"CAL-148細胞：人乳腺癌細胞系
細胞背景資料：乳腺癌；胸腔積液轉(zhuǎn)移；女性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁
如何進行細胞復蘇：１)從液氮容器中取出凍存管，直接浸入３７℃溫水中，并不時搖動令其盡快融化；２)從３７℃水浴中取出凍存管，打開蓋子，用吸管吸出細胞懸液，加到離心管并滴加１０倍以上培養(yǎng)液，混勻；３)離心，１０００rpm，５min；４)棄去上清液，加入含１０%小牛血清培養(yǎng)液重懸細胞，計數(shù)，調(diào)整細胞密度，接種培養(yǎng)瓶，３７℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；５)次日更換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。【溫馨提醒】１)從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養(yǎng)細胞都可以用于凍存，但為對數(shù)生長期細胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液；２)將凍存管放入液氮容器或從中取出時，要做好防護工作(戴棉手套)，以免凍傷；３)凍存和復蘇用新配制的培養(yǎng)液。細胞復蘇的時候，有些初次實驗員將凍存管從液氮中取出后，放在室溫下，經(jīng)常發(fā)生凍存管爆炸，該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎？其中在擰緊凍存管的時候是否有哪些細節(jié)要注意的？一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺中用酒精棉球擦試管口，再稍擰松蓋子，再放３７度水浴鍋中搖溶，在將細胞轉(zhuǎn)移到裝有３７度預熱過的培養(yǎng)基的試管中，迅速離心，再用培養(yǎng)基洗一遍。
細胞培養(yǎng)無菌操作步驟和注意事項：１.打開無菌工作臺及凈化室的紫外燈，消毒半小時以上。２.進入凈化室前先關閉紫外燈，打開超凈臺風機，等待３０min以上，以排盡臭氧。３.穿好隔離衣，戴好口罩，帽子。４.風淋２分鐘。５.０.１%水泡手，擦干。６.點燃酒精燈;超凈臺內(nèi)應避免放入過多的物品;使用的吸管，滴管，試管，培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。７.打開各類瓶蓋前先過火，以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰，鑷子使用前應經(jīng)火焰燒灼。８.水平式風機的超凈臺，應使瓶口斜置，應盡量避免瓶口敞開直立。９.同一根吸管或滴管不應連續(xù)用于幾個不同的細胞系；吸取培養(yǎng)基的吸管應離開培養(yǎng)瓶或試管口０.５cm，避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口；以防止細胞系的互相混雜污染。１０.漏在培養(yǎng)瓶上或臺上的液體，立即用酒精棉球擦凈。１１.操作完畢后恢復工作臺面。
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
HEL299細胞系相關產(chǎn)品：SKOV3細胞、SK.OV.3細胞、TGBC11T細胞
Tu177細胞系相關產(chǎn)品：CMT64細胞、Mhh-Call 2細胞、HPDE細胞
Colon 38細胞系相關產(chǎn)品：SKMEL-31細胞、Ls-174-T細胞、SkMel31細胞
hRPTC細胞系相關產(chǎn)品：PANC0504細胞、Medical Research Council cell strain-9細胞、KCL-22細胞
RF/6A細胞系相關產(chǎn)品：HT-29/CX-1細胞、RGM1細胞、LU65細胞
HCC95細胞系相關產(chǎn)品：RN-c細胞、Neuro-2a細胞、SV-HUC細胞
HONE-1細胞系相關產(chǎn)品：PG-4 S+L-細胞、GM05372E細胞、H1522細胞
HUT 28細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1666細胞、SNU-475細胞、MEG-01細胞
NCIH1184細胞系相關產(chǎn)品：AU-565細胞、H498細胞、H-847細胞
6-10B細胞系相關產(chǎn)品：SK-ChA-1細胞、OVCA8細胞、SU-86-86細胞
NCIH1876細胞系相關產(chǎn)品：OP-9細胞、HO1-N1細胞、NCI H2106細胞
PBL細胞系相關產(chǎn)品：H35細胞、RAW 264.7細胞、MA-782細胞
NCI H295R細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1092細胞、RERFLCMS細胞、SUIT2細胞
PK13細胞系相關產(chǎn)品：MIA PaCa-2細胞、MM1S細胞、BEAS-2B細胞
TPC-1細胞系相關產(chǎn)品：OUMS23細胞、D407 RPE細胞、RTE細胞
P3J細胞系相關產(chǎn)品：SW48細胞、P3-x63-Ag8 653細胞、CHOK1細胞
P3J細胞系相關產(chǎn)品：SW48細胞、P3-x63-Ag8 653細胞、CHOK1細胞
LS 513細胞系相關產(chǎn)品：H292細胞、Molm14細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞
TE-9細胞系相關產(chǎn)品：DMS-79細胞、MCF/Adr細胞、ECC10細胞
H-1299細胞系相關產(chǎn)品：T98G細胞、P116細胞、MFE 296細胞
K7M2 wt細胞系相關產(chǎn)品：Caov-4細胞、J-774A.1細胞、Jeko1細胞
WiDrTC細胞系相關產(chǎn)品：SNU-251細胞、H-1954細胞、CHO-K1細胞
Ramos 2G6 4C10細胞系相關產(chǎn)品：PANC-04-03細胞、TE-85細胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞
WERI-Rb-1細胞系相關產(chǎn)品：HDLM-2細胞、RT112細胞、UM-UC-1細胞
WRL-68細胞系相關產(chǎn)品：LS411細胞、MeT-5A細胞、SUDHL-5細胞
MV-4:11細胞系相關產(chǎn)品：SUM-159-PT細胞、FHs74 Int細胞、H-1755細胞
HUVEC-C[HUVEC]細胞系相關產(chǎn)品：N1S1細胞、M-07e細胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞
UMRC2細胞系相關產(chǎn)品：32D/cl3細胞、Malme3M細胞、HBZY-1細胞
NCI H2106細胞系相關產(chǎn)品：IPLB-SF-21細胞、Human podocyte細胞、TE671/RD細胞
293 H細胞系相關產(chǎn)品：RGC5細胞、NCI-H2291細胞、H-125細胞
SK ES 01細胞系相關產(chǎn)品：MKN45細胞、PSN-1細胞、NCI-H1385細胞
RMS 1598細胞系相關產(chǎn)品：PC 61.5.3細胞、JJN-3細胞、NCIH1693細胞
H838細胞系相關產(chǎn)品：E.G7-OVA細胞、Hs 600.T細胞、AML-2細胞
RSMC細胞系相關產(chǎn)品：SU-DH-L5細胞、TKB1細胞、UWB1.289細胞
JAR細胞系相關產(chǎn)品：SkChA-1細胞、BL1339細胞、HEL-92.1.7細胞
HS578細胞系相關產(chǎn)品：CAMA-1細胞、SCCVII/St細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞
HCV-29細胞系相關產(chǎn)品：E.L.4細胞、NCI-H-295細胞、Hmy.2 CIR細胞
Meat Animal Research Center-145細胞系相關產(chǎn)品：Hu-P-T3細胞、CWR22R細胞、CCD-841-CoN細胞
RCC-10RGB細胞系相關產(chǎn)品：Caco-2細胞、HCC0038細胞、NHLF細胞
NBLAN5T細胞系相關產(chǎn)品：KFB細胞、HEL-299細胞、CEK細胞
NTERA-2細胞系相關產(chǎn)品：TCMK1細胞、FD-LSC-1細胞、NCI-H378細胞
OACP4 C細胞系相關產(chǎn)品：H1581細胞、LLCPK1細胞、MOLT4細胞
293S細胞系相關產(chǎn)品：CL-34細胞、LC1sq細胞、RBL-2H3細胞
C-Li-7細胞系相關產(chǎn)品：SW-780細胞、SJSA1細胞、KU 812F細胞
NRK52E細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1500細胞、SK-MEL-2細胞、SKNEP1細胞
H-1385細胞系相關產(chǎn)品：WIL2 Secreting細胞、H125細胞、Bat lung細胞
KYSE-140細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-453細胞、PCI-SG231細胞、BV-2細胞
GM346細胞系相關產(chǎn)品：LN 229細胞、HS-766-T細胞、NCI-H2286細胞
HeLa-229細胞系相關產(chǎn)品：HEK 293T/17細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、SP2/0 Ag-14細胞
OLN-93細胞系相關產(chǎn)品：SRA 01/04細胞、C3H/10T1/2細胞、NS1/1-Ag4.1細胞
C-4I細胞系相關產(chǎn)品：BMF細胞、YH-13細胞、Pa18C細胞
DF-1細胞系相關產(chǎn)品：H1184細胞、UPCI:SCC090細胞、NCIH727細胞
HB 611細胞系相關產(chǎn)品：RPMI #1846細胞、CAL12T細胞、H2405細胞
H-196細胞系相關產(chǎn)品：HCC941122細胞、NCIH510細胞、X63Ag8-653細胞
SUM 149細胞系相關產(chǎn)品：Detroit-562細胞、CHL1細胞、HT(H9)細胞
KMB17細胞系相關產(chǎn)品：Verda reno細胞、CNE-2Z細胞、801-D細胞
Hs 746.T細胞系相關產(chǎn)品：SK_N_BE2C細胞、U87 MG細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞
IR983F細胞系相關產(chǎn)品：NK-92細胞、32D clone 3細胞、EL-4細胞
H-2444細胞系相關產(chǎn)品：CAL85-1細胞、PA-1細胞、NCI-H1341細胞
H2291細胞系相關產(chǎn)品：RGC-6細胞、H841細胞、HCV-29細胞
ATDC5細胞系相關產(chǎn)品：L23/P細胞、RGC-6細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞
OCI/AML-4細胞系相關產(chǎn)品：IGR.OV1細胞、PTK 2細胞、COLO 16細胞
NCI-SNU-16細胞系相關產(chǎn)品：IHH細胞、NTERA-2細胞、T98細胞
EOL1細胞系相關產(chǎn)品：H-2126細胞、NCI-SNU-475細胞、CMT.64細胞
OVCAR.8細胞系相關產(chǎn)品：H-446細胞、HCM細胞、IPLB-Sf21AE細胞
PanC1細胞系相關產(chǎn)品：TB1 Lu細胞、OLN-93細胞、M-20細胞
RAMOS2G64C10細胞系相關產(chǎn)品：McCoy細胞、MADB106細胞、U-87MG細胞
NCIH2227細胞系相關產(chǎn)品：OK細胞、RCC-JF細胞、HMrSV5細胞
SNU484細胞系相關產(chǎn)品：Hs819T細胞、NCIH64細胞、OV-2008細胞
H295細胞系相關產(chǎn)品：T173細胞、CMK細胞、KRCY細胞
JAR細胞系相關產(chǎn)品：SkChA-1細胞、LC-2-Ad細胞、BHK細胞
D-283 Med細胞系相關產(chǎn)品：KALS1細胞、H64細胞、P3-X63Ag8細胞
Colon 38細胞系相關產(chǎn)品：SKMEL-31細胞、Ls-174-T細胞、SGC996細胞
IEC 18細胞系相關產(chǎn)品：Human Microglia Clone 3細胞、SUIT2細胞、HFL細胞
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