"HCCC-9810 Adherent人膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：HCCC-９８１０細(xì)胞株源自一位女性肝膽管細(xì)胞癌患者。 HCCC-９８１０細(xì)胞呈上皮細(xì)胞樣，染色體模式數(shù)為７１，但染色體數(shù)目可以在２２-１１７的范圍內(nèi)變動。倍增時間為２０.４小時。 AFP，CEA和CA１９-９的分泌水平低，在裸鼠中的成瘤率為２０%。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說，針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長緩慢；3)細(xì)胞傳代時間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細(xì)胞死亡；時間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HCCC-9810 Adherent人膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
很多朋友討論細(xì)胞培養(yǎng)問題，見到很多很好的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)，這里說一些我個人的經(jīng)驗(yàn)，因?yàn)橐恍┍容^特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過近３００種細(xì)胞，常用于做實(shí)驗(yàn)的，累積有百余種，可以說遇到過許多各式各樣古怪的細(xì)胞。這里挑細(xì)胞消化開始做我的篇專題，并不是因?yàn)榧?xì)胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個話題，我就拋磚引玉，下面幾點(diǎn)拙見，可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗(yàn)有點(diǎn)出入，僅供大家參考。許多同學(xué)對細(xì)胞消化做了許多研究，得出了很多有價值的經(jīng)驗(yàn)，也見到很多人的困惑。其實(shí)細(xì)胞培養(yǎng)，尤其是細(xì)胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，就能把細(xì)胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細(xì)節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識，如果不對之處，歡迎指正，總結(jié)下來，細(xì)胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實(shí)消化并不是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要)，關(guān)鍵所在是細(xì)胞來源，血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細(xì)胞遇到各種各樣的問題，很多時候bottleneck沒有找到，雖然通過其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因?yàn)槿藗兺⒁庾约旱牟僮鳎傆X得自己沒有經(jīng)驗(yàn)，而忽視試劑，溶液尤其是細(xì)胞的質(zhì)量，后者其實(shí)才是許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室常見的問題。
EB2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CX1細(xì)胞、786O細(xì)胞、NCIH524細(xì)胞
Pt K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly18細(xì)胞、PZ-HPV-7細(xì)胞、H2452細(xì)胞
Giant Cell Tumor細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L- cell細(xì)胞、NCI-H69細(xì)胞、E.L.4細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
LIXC002細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML4細(xì)胞、Becker細(xì)胞、PC2細(xì)胞
MDA231-LM2-4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CSQT-2細(xì)胞、Leukemia L1210細(xì)胞、HCT-FET細(xì)胞
Sc-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS 4;11細(xì)胞、SCI1細(xì)胞、D283MED細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
HCCC-9810 Adherent人膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握好細(xì)胞消化的時間，消化時間過短時，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過高時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細(xì)胞消化時間相對延長。
NCI-H1648細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26-clone 25細(xì)胞、UPCI:SCC154細(xì)胞、MSTO-211H細(xì)胞
MDCK II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SC1細(xì)胞、G-292細(xì)胞、130 T細(xì)胞
TE-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NGEC細(xì)胞、SK-N-BE(2)-C細(xì)胞、SUPB-15細(xì)胞
NCIH2107細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H295R細(xì)胞、CD-18細(xì)胞、Hs 822.T細(xì)胞
T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 766細(xì)胞、H-676細(xì)胞、RPVSMC細(xì)胞
HMEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Strain V細(xì)胞、HEK 293A細(xì)胞、H1184細(xì)胞
H1435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc5.04細(xì)胞、NCIH1395細(xì)胞、190PT細(xì)胞
HT-1197細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：766T細(xì)胞、GA-10 (Clone 4)細(xì)胞、HCT-8/V細(xì)胞
BALL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepG2細(xì)胞、SACC-LM細(xì)胞、LCLC-103H細(xì)胞
YH-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEp-2細(xì)胞、NT2細(xì)胞、SHEE細(xì)胞
NCIH2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-62細(xì)胞、hTERT-HME-1細(xì)胞、SUDHL10細(xì)胞
HUT28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320 HSR細(xì)胞、KS-1 [Human glioblastoma]細(xì)胞、QSG7701細(xì)胞
786O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 1細(xì)胞、NCI/ADR-RES細(xì)胞、NCI-H441-4細(xì)胞
HCCC-9810 Adherent人膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞系
UK Pan-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPMEC細(xì)胞、DAN-G細(xì)胞、RBE4細(xì)胞
LTEP-sm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H146細(xì)胞、293/EBNA細(xì)胞、HFL-I細(xì)胞
G-292, clone A141B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 766.T細(xì)胞、SCC-1395細(xì)胞、MT4細(xì)胞
G-292, clone A141B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 766.T細(xì)胞、SCC-1395細(xì)胞、MT4細(xì)胞
COLO-679細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-6細(xì)胞、H283細(xì)胞、3T3-442A細(xì)胞
H-1568細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HKC細(xì)胞、Me Wo細(xì)胞、NP69SV40T細(xì)胞
J774 A.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-1040細(xì)胞、F-81細(xì)胞、MCA205細(xì)胞
ME-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16BL-6細(xì)胞、B16 F1細(xì)胞、SJ-Rh 30細(xì)胞
IPECJ2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOC-20細(xì)胞、CAL-12T細(xì)胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞
TE-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuPT4細(xì)胞、COV434細(xì)胞、RPMI6666細(xì)胞
MOLM-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI N87細(xì)胞、Sol8細(xì)胞、WEHI3B細(xì)胞
NCTC-3960細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JVM-2細(xì)胞、HuT102細(xì)胞、TPC-1細(xì)胞
M-O7e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCE-T細(xì)胞、EFO27細(xì)胞、NCIH548細(xì)胞
RCK8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1954BL細(xì)胞、NCI H929細(xì)胞、C3H 10T1/2細(xì)胞
D341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hFOB1.19細(xì)胞、CAL-120細(xì)胞、KASUMI6細(xì)胞
KYSE 70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：REC細(xì)胞、Pt-K1細(xì)胞、Kit225-K6細(xì)胞
EBC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 04.03細(xì)胞、NK 10a細(xì)胞、KNS-62細(xì)胞
MDA 435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP2細(xì)胞、A-375.S2細(xì)胞、T47D細(xì)胞
SK-Mel1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M-2B4細(xì)胞、OVCAR-433細(xì)胞、Ketr3細(xì)胞
K7M2 wt細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caov-4細(xì)胞、J-774A.1細(xì)胞、Jeko1細(xì)胞
OEC33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR-75-1細(xì)胞、HPF細(xì)胞、Wien133細(xì)胞
KS-1 [Human glioblastoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL 7405細(xì)胞、BC-021細(xì)胞、TE-7細(xì)胞
LAN-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10細(xì)胞、HCC941122細(xì)胞、HEM-L細(xì)胞
786-O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-19細(xì)胞、Y3M細(xì)胞、KU812-F細(xì)胞
HPMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FF-WT-BJ細(xì)胞、HEL-92_1_7細(xì)胞、RFL6細(xì)胞
ARPE-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CoCL3細(xì)胞、TMK-1細(xì)胞、MDA 1386細(xì)胞
LAN-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH460細(xì)胞、KMM1細(xì)胞、BTI-Tn5B14細(xì)胞
SNU182細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266細(xì)胞、CC-LP-1細(xì)胞、hTERT-RPE1細(xì)胞
NF639細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN74細(xì)胞、MDAPCa-2b細(xì)胞、SJRH 30細(xì)胞
Ramos (RA)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/3T3 clone A31細(xì)胞、H19-7細(xì)胞、Nb-2細(xì)胞
H-508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLCPK1細(xì)胞、NCIH727細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞
WISH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OLN 93細(xì)胞、OVCA433細(xì)胞、SW-1116細(xì)胞
RPMI-8226S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCSMC細(xì)胞、C32 mel細(xì)胞、HT115細(xì)胞
SK-OV-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239-A細(xì)胞、TCMK1細(xì)胞、NCIH2405細(xì)胞
AML-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL 299細(xì)胞、H1672細(xì)胞、CEF細(xì)胞
PLC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs739T細(xì)胞、RPMI-1788細(xì)胞、OVCA-432細(xì)胞
MDAMB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ-1細(xì)胞、PANC-08-13細(xì)胞、H128細(xì)胞
H-1993細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc02細(xì)胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細(xì)胞、293A細(xì)胞
OCI/AML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hRMECs細(xì)胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞、PC.3細(xì)胞
BC-023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL5細(xì)胞、COLO320HSR細(xì)胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞
H4-II-E-C3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel-624細(xì)胞、CESS細(xì)胞、THEECs細(xì)胞
HepG2/C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-102PT細(xì)胞、HUCCT1細(xì)胞、LS411細(xì)胞
HCCC-9810 Adherent人膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞系
Embryonic Bovine Tracheal cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCM460細(xì)胞、HNE2細(xì)胞、DMS 153細(xì)胞
C4-2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-II-E-C3細(xì)胞、FRO81-2細(xì)胞、LCD細(xì)胞
SK_N_BE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO-211 H細(xì)胞、NCI-H865細(xì)胞、NCIH2126細(xì)胞
alphaTC1 Clone 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF.CEM細(xì)胞、HBE135-E6E7細(xì)胞、ZR-75-1細(xì)胞
HEP3B2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hos TE-85細(xì)胞、H647細(xì)胞、HMSC細(xì)胞
MALME.3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J細(xì)胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細(xì)胞、SP-2細(xì)胞
PA12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R-1059-D細(xì)胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細(xì)胞、EMT-6細(xì)胞
GM05887A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK Type II細(xì)胞、H2196細(xì)胞、CORL51細(xì)胞
RGCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MES-1細(xì)胞、C81-61細(xì)胞、3T6 Swiss Albino細(xì)胞
MN 60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H719細(xì)胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞、MDCK Type II細(xì)胞
NCI-H676細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKN-SH細(xì)胞、JEKO細(xì)胞、RMG-1細(xì)胞
TE-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NGEC細(xì)胞、DOK細(xì)胞、MDA-MB436細(xì)胞
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