"KMM-1 epithelioid cells人多發(fā)性骨髓瘤細胞系
細胞背景資料：骨髓瘤
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞傳代培養(yǎng)實驗：體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉移到另外的容器中進行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增３～６次。細胞傳代后，一般經過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數(shù)/１００個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細胞可達３～５％；細胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進行各種試驗。實驗步驟：１.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細胞懸液。３.將細胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內形成單層，需要再次進行傳代。
PY8119細胞系相關產品：Lu-165細胞、LN382細胞、BC-022細胞
HNE1細胞系相關產品：RINm5F細胞、TE-14細胞、AX-Mel細胞
H526細胞系相關產品：PLCPRF5細胞、HMy2.CIR細胞、GTL-16細胞
細胞生長：貼壁
KMM-1 epithelioid cells人多發(fā)性骨髓瘤細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異，有時因寄贈、交換和購買，培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉運到另一個實驗室，的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要。現(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時，細胞內的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止狀態(tài)，故可以長期保存。細胞低溫保存的關鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內，水晶呈針狀，極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇：凍存細胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。１ml凍存細胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù)，細胞接種應該至少在３×１０(５)活細胞/ml；培養(yǎng)細胞１２到２４小時，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞，并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板，細胞接種應該至少為３×１０(５)活細胞/ml。細胞的分化：一個成年人全身細胞總數(shù)約１０１２個，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細胞：形態(tài)結構，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細胞后代在形態(tài)、結構和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細胞的產生和分化，這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞，轉入分化，通常從細胞周期中G１期開始時一個確定的點G０點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞，它們的基因表達和代謝活動各不相同。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
CHO cell clone K1細胞系相關產品：HCC-95細胞、SKNSH細胞、HCC9724細胞
KMS18細胞系相關產品：NS20-Y細胞、UCLA NPA-87-1細胞、JHH-7細胞
RIN Cl-5F細胞系相關產品：SNB19細胞、HCC9204細胞、GM15452細胞
T-98G細胞系相關產品：COLO 320DM細胞、TC7細胞、MV-522細胞
SK-ES細胞系相關產品：LK 2細胞、Emory University-3細胞、U-138 MG細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
KMM-1 epithelioid cells人多發(fā)性骨髓瘤細胞系
細胞生長特性：懸浮
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇；３)將分裝上述細胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
H-748細胞系相關產品：Mel624細胞、MARC 145細胞、SK-RC 39細胞
YES 2細胞系相關產品：SNU520細胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞、SUM-159細胞
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KMM-1 epithelioid cells人多發(fā)性骨髓瘤細胞系
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KMM-1 epithelioid cells人多發(fā)性骨髓瘤細胞系
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