、HK2細(xì)胞、NCTC 929細(xì)胞
B16/F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H345細(xì)胞、HEK293E細(xì)胞、NCIH1648細(xì)胞
HEK293-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 2.03細(xì)胞、Hs746T細(xì)胞、U-937細(xì)胞
SW 900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H295R-S1細(xì)胞、H1563細(xì)胞、Tb1.Lu細(xì)胞
HCC2157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR-32細(xì)胞、Panc10.05細(xì)胞、OV433細(xì)胞
SW 403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL_S細(xì)胞、4T1-LUC細(xì)胞、A375細(xì)胞
Onda 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2)C細(xì)胞、GM02219D細(xì)胞、COLO206細(xì)胞
LM-TK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTC細(xì)胞、ID8細(xì)胞、GC-2spd(ts)細(xì)胞
Rin-M-5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuP-T3細(xì)胞、HCC-1806細(xì)胞、EOC-20細(xì)胞
EA. hy 926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM190PT細(xì)胞、THLE-2細(xì)胞、AU 565細(xì)胞
NCI-H510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1755細(xì)胞、BE(2)M17細(xì)胞、BI-Mel細(xì)胞
NCI-H660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL5細(xì)胞、GM03573細(xì)胞、LS 1034細(xì)胞
SK-N-BE(1)n細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSC34細(xì)胞、H-2023細(xì)胞、EAHY-926細(xì)胞
MDA-MB-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-226AR1細(xì)胞、SNU-216細(xì)胞、HLE B-3細(xì)胞
COLO829細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-695T細(xì)胞、L-02細(xì)胞、H341細(xì)胞
EB2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CX1細(xì)胞、786O細(xì)胞、NCIH524細(xì)胞
MDA-MB-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H28細(xì)胞、3T3 L1細(xì)胞、HEK 293FT細(xì)胞
NCI-SNU-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SH-SY5Y細(xì)胞、HeLa S3細(xì)胞、PC-9/GR細(xì)胞
BNL.CL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TFK-1細(xì)胞、MA-104細(xì)胞、NCIH244細(xì)胞
CCD33Co細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-47D細(xì)胞、U118-MG細(xì)胞、Leukemia L1210細(xì)胞
32D.cl3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse Podocyte Clone-5細(xì)胞、LS-411N細(xì)胞、QBC939細(xì)胞
GM2132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 841 CoTr細(xì)胞、H2347細(xì)胞、WEHI-3細(xì)胞
WM266mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepatoma-22細(xì)胞、HEK-293細(xì)胞、CEMC1細(xì)胞
Mahlavu Adherent人肝癌細(xì)胞系
XWLC-05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1770細(xì)胞、V79-1細(xì)胞、Hela-mock細(xì)胞
HCT/FU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 27細(xì)胞、Panc-1-P細(xì)胞、HUVSMC細(xì)胞
SK-OV-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-239-A細(xì)胞、TCMK1細(xì)胞、NCIH2405細(xì)胞
MN 60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H719細(xì)胞、639-V細(xì)胞、MZCRC1細(xì)胞
HPaSteC(HPSC)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H-10T1/2細(xì)胞、MyLa 2059細(xì)胞、HEL-92細(xì)胞
H2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Reuber H-35細(xì)胞、LP-1細(xì)胞、NCI-Hut 125細(xì)胞
Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCaP 37細(xì)胞、H-1944細(xì)胞、NCI-UMC-11細(xì)胞
L 540細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JKT1細(xì)胞、RWPE-2細(xì)胞、UACC 893細(xì)胞
LL/2(LLc1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL/IU細(xì)胞、MDA-MB-361細(xì)胞、SW 1463細(xì)胞
Toledo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-361細(xì)胞、Hs739T細(xì)胞、KP-N-RT-BM細(xì)胞
MSTO-211 H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1666細(xì)胞、TE354.T細(xì)胞、Hce8693細(xì)胞
SHSY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1666細(xì)胞、BGC823細(xì)胞、CTV1細(xì)胞
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