"MLE-12 epithelioid cells小鼠肺上皮細胞系
細胞背景資料：肺；上皮細胞；SV４０轉(zhuǎn)化；FVB/N
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
MDA-MB415細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMCUB-1細胞、CAL 85-1細胞、Y-1細胞
MHCC 97細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL2細胞、EL-4細胞、MDA-kb2細胞
NCI-H-128細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 8226/S細胞、NRK-49F細胞、C-127細胞
細胞生長：貼壁
MLE-12 epithelioid cells小鼠肺上皮細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號的血清。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
GCT0404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS766T細胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、SL1細胞
TE353.SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu-3細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞、BC-021細胞
SK-GT-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：6-10B細胞、H1963細胞、M2-10B4細胞
H2172細胞系相關(guān)產(chǎn)品：alphaTC clone 6細胞、Med 341細胞、MKN74細胞
R1800[RA]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192A細胞、NCI H716細胞、NCI-SNU-398細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
MLE-12 epithelioid cells小鼠肺上皮細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
MCF-7/ADR-RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PT67細胞、B16-F0細胞、MDAMB-231細胞
CAL851細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CPA 47細胞、SNU216細胞、hTERT-RPE-1細胞
MNNG-HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-3細胞、GB1細胞、TMD-8細胞
Hep-3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs445細胞、T24細胞、HOS/MNNG細胞
RGM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC_7860細胞、MDA436細胞、HCC-1143細胞
Eca-109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL1細胞、F-36P細胞、HCMEC(BL12-H)細胞
SW900細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H510細胞、HCA7細胞、BxPC-3細胞
Rat-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS18細胞、Kit225-K6細胞、526細胞
D-341細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHA細胞、COLO684細胞、BE2-M17細胞
H22-H8D8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL1細胞、NCI-H69C細胞、HS-294-T細胞
MLE-12 epithelioid cells小鼠肺上皮細胞系
COR-L88細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FLC-7細胞、JCA1細胞、H-1385細胞
SKRC-52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VA-ES-BJ細胞、Ly19細胞、Sci-1細胞
A-172細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel 2細胞、HPAF-2細胞、KALS-1細胞
P30 OHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly1細胞、M-1細胞、SK-MEL-31細胞
HA1800細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUSMC細胞、SUDHL-10細胞、K7M2-WT細胞
HCS2/8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUSM-1細胞、CHP126細胞、H-2227細胞
HCS2/8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUSM-1細胞、CHP126細胞、H-2227細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeWo細胞、HCC-9724細胞、H-520細胞
H3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-4細胞、KP4細胞、KU-812F細胞
NCI-SNU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-78細胞、MGSMC細胞、MH7A細胞
HECV細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 19Lu細胞、NCTC 3960細胞、PANC-28細胞
H1672細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIHA細胞、H-1437細胞、HS-695T細胞
Panc2_03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1836細胞、D 407細胞、UCLA SO M21細胞
Molm14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL78細胞、HCE-2 [50.B1]細胞、HS 445T細胞
H1581細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-6細胞、L 132細胞、SPDC-CCL141細胞
Kit 225細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCC-IT細胞、MC3T3-L1細胞、NFHIOSE-29細胞
SNU-869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P 3 HR 1細胞、Uhth-74細胞、T-98細胞
C-28/I2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-32細胞、L-5178-Y-R細胞、BNCL-2細胞
P19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE140細胞、LN-18細胞、L 363細胞
L cells (TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas 422細胞、H1882細胞、OV-CA 432細胞
BC-028細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHC細胞、H446細胞、IAR20細胞
L540細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA/Dx5細胞、P31 FUJ細胞、RS(4;11)細胞
HEK-293H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC7901/DDP細胞、H1650_CO細胞、10T1/2細胞
N-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：108CC15細胞、Hs 895 T細胞、KYSE 520細胞
A875細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU182細胞、U2932細胞、H820細胞
WC00079細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549ATCC細胞、MKN74細胞、D 407細胞
2E8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT 8細胞、U-87細胞、SKUT1細胞
GT38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOG細胞、CoCL3細胞、Mv 1 Lu細胞
Malme-3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H920細胞、HEK-EBNA細胞、Hs 343.T細胞
P3X63Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293A細胞、SCC-7細胞、SNU407細胞
SNU475細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH661細胞、BEL7402細胞、SJRH30細胞
MES 23.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2A細胞、Mono Mac6細胞、P3/ag細胞
JVM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-761細胞、MDA-MB-231細胞、SH-SY5Y細胞
FLC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00346B細胞、OVCAR8細胞、Nb2細胞
OVCA432_Bast細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-A549細胞、130-T細胞、SW-1271細胞
GT38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOG細胞、CoCL3細胞、Mv 1 Lu細胞
KOSC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OAW42細胞、Mel-MeWo細胞、T-ALL-1細胞
MEF (CF-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDE6c7細胞、RMG-I細胞、1301細胞
5637細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2T細胞、H292細胞、SUP T1細胞
H-747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPC-Y5細胞、H727細胞、VMRC-LCD細胞
H23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC-GI細胞、HUSMC細胞、2T細胞
Medical University of Graz-Chordoma 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEH2細胞、CA46細胞、B95-8細胞
Strain V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NeHepLxHT細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞、SUDHL6細胞
Leukemia L1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat, August 3, 1983細胞、NCI.H226細胞、HCGC細胞
ssMCF7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mc Coy細胞、NCI-H2106細胞、BEL/FU細胞
U251細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、H-2444細胞、B16-F10-BL6細胞
A-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Co-115細胞、CF-PAC1細胞、SJ-RH30細胞
B10BR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H838細胞、OVCA5細胞、IPEC-1細胞
NCI-H1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD19-Lu細胞、CNE1-LUC細胞、Scott細胞
Blotchy fibroblast-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mevo細胞、OCI-AML-3細胞、UMC11細胞
CAL 33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO1-N1細胞、HOP 92細胞、KM932細胞
MLE-12 epithelioid cells小鼠肺上皮細胞系
AG06814-M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774 A.1細胞、SNU-761細胞、Walker/LLC-WRC256細胞
Mono-Mac-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ssMCF7細胞、Epstein-Barr-2細胞、NCIH2227細胞
Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-87 MG細胞、SR細胞、SKLU-1細胞
MNNG-HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-3細胞、SKNDZ細胞、NCTC 3960細胞
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