"KMM-1 Adherent人多發(fā)性骨髓瘤細胞系
細胞背景資料：骨髓瘤
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內生長，應在５０%條件培養(yǎng)基內(細胞在無血清培養(yǎng)基內生長２４小時)內凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
KMM-1 Adherent人多發(fā)性骨髓瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
冷凍細胞解凍程序：依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因實驗需要，必須有所不同時，務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內。依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因對DMSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
LADMAC細胞系相關產(chǎn)品：TO175T細胞、MRC 5細胞、FHCRC subclone 11細胞
PT-K75細胞系相關產(chǎn)品：KBM5細胞、NCIH548細胞、HMVEC細胞
UPCI-SCC-154細胞系相關產(chǎn)品：C-28/I2細胞、NCIH209細胞、WM-115細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
BNL-HCC細胞系相關產(chǎn)品：Walker 256細胞、Vero細胞、QGY細胞
AE 1201細胞系相關產(chǎn)品：Ly10細胞、L-5178-Y細胞、SNU-1040細胞
H-1651細胞系相關產(chǎn)品：A431/P細胞、SC1細胞、LTEP-sm細胞
細胞生長特性：懸浮
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細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
H1930細胞系相關產(chǎn)品：NB.4細胞、HPBALL細胞、HuTu 80細胞
Sp2/0-Ag-14細胞系相關產(chǎn)品：H1404細胞、SW 1463細胞、MCAEC細胞
PC 61 5.3細胞系相關產(chǎn)品：NE1-E6E7細胞、ST2細胞、HT 1197細胞
T98-G細胞系相關產(chǎn)品：H-28細胞、D341 Med細胞、OV1/P細胞
SK-RC-52細胞系相關產(chǎn)品：SC細胞、H4IIE細胞、HT 1080.T細胞
SNU869細胞系相關產(chǎn)品：Human Corneal Endothelial Cells-12細胞、MNNG/HOS細胞、A2780CP70細胞
CW-2細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2066細胞、C-4 I細胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細胞
OLN93細胞系相關產(chǎn)品：Medical Research Council cell strain-5細胞、Panc 02.03細胞、SCC 15細胞
WERI-Rb-1細胞系相關產(chǎn)品：HDLM-2細胞、RT112細胞、UM-UC-1細胞
CHO Lec1細胞系相關產(chǎn)品：Caco-2/BBe細胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞、A375S2細胞
Pa017C細胞系相關產(chǎn)品：PLA802細胞、CWR22Rv1細胞、Li-7細胞
16HBE細胞系相關產(chǎn)品：MC38細胞、RASMC細胞、SNB.19細胞
MDCC-MSB1細胞系相關產(chǎn)品：GA10細胞、CHO Lec1細胞、KE-37細胞
KMM-1 Adherent人多發(fā)性骨髓瘤細胞系
NCIH820細胞系相關產(chǎn)品：HBE細胞、SNU-668細胞、SKBr3細胞
SNU-739細胞系相關產(chǎn)品：A-498細胞、HGBEC細胞、AM-38細胞
Sp2/0-Ag14細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL5細胞、OCI-Ly 8細胞、CEMO-1細胞
Sp2/0-Ag14細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL5細胞、OCI-Ly 8細胞、CEMO-1細胞
NCIH1623細胞系相關產(chǎn)品：MRC5細胞、PLA801-95D細胞、HRA19細胞
WRL 68細胞系相關產(chǎn)品：RAT2細胞、LIXC002細胞、U 138 MG細胞
HDF-a細胞系相關產(chǎn)品：MDA-330細胞、HCC-38細胞、MILE SVEN 1細胞
CCD-841-CoN細胞系相關產(chǎn)品：DOK細胞、SK MEL 28細胞、LK 2細胞
A-172 MG細胞系相關產(chǎn)品：HCC-827細胞、COLO-824細胞、MEC1細胞
Reuber H35細胞系相關產(chǎn)品：TC-1[JHU-1]細胞、M-1 myeloid leukemia細胞、JM細胞
SKES-1細胞系相關產(chǎn)品：EFM-192B細胞、WRL 68細胞、KMB-17細胞
NR-8383細胞系相關產(chǎn)品：SU4細胞、NK92細胞、HFL 1細胞
EPC細胞系相關產(chǎn)品：M059J細胞、SPCA1細胞、HCC1419細胞
SW 403細胞系相關產(chǎn)品：NBL_S細胞、4T1-LUC細胞、A375細胞
NCL-H548細胞系相關產(chǎn)品：MOLM13細胞、HH [Human lymphoma]細胞、BEAS 2B細胞
HBL100細胞系相關產(chǎn)品：PLB985細胞、Mel RM細胞、SU-DHL-10細胞
BEAS-2B細胞系相關產(chǎn)品：PA-1細胞、143TK-細胞、HCC0078細胞
DI-TNC1細胞系相關產(chǎn)品：SN12CPM6細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、hEM15A細胞
CTLL(2)細胞系相關產(chǎn)品：KU-19-19細胞、SLMT-1細胞、MC9細胞
SUDHL8細胞系相關產(chǎn)品：OCI Ly19細胞、N1E115細胞、GM05887細胞
MOLM13細胞系相關產(chǎn)品：CAL 85-1細胞、HCC-1954BL細胞、Hep-3B細胞
PA12細胞系相關產(chǎn)品：R-1059-D細胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細胞、EMT-6細胞
C2C12細胞系相關產(chǎn)品：OC 316細胞、COLO-HSR細胞、RPE D407細胞
NCIH929細胞系相關產(chǎn)品：U-251MG細胞、HuCCT-1細胞、MARC145細胞
TK 10細胞系相關產(chǎn)品：MC-116細胞、AG06814-N細胞、CAL851細胞
Lewis Lung Cancer細胞系相關產(chǎn)品：Embryonic Bovine Tracheal cells細胞、HEL-1細胞、Caki-1細胞
C-33A細胞系相關產(chǎn)品：NCIH740細胞、CEM-T4細胞、PC3M-IE8細胞
CTX TNA2細胞系相關產(chǎn)品：JB-6 Cl 30細胞、USMC細胞、C-32細胞
SHG 44細胞系相關產(chǎn)品：HD-LM-2細胞、Hs840T細胞、RT4-D6P2T細胞
P30/OHK細胞系相關產(chǎn)品：WSU-HN13細胞、LCD細胞、PAEC細胞
MC3T3-E1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2228細胞、RAW-264.7細胞、Hs 729T細胞
C3H10T1/2CL8細胞系相關產(chǎn)品：SKNFI細胞、TE-15細胞、H-2073細胞
H1944細胞系相關產(chǎn)品：Giant Cell Tumor細胞、HFF1細胞、8505C細胞
HIMEC細胞系相關產(chǎn)品：NCI-157細胞、2V6.11細胞、SCL-2細胞
SKMel-5細胞系相關產(chǎn)品：WC00097細胞、Hepatoma-22細胞、HL-1細胞
C6細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1975細胞、GNM細胞、MUTZ-3細胞
MNNG細胞系相關產(chǎn)品：I90細胞、Clone 929細胞、SW 839細胞
NCTC 3960細胞系相關產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞、HOS/MNNG細胞、JAR細胞
BJ [Human fibroblast]細胞系相關產(chǎn)品：H-2591細胞、PGBE1細胞、JCA-1細胞
KU 19-19細胞系相關產(chǎn)品：Bovine Turbinate細胞、NCIH2141細胞、Caco-2BBe細胞
HPB-ALL細胞系相關產(chǎn)品：Eca 109細胞、H3396細胞、PCI-4.2細胞
NCI-H250細胞系相關產(chǎn)品：H-295細胞、H1341細胞、NCI-H226細胞
KMM-1 Adherent人多發(fā)性骨髓瘤細胞系
TE-11細胞系相關產(chǎn)品：HuPT4細胞、COV434細胞、RPMI6666細胞
U20-S細胞系相關產(chǎn)品：MCF-12F細胞、OPM-2細胞、HuT-102細胞
NGEC細胞系相關產(chǎn)品：Duke University 145細胞、TCam-2細胞、SF-763細胞
AsPC-1細胞系相關產(chǎn)品：MCF12A細胞、HCT-8/V細胞、LSECs細胞
NS-20Y細胞系相關產(chǎn)品：CCRF CEM細胞、VK2細胞、U2932細胞
SUNE1細胞系相關產(chǎn)品：GM06141B細胞、NCIH1930細胞、NCIH446細胞
RT4細胞系相關產(chǎn)品：U-118-MG細胞、OLN 93細胞、SVOG細胞
HEL 92.1.7細胞系相關產(chǎn)品：MA104細胞、MSTO-211 H細胞、T-24細胞
H-1568細胞系相關產(chǎn)品：HKC細胞、Me Wo細胞、NP69SV40T細胞
T-24細胞系相關產(chǎn)品：SK-ML2細胞、NCI-H929細胞、PC3-M細胞
RINm-5F細胞系相關產(chǎn)品：Capan-2細胞、CHP100細胞、My-La 2059細胞
PC 61 5.3細胞系相關產(chǎn)品：NE1-E6E7細胞、NB1-RGB細胞、NSH細胞
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