"SACC-LM Adherent涎腺腺樣囊性癌細胞系
細胞背景資料:涎腺腺樣囊性癌
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
SACC-LM Adherent涎腺腺樣囊性癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要。現(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。
DH82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM-95細胞、J774 A1細胞、NCIH1793細胞
NCl-H157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-027細胞、HITT15細胞、MDA-134細胞
NCIH2052細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G361mel細胞、A10細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HIBEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293A細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞、H2107細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YH-13細胞、SLK細胞、NCIH1869細胞
AML-193細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU878細胞、KYSE 30細胞、Kelly細胞
細胞生長特性:貼壁
SACC-LM Adherent涎腺腺樣囊性癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
U343細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK AD293細胞、FO [Mouse myeloma]細胞、SKNBE(2)細胞
PaTu-8988s細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8305-C細胞、EBC-1/original細胞、SCC154細胞
ChaGo K-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCH1細胞、HIT clone T15細胞、KYSE 510細胞
Lewis-Lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH187細胞、CCRF細胞、HCC-1954細胞
GCT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BRL-3A細胞、M1細胞、EFM-192B細胞
IEC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AdHek細胞、OCI-LY-7細胞、Hs 839.T細胞
PGLH7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-11細胞、293 EBNA細胞、OACP4C細胞
H-2085細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-PAP細胞、GTL16細胞、NCTC 3960細胞
Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1088細胞、NK92-MI細胞、HAEC細胞
OSC19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BL-6細胞、SEG-1細胞、SU86_86細胞
SHIN-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ball 1細胞、N2a細胞、HTR8細胞
RT-112細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32-mel細胞、HeLa/DDP細胞、RCC10細胞
ECC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1 Subclone 24細胞、GM-3573細胞、DKMG細胞
SACC-LM Adherent涎腺腺樣囊性癌細胞系
UO.31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134 VI細胞、GB-1細胞、NBL-1細胞
NCI-H1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-174細胞、H-889細胞、Jurkat-E6細胞
NCIH322細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1116細胞、H-865細胞、Henrietta Lacks cells細胞
NCIH322細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1116細胞、H-865細胞、Henrietta Lacks cells細胞
Human Pancreatic Duct Epithelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293H細胞、MDA415細胞、HPAC細胞
OV1063細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-30細胞、Colon38細胞、KMS-18細胞
SAOS 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EO771細胞、SU.86細胞、Toledo細胞
NCI-H64細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepaRG細胞、D-324 Med細胞、McA-RH7777細胞
ZYM-SVEC01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB-1細胞、HOS-143B細胞、KTCTL-140細胞
J 774A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc4.03細胞、SKCol1細胞、KBM-5細胞
NCI-H1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2141細胞、MV 3細胞、KBM-7/Hap8細胞
SKO-007細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1833細胞、NBL-5細胞、HKBML細胞
HAC-84細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-3_27細胞、KNS62細胞、Hs-729-T細胞
U-138-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-GT-2細胞、HNSC細胞、RIN-m5F細胞
S-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs578Bst細胞、Vero 76 clone E-6細胞、QGY 7701細胞
A-375細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H647ell細胞、A.704細胞、Hs683T細胞
NW-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3-Ag1.2.3細胞、BEAS-2B細胞、Mevo細胞
H-2330細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Soleus clone 8細胞、RL-952細胞、HEK293FT細胞
95C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT474細胞、Lu-99A細胞、UO.31細胞
SF295細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2081細胞、Lu-165細胞、PK136細胞
RS4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細胞、Colo741細胞、D10G41細胞
KP-N-NS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV 1細胞、NTERA-2cl.D1細胞、OVCAR420細胞
MMVECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE 280細胞、MOLT16細胞、JIMT1細胞
SPCA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-688A-T細胞、BC-020細胞、CAL62細胞
MB39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mc Ardle 7777細胞、JROECL 19細胞、NIH-3T3-L1細胞
OVCA433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-9706細胞、JCA-1細胞、NCI-H2029細胞
SUM-52-PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 175 VII細胞、HN13細胞、HuH1細胞
WEHI 3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tca-8113細胞、4T1.2細胞、Nb2-11細胞
GM03190A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-253細胞、Fu97細胞、TEC細胞
SKGT4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEND細胞、HCC15細胞、CCRF SB細胞
Hs852T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA NPA871細胞、NCI-H1573細胞、KTA-7細胞
MRC-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Pancreatic Duct Epithelial細胞、HSC 3細胞、HO8910細胞
S91細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM192細胞、Walker-256細胞、MDAMB134細胞
PC.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NM-C細胞、AZ 521細胞、SK-NM-C細胞
MTC-TT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMC11細胞、MeWo細胞、HBVSMC細胞
3T3J2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMRC2細胞、CAL-39細胞、HEK-293-FT細胞
H-1048細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-442A細胞、C 6細胞、OC316細胞
SKOV3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA 1386細胞、3T3-L1細胞、SW-1088細胞
KMS-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MALME.3M細胞、TCam 2細胞、HH [Human lymphoma]細胞
8305C_1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2087細胞、P-815細胞、H345細胞
231-luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTT739細胞、HCC-2185細胞、RPE1-hTERT細胞
Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-UMC-11細胞、Saos2細胞、GT39細胞
SACC-LM Adherent涎腺腺樣囊性癌細胞系
Bovine ENDometrial cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N9細胞、MDA-MB-134-VI細胞、CF Pac1細胞
LSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1703細胞、NIH 3T3細胞、CF-1 MEF細胞
SK-RC-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE/CA-PJ34細胞、BT.549細胞、COR-L51細胞
HPASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW780細胞、Hs-600-T細胞、PAMC82細胞
HPAF/CD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUS-M1細胞、PANC 813細胞、BSC-40細胞
143 B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-407細胞、ARO-81細胞、SKM-1細胞
PC3M-IE8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NWA細胞、SW-1417細胞、X63.Ag8.653細胞
SHSY-5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-1細胞、SKLMS-1細胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞
KMS11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B 95-8細胞、HCA-7細胞、RBMEC細胞
H660細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE5細胞、266 Bl細胞、AZ 521細胞
PANC-03-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-HME-1細胞、WERI-Rb1細胞、SK-MEL-5細胞
ChaGo K-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCH1細胞、OE-33細胞、PL11細胞
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