"IOSE-80 Adherent人正常卵巢上皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:卵巢;上皮細(xì)胞;SV40轉(zhuǎn)化;女性
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細(xì)胞沒問題。總結(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細(xì)胞復(fù)蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細(xì)胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細(xì)胞都污染一個細(xì)菌的話,這個細(xì)菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細(xì)菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當(dāng)會事。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
IOSE-80 Adherent人正常卵巢上皮細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
冷凍細(xì)胞解凍程序:依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒炐枰仨氂兴煌瑫r,務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細(xì)胞而言差異極大,請務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細(xì)胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細(xì)胞而言,1%以下之冷凍保護(hù)劑DMSO,不會對細(xì)胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細(xì)胞中去除,待第二天確定細(xì)胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細(xì)胞分化之細(xì)胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細(xì)胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
OAW-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNDZ細(xì)胞、Granta519細(xì)胞、NCIH2085細(xì)胞
BTI-TN5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HASMC細(xì)胞、NTera 2/cl.D1細(xì)胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞
NS-20Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF CEM細(xì)胞、VK2細(xì)胞、U2932細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Human podocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L(TK-)細(xì)胞、ECC12細(xì)胞、Daoy細(xì)胞
UM-UC14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH510細(xì)胞、OVCAR 8細(xì)胞、Psi2-DAP細(xì)胞
184A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B2_1-7細(xì)胞、BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞、RK13細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁
IOSE-80 Adherent人正常卵巢上皮細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細(xì)胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細(xì)胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細(xì)胞多久能到,是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細(xì)胞前請確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細(xì)胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活。
AM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFLS-RA細(xì)胞、GLC-15細(xì)胞、HO1N1細(xì)胞
SNU119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA1386細(xì)胞、MUTZ-3細(xì)胞、CL1-0細(xì)胞
HLCL9B10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1599細(xì)胞、8402細(xì)胞、BSC40細(xì)胞
GP2-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AM38細(xì)胞、COLO320-DM細(xì)胞、NCI-H1944細(xì)胞
HS 1.Tes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCFs細(xì)胞、NCI-747細(xì)胞、NCI-H-69細(xì)胞
SaOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EA.Hy926細(xì)胞、RPMI #8226細(xì)胞、CWR22R-V1細(xì)胞
H3255_DA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCS2/8細(xì)胞、KPL-4細(xì)胞、OCI Ly3細(xì)胞
RCK8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1954BL細(xì)胞、NCI H929細(xì)胞、C3H 10T1/2細(xì)胞
MC-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CESS細(xì)胞、A-172MG細(xì)胞、RFL 6細(xì)胞
MDA-MB-175-VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1463細(xì)胞、KOSC2細(xì)胞、NB.4細(xì)胞
Pfeiffer細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-Wnt-3A細(xì)胞、OCILY7細(xì)胞、MFHL-2細(xì)胞
NCI-H1522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H441細(xì)胞、GM03671細(xì)胞、SK-HEP-1細(xì)胞
HS-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-F細(xì)胞、HEK293細(xì)胞、TN5B14細(xì)胞
IOSE-80 Adherent人正常卵巢上皮細(xì)胞系
RPMI 8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-611-T細(xì)胞、AML-2細(xì)胞、HT-1197細(xì)胞
VMM5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NuTu 19細(xì)胞、HCC9724細(xì)胞、EM3細(xì)胞
VM-CUB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-483細(xì)胞、SF-126細(xì)胞、AU565細(xì)胞
VM-CUB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-483細(xì)胞、SF-126細(xì)胞、AU565細(xì)胞
RPE D407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115F細(xì)胞、MGHU3細(xì)胞、SW-480細(xì)胞
Ku812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VK-2/E6E7細(xì)胞、HTh 74細(xì)胞、EFM192細(xì)胞
4T1-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-92.1.7細(xì)胞、BT-325細(xì)胞、H650細(xì)胞
TE 32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞、T-ALL 1細(xì)胞、NCI-H23細(xì)胞
LN229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 870.T細(xì)胞、H647ell細(xì)胞、Swiss3T3細(xì)胞
SK MEL 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA 420細(xì)胞、AKR細(xì)胞、Case 3細(xì)胞
PTK-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97L細(xì)胞、SUDHL-1細(xì)胞、Ramos (RA 1)細(xì)胞
TE3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1376細(xì)胞、NCI-H1650細(xì)胞、GL-261細(xì)胞
Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MES1細(xì)胞、P3.653細(xì)胞、Human Embryonic Skin細(xì)胞
Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:My-La 2059細(xì)胞、NKL細(xì)胞、NKL細(xì)胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-676B細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞、RIN-m 14B細(xì)胞
SW1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JEKO細(xì)胞、MOLM-16細(xì)胞、Hs1.Tes細(xì)胞
NCIH2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-865細(xì)胞、SHG 44細(xì)胞、143TK-細(xì)胞
OAW-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNDZ細(xì)胞、Granta519細(xì)胞、NCIH2085細(xì)胞
NTERA2D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MARC145細(xì)胞、MGH-U3細(xì)胞、H2195細(xì)胞
PC3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BMSC/hBMSCs細(xì)胞、KM12SM細(xì)胞、PNT-1A細(xì)胞
MV-4-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY-3細(xì)胞、SPC-A1細(xì)胞、UACC-893細(xì)胞
OLN93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞、Panc 02.03細(xì)胞、SCC 15細(xì)胞
OCI-Ly18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC9724細(xì)胞、C-643細(xì)胞、LoVo細(xì)胞
M-O7e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCE-T細(xì)胞、EFO27細(xì)胞、NCIH548細(xì)胞
DLD 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3細(xì)胞、MCF-12A細(xì)胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞
PJ34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HRI細(xì)胞、SNU-878細(xì)胞、HOP 62細(xì)胞
hOMF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nthy ori 3.1細(xì)胞、JM-1細(xì)胞、OV 2008細(xì)胞
PC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE1細(xì)胞、HME-1細(xì)胞、SU-DHL-6細(xì)胞
Sp2/O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-AG 8.653細(xì)胞、OUMS-23細(xì)胞、SCC4細(xì)胞
AU-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO-AS45-1細(xì)胞、B 95-8細(xì)胞、NCI-157細(xì)胞
SW-954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HB 611細(xì)胞、KG1細(xì)胞、PC 12細(xì)胞
Japanese Tissue Culture-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH-28細(xì)胞、Pa18C細(xì)胞、Molm14細(xì)胞
CT26.WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1341細(xì)胞、SCC-25細(xì)胞、SN-12C細(xì)胞
Reuber H35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TC-1[JHU-1]細(xì)胞、M-1 myeloid leukemia細(xì)胞、JM細(xì)胞
P30 OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly1細(xì)胞、M-1細(xì)胞、SK-MEL-31細(xì)胞
MHCC97-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKCO1細(xì)胞、SACC83細(xì)胞、NCI-H2126細(xì)胞
Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGR-OV1細(xì)胞、HOS TE85細(xì)胞、LAN-6細(xì)胞
RSC-364細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-128細(xì)胞、KMBC細(xì)胞、MES-SA細(xì)胞
GOTO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MTC-TT細(xì)胞、OV 1063細(xì)胞、KRC-Y細(xì)胞
A431細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS688AT細(xì)胞、H740細(xì)胞、HCC 94細(xì)胞
SU 86.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1.289細(xì)胞、HEK-293 c18細(xì)胞、Hs840_T細(xì)胞
NuTu-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP-B15細(xì)胞、WI 38細(xì)胞、Tb 1-Lu細(xì)胞
IOSE-80 Adherent人正常卵巢上皮細(xì)胞系
Hs675細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1755細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞、Panc 1細(xì)胞
HNE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP-2細(xì)胞、DMS 79細(xì)胞、NCI-SNU-119細(xì)胞
HEK/293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM5A細(xì)胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞、L-M[TK-]細(xì)胞
MM.1S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1419細(xì)胞、C-4I細(xì)胞、F36P細(xì)胞
SR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 1788細(xì)胞、CaEs17細(xì)胞、MALME.3M細(xì)胞
RPTEC TERT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:786O細(xì)胞、H2591細(xì)胞、CF PAC-1細(xì)胞
EFM-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMES細(xì)胞、RD-ES細(xì)胞、HT-115細(xì)胞
KP-N-RT-BM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-116細(xì)胞、190PT細(xì)胞、VERO C 1008細(xì)胞
H2347細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ChaGo-K1細(xì)胞、P388細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞
SCC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2135細(xì)胞、NCI-H1734細(xì)胞、NCI-H2009細(xì)胞
SN12C-PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-5細(xì)胞、NCIH1693細(xì)胞、CHO K1細(xì)胞
HL-7702細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly3細(xì)胞、74Int細(xì)胞、AHH1細(xì)胞
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