"HCCC-9810 Adherent人膽管細胞型肝癌細胞系
細胞背景資料：HCCC-９８１０細胞株源自一位女性肝膽管細胞癌患者。 HCCC-９８１０細胞呈上皮細胞樣，染色體模式數(shù)為７１，但染色體數(shù)目可以在２２-１１７的范圍內變動。倍增時間為２０.４小時。 AFP，CEA和CA１９-９的分泌水平低，在裸鼠中的成瘤率為２０%。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內無CO2；2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HCCC-9810 Adherent人膽管細胞型肝癌細胞系
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
很多朋友討論細胞培養(yǎng)問題，見到很多很好的經驗總結，這里說一些我個人的經驗，因為一些比較特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過近３００種細胞，常用于做實驗的，累積有百余種，可以說遇到過許多各式各樣古怪的細胞。這里挑細胞消化開始做我的篇專題，并不是因為細胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個話題，我就拋磚引玉，下面幾點拙見，可能與其它朋友總結的一些經驗有點出入，僅供大家參考。許多同學對細胞消化做了許多研究，得出了很多有價值的經驗，也見到很多人的困惑。其實細胞培養(yǎng)，尤其是細胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結經驗，就能把細胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識，如果不對之處，歡迎指正，總結下來，細胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實消化并不是細胞培養(yǎng)的關鍵所在(雖然很重要)，關鍵所在是細胞來源，血清質量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細胞遇到各種各樣的問題，很多時候bottleneck沒有找到，雖然通過其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作，總覺得自己沒有經驗，而忽視試劑，溶液尤其是細胞的質量，后者其實才是許多細胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。
EB2細胞系相關產品：CX1細胞、786O細胞、NCIH524細胞
Pt K1細胞系相關產品：Ly18細胞、PZ-HPV-7細胞、H2452細胞
Giant Cell Tumor細胞系相關產品：L- cell細胞、NCI-H69細胞、E.L.4細胞
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
LIXC002細胞系相關產品：OCI/AML4細胞、Becker細胞、PC2細胞
MDA231-LM2-4175細胞系相關產品：CSQT-2細胞、Leukemia L1210細胞、HCT-FET細胞
Sc-1細胞系相關產品：RS 4;11細胞、SCI1細胞、D283MED細胞
細胞生長特性：貼壁生長
HCCC-9810 Adherent人膽管細胞型肝癌細胞系
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內舊培養(yǎng)液；２)向瓶內加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內加入Hanks液少量，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項】１)掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
NCI-H1648細胞系相關產品：CT26-clone 25細胞、UPCI:SCC154細胞、MSTO-211H細胞
MDCK II細胞系相關產品：SC1細胞、G-292細胞、130 T細胞
TE-10細胞系相關產品：NGEC細胞、SK-N-BE(2)-C細胞、SUPB-15細胞
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HCCC-9810 Adherent人膽管細胞型肝癌細胞系
UK Pan-1細胞系相關產品：HPMEC細胞、DAN-G細胞、RBE4細胞
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G-292, clone A141B1細胞系相關產品：Hs 766.T細胞、SCC-1395細胞、MT4細胞
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HPMC細胞系相關產品：FF-WT-BJ細胞、HEL-92_1_7細胞、RFL6細胞
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HEP3B2細胞系相關產品：Hos TE-85細胞、H647細胞、HMSC細胞
MALME.3M細胞系相關產品：P3J細胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、SP-2細胞
PA12細胞系相關產品：R-1059-D細胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細胞、EMT-6細胞
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MN 60細胞系相關產品：NCI-H719細胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞、MDCK Type II細胞
NCI-H676細胞系相關產品：SKN-SH細胞、JEKO細胞、RMG-1細胞
TE-10細胞系相關產品：NGEC細胞、DOK細胞、MDA-MB436細胞
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