"MLE-12 Adherent小鼠肺上皮細胞系
細胞背景資料：肺；上皮細胞；SV４０轉化；FVB/N
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應調節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
MLE-12 Adherent小鼠肺上皮細胞系
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉移到液氮中貯存。
NCIH727細胞系相關產品：NCI-N87細胞、TN5B14細胞、SW1573細胞
OCILY-10細胞系相關產品：P3-X63-Ag8-653細胞、WM 239A細胞、Cor L51細胞
NHLF細胞系相關產品：149PT細胞、A-1847細胞、Anglne細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
CBRH-7919細胞系相關產品：MH-S細胞、J774A.1細胞、BT20細胞
PC-3M細胞系相關產品：Murine Lung Epithelial-12細胞、NCIH128細胞、8226/S細胞
RIN-m細胞系相關產品：MOLM-13細胞、DMS 53細胞、BMU-S1細胞
細胞生長特性：貼壁
MLE-12 Adherent小鼠肺上皮細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
造成實驗室細胞污染常見情況總結：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔毎硕嗫陔s，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當風衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
MDA-MB-231-GFP細胞系相關產品：EJ細胞、LuCL4細胞、BTI-Tn-5B1-4細胞
F81細胞系相關產品：UPCI-SCC-90細胞、Natural Killer-92細胞、BHK21細胞
CL1細胞系相關產品：BEL 7404細胞、HEL-92細胞、MiaPaCa-2細胞
RPMI 8226細胞系相關產品：LLC1細胞、A204細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞
MCF-12A細胞系相關產品：LSC-1細胞、SKHEP-1細胞、EB-2細胞
MonoMac1細胞系相關產品：HSC-3細胞、95C細胞、C38細胞
FL62891細胞系相關產品：PCI-SG231細胞、SNU-601細胞、SNU-668細胞
Pro-5WgaRI3C細胞系相關產品：NCI-SNU-423細胞、NCIH69細胞、Hs 934.T細胞
U2932細胞系相關產品：RL95細胞、Rat-1細胞、HUT-226細胞
VCaP細胞系相關產品：Hs274T細胞、LNCaP-C4-2細胞、SKOV-3細胞
LAN5細胞系相關產品：SW 1463細胞、293GP細胞、H295細胞
NPA-87細胞系相關產品：RC92A細胞、H-4細胞、SUPT-1細胞
HEK293細胞系相關產品：U-343-MG細胞、HIMEC細胞、Murine Carcinoma-38細胞
MLE-12 Adherent小鼠肺上皮細胞系
786-0細胞系相關產品：NCIH716細胞、TOG細胞、NCIH2291細胞
FDC-P1細胞系相關產品：CMT-93細胞、NCTC clone 929細胞、COLO 829細胞
COLO-HSR細胞系相關產品：H.Ep. #2細胞、HOC1細胞、rRTEC細胞
SCC-25細胞系相關產品：ZR75-1細胞、HUT 28細胞、RPMI #1846細胞
HCA-7細胞系相關產品：VP267細胞、Hep G2-Luc細胞、PBL細胞
OVCAR 5細胞系相關產品：Nb-2細胞、MTC-TT細胞、SW527細胞
H1930細胞系相關產品：NB.4細胞、HPBALL細胞、HuTu 80細胞
NCIH1755細胞系相關產品：FET細胞、RGM-1細胞、MILE SVEN1細胞
SCC 9細胞系相關產品：MLE-12細胞、SK-MEL-24細胞、GM03671C細胞
Tj-905細胞系相關產品：GH 3細胞、COLO678細胞、mousepodocyte細胞
H-2009細胞系相關產品：NTera 2細胞、SJSA-1細胞、Caco2-BBE細胞
BNL CL.2細胞系相關產品：TF1細胞、JURKAT E-6.1細胞、Colo-206F細胞
ATDC-5細胞系相關產品：KMST-6細胞、OVCAR-3細胞、MBMEC細胞
HBE細胞系相關產品：NCI-446細胞、RL細胞、mIMCD3細胞
KNS42細胞系相關產品：MV4II細胞、HCC0095細胞、NCI-H526細胞
NCIH1581細胞系相關產品：H-125細胞、EB-2細胞、Soleus clone 8細胞
CA922細胞系相關產品：MOLT4細胞、Mv.1.Lu細胞、SK-N-SH細胞
MMAc-SF細胞系相關產品：HEB細胞、Kit-225-K6細胞、MB157細胞
CCD 966SK細胞系相關產品：MS 751細胞、DHL8細胞、TGBC11TKB細胞
Jurkat, Clone E6-1細胞系相關產品：H2452細胞、HEYA8細胞、MC3T3E1細胞
HN-6細胞系相關產品：ANA-1細胞、MDA-MB 453細胞、OSA細胞
HMy2.CIR細胞系相關產品：P3X63 Ag8.653細胞、OCI/AML3細胞、MC-38細胞
OCI-LY-10細胞系相關產品：Tb1Lu細胞、OAW 42細胞、Tn-5細胞
alpha TC1.6細胞系相關產品：HO1N1細胞、MIN-6細胞、BC-024細胞
Human podocyte細胞系相關產品：L(TK-)細胞、ECC12細胞、Daoy細胞
CL 1-0細胞系相關產品：HFT-8810細胞、U373-MG細胞、NCI-H292細胞
MOLP2細胞系相關產品：MDA231細胞、Panc2.03細胞、PTK1細胞
RCK-8細胞系相關產品：University of Arizona Cell Culture-893細胞、WC00079細胞、RPMI 7666細胞
Potorous tridactylus Kidney 2細胞系相關產品：KYSE30細胞、RCC 7860細胞、Farage細胞
A375mel細胞系相關產品：SKLMS-1細胞、SGC-7901細胞、JHH2細胞
GM07404細胞系相關產品：639-V細胞、Pa017C細胞、OCI/AML-5細胞
SK-ES-1細胞系相關產品：CD18/HPAF細胞、GCT細胞、N87細胞
X63Ag8-653細胞系相關產品：HCMEC(BL12-H)細胞、HCCLM3細胞、GNM細胞
HCC2279細胞系相關產品：HuCC-T1細胞、NCIH446細胞、LIM-1215細胞
DMS 153細胞系相關產品：Hs852T細胞、CHO細胞、T/G HA VSMC細胞
CV 1細胞系相關產品：hADSCs細胞、BALL-1細胞、Z310細胞
Vero-76細胞系相關產品：Jurkat Clone E6-1細胞、KMS26細胞、NCIH1694細胞
Vero-76細胞系相關產品：Jurkat Clone E6-1細胞、KMS26細胞、NCIH1694細胞
Centre Antoine Lacassagne-51細胞系相關產品：LWnt-3A細胞、HT 1197.T細胞、SRA01/04細胞
RH7777細胞系相關產品：KALS-1細胞、HCC-827細胞、NCI-128細胞
Malme-3 M細胞系相關產品：KNS-62細胞、NS1-Ag 4/1細胞、SRS-82細胞
P3.NS-1/1.Ag4.1細胞系相關產品：BJAB細胞、SKUT1細胞、B16F1細胞
MLE-12 Adherent小鼠肺上皮細胞系
GC9811-P細胞系相關產品：Anip973細胞、HNE-3細胞、BE2_C細胞
FUOV1細胞系相關產品：COLO320 DM細胞、MonoMac 6細胞、MNNGHOS細胞
A549ATCC細胞系相關產品：H-1435細胞、SJCRH30細胞、RGB細胞
L-cells細胞系相關產品：UPCI-SCC-090細胞、HCT 116細胞、Hopkins-92細胞
H660細胞系相關產品：TE5細胞、MC3T3-E1(C4)細胞、UPCI-SCC-90細胞
Ca-Ski細胞系相關產品：LIM1215細胞、KPNRTBM1細胞、L-1210細胞
SKMEL-2細胞系相關產品：M-20細胞、GC-2spd(ts)細胞、BAC1.2F5細胞
N-2a細胞系相關產品：SUDHL16細胞、B16-BL6細胞、NCI.H226細胞
RFL 6細胞系相關產品：BT 325細胞、HEC1-A細胞、SUM52細胞
DoTc2細胞系相關產品：Hs 688(A).T細胞、SUDHL-16細胞、H-292細胞
HGMC細胞系相關產品：MFE 296細胞、L-363細胞、JM-Jurkat細胞
CL1細胞系相關產品：BEL 7404細胞、KYSE-510細胞、H22細胞
"