"CAL-148 Adherent人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:乳腺癌;胸腔積液轉(zhuǎn)移;女性
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:1.將長成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
CAL-148 Adherent人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因?yàn)闀枞^濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”,常會誤認(rèn)為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認(rèn)為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點(diǎn)應(yīng)不會影響細(xì)胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。
HMO6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG 108-15細(xì)胞、CNE2Z細(xì)胞、H-378細(xì)胞
GLAG-66細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Molm 13細(xì)胞、RPMI7666細(xì)胞、SV-HUC-1細(xì)胞
Kit225細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2)-M17細(xì)胞、CAL-27細(xì)胞、NCIH2107細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
RAW-264.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1937細(xì)胞、G361細(xì)胞、NCIH2029細(xì)胞
OVISE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954BL細(xì)胞、H2087細(xì)胞、HM細(xì)胞
WM266-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeT 5A細(xì)胞、OUMS23細(xì)胞、SGC7901細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁
CAL-148 Adherent人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
3T3-Swiss細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel 24細(xì)胞、LIPF155C細(xì)胞、DMS-79細(xì)胞
CTLL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M14細(xì)胞、CemT4細(xì)胞、KLM-1細(xì)胞
SU4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW38細(xì)胞、MCA-38細(xì)胞、CAL-39細(xì)胞
RTMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL 45細(xì)胞、J-111細(xì)胞、KMH-2細(xì)胞
NCI H548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC 38細(xì)胞、MDAMB175VII細(xì)胞、AQ-Mel細(xì)胞
SKRC-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1618細(xì)胞、Ra No. 1細(xì)胞、NK-92MI細(xì)胞
SKBR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 1846細(xì)胞、NCIH2085細(xì)胞、RT-BM-1細(xì)胞
Hs 766.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH838細(xì)胞、HPMC細(xì)胞、HT 1376.T細(xì)胞
CaEs17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63Ag8-653細(xì)胞、SU-DHL-4細(xì)胞、B16/BL6細(xì)胞
BE2-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT/FU細(xì)胞、U-2-OS細(xì)胞、NCI-841細(xì)胞
NIH:OVCAR-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca9-22細(xì)胞、HCT-GEO細(xì)胞、Hs870T細(xì)胞
FRTL 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAW264細(xì)胞、OCI/AML-5細(xì)胞、NS1-Ag 4/1細(xì)胞
MHH-CALL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIEC細(xì)胞、KYSE 270細(xì)胞、OCI/AML-3細(xì)胞
CAL-148 Adherent人乳腺癌細(xì)胞系
R 1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:E0771細(xì)胞、PA1細(xì)胞、MLE12細(xì)胞
SaOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EA.Hy926細(xì)胞、RPMI #8226細(xì)胞、CWR22R-V1細(xì)胞
OVCAR5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NSH細(xì)胞、C3H10T1/2 clone8細(xì)胞、H524細(xì)胞
OVCAR5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NSH細(xì)胞、C3H10T1/2 clone8細(xì)胞、H524細(xì)胞
DLD 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3細(xì)胞、MCF-12A細(xì)胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞
Malme-3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H920細(xì)胞、HEK-EBNA細(xì)胞、Hs 343.T細(xì)胞
870細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1650細(xì)胞、BTI-Tn5B14細(xì)胞、EFO 27細(xì)胞
MDA MB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GS-9L細(xì)胞、T-ALL1細(xì)胞、KMST-6細(xì)胞
NCI-H2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KTA-7細(xì)胞、Ca9-22細(xì)胞、BIC-1細(xì)胞
COLO320 DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC 7860細(xì)胞、A431/P細(xì)胞、MDA-1386細(xì)胞
CTLL(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU-19-19細(xì)胞、SLMT-1細(xì)胞、MC9細(xì)胞
OE-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon26細(xì)胞、Jurkat E6.1細(xì)胞、H250細(xì)胞
P3 88 D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC-14細(xì)胞、SF-539 BT細(xì)胞、MES13細(xì)胞
HCC 70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nthy-ori 3-1細(xì)胞、SK-MEL28細(xì)胞、AC16 [Human hybrid]細(xì)胞
TALL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VERO76細(xì)胞、293-H細(xì)胞、SHZ-88細(xì)胞
Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-7721細(xì)胞、H-774細(xì)胞、CaES-17細(xì)胞
P3J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW48細(xì)胞、P3-x63-Ag8 653細(xì)胞、CHOK1細(xì)胞
AHH-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Be Wo細(xì)胞、3T6-Swiss albino細(xì)胞、WEHI231細(xì)胞
SUM-102PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MZCRC1細(xì)胞、UWB1289細(xì)胞、D283細(xì)胞
Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF295細(xì)胞、HKBML細(xì)胞、HRVEC細(xì)胞
HEK-293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECV-304細(xì)胞、U-373 MG細(xì)胞、KPL-4細(xì)胞
HEK293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK62a細(xì)胞、Panc 4.03細(xì)胞、L-540細(xì)胞
MBVP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-16細(xì)胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞、SK-N-DZ細(xì)胞
Epstein-Barr-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHG44細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞、NEC-8細(xì)胞
Calu 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN6細(xì)胞、H220細(xì)胞、K299細(xì)胞
MAntle cell VERona-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL88細(xì)胞、PASMCS細(xì)胞、Tu686細(xì)胞
BGC-823細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa17C細(xì)胞、7404細(xì)胞、H-2106細(xì)胞
MDA-MB-435 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA231-LM2細(xì)胞、DHL6細(xì)胞、INS1E細(xì)胞
EnCa1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K7M2-WT細(xì)胞、CHL-11細(xì)胞、NCI-H2023細(xì)胞
OVCAR 432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME16C細(xì)胞、Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞、HEI193細(xì)胞
HEC1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2029細(xì)胞、GES1細(xì)胞、Bac12F5細(xì)胞
LS123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-68細(xì)胞、A-172 MG細(xì)胞、HSMC細(xì)胞
TE-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-79細(xì)胞、MCF/Adr細(xì)胞、ECC10細(xì)胞
NCIH2291細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse Colon 38細(xì)胞、WB F344細(xì)胞、KE37細(xì)胞
50.B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV21G細(xì)胞、WIL2 S細(xì)胞、SW579細(xì)胞
HEL-92-1-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-70細(xì)胞、Panc-3_27細(xì)胞、BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞
TO175T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT167細(xì)胞、U-343 MG細(xì)胞、LM TK negative細(xì)胞
KM-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T8細(xì)胞、MZCRC1細(xì)胞、U-251 MG細(xì)胞
H-1882細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPECJ2細(xì)胞、K7M2細(xì)胞、MIA PaCa-2細(xì)胞
ECV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:S91細(xì)胞、NCIH522細(xì)胞、H1954細(xì)胞
UMUC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JJN3細(xì)胞、hTERT-RPE1細(xì)胞、Rat Lung-65細(xì)胞
TH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A9(Hamprecht)細(xì)胞、Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞、SC1細(xì)胞
CAL-148 Adherent人乳腺癌細(xì)胞系
LLC-PK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TR146細(xì)胞、RBE4細(xì)胞、A549/ATCC細(xì)胞
A 2780 CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-620細(xì)胞、SKNBE-1細(xì)胞、NCI-H1838細(xì)胞
CHO cell clone K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-95細(xì)胞、SKNSH細(xì)胞、HCC9724細(xì)胞
Ramos 2G6.4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSI/1-Ag4-1細(xì)胞、Hx147細(xì)胞、no.11細(xì)胞
Med 283細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeT5A細(xì)胞、CHO-Lec1細(xì)胞、MS751細(xì)胞
HepaRG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/O細(xì)胞、HRVEC細(xì)胞、HEMCSS細(xì)胞
Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251細(xì)胞、SNU1040細(xì)胞、MLFC細(xì)胞
Duke University 145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M619細(xì)胞、D-283 Med細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞
CCC-HSF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:McArdle RH-7777細(xì)胞、UMNSAH-DF-1細(xì)胞、2780細(xì)胞
NCIH1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H23細(xì)胞、HECV細(xì)胞、HCT 116細(xì)胞
Psi2-DAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca759細(xì)胞、HuTu 80細(xì)胞、Ly1細(xì)胞
SU4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW38細(xì)胞、rRMECs細(xì)胞、HCC0078細(xì)胞
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