"LNCaP C4-2 Adherent人前列腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:前列腺癌;左鎖骨上淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移;男性
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
LNCaP C4-2 Adherent人前列腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個世界性問題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細(xì)胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細(xì)胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞,有的細(xì)胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實驗操作;細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后,特別是重要的細(xì)胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細(xì)胞壁,一般來講,對作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
OV-CA 432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLM-1細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞、OP-9細(xì)胞
PAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-8/V細(xì)胞、293/EBNA-1細(xì)胞、2B4-L細(xì)胞
HMEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LICCF細(xì)胞、5637細(xì)胞、APRE-19細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SKGIIIA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Strain L-929細(xì)胞、MDAMB415細(xì)胞、H1672細(xì)胞
SKG3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE29細(xì)胞、B-3細(xì)胞、SW-48細(xì)胞
MES-23.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J.HR1K細(xì)胞、TMD-8細(xì)胞、RT4細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁
LNCaP C4-2 Adherent人前列腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當(dāng)一個細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。
EVSAT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB49細(xì)胞、HCC0044細(xì)胞、PVEC細(xì)胞
4T1-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-92.1.7細(xì)胞、BT-325細(xì)胞、H650細(xì)胞
MM134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H526細(xì)胞、SKOV-433細(xì)胞、KFB細(xì)胞
R-1059-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DanG細(xì)胞、C41細(xì)胞、RBL-1細(xì)胞
COLO 320 DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1197.T細(xì)胞、WPMY1細(xì)胞、SK-MEL-2-LUC細(xì)胞
130T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 132細(xì)胞、HuPT4細(xì)胞、F81細(xì)胞
F442-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT-16細(xì)胞、DH 82細(xì)胞、UCLA-SO-M14細(xì)胞
UMRC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D/cl3細(xì)胞、Malme3M細(xì)胞、HBZY-1細(xì)胞
M619細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H498細(xì)胞、PC-10細(xì)胞、UM-RC-2細(xì)胞
NBL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI no. 8226細(xì)胞、PL-12細(xì)胞、32D clone 3細(xì)胞
EST50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-1095Sk細(xì)胞、GLRK 13細(xì)胞、SKES1細(xì)胞
EMT6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT-2細(xì)胞、OVCAR 4細(xì)胞、P3-X63-Ag 8.653細(xì)胞
Henrietta Lacks cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM 9細(xì)胞、OVHM細(xì)胞、MOLT16細(xì)胞
LNCaP C4-2 Adherent人前列腺癌細(xì)胞系
NCIH1792細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS TE85細(xì)胞、Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞、HCC1833細(xì)胞
HCe-8693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM-16細(xì)胞、UACC893細(xì)胞、OCIAML5細(xì)胞
A2780 CP70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cor L88細(xì)胞、B958細(xì)胞、HELA-GFP細(xì)胞
A2780 CP70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cor L88細(xì)胞、B958細(xì)胞、HELA-GFP細(xì)胞
SCaBER細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY7703細(xì)胞、RGC6細(xì)胞、L 428細(xì)胞
LCLC-103H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞、RPMI 7666細(xì)胞、PA-TU-8988S細(xì)胞
Leydig細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTSC-3細(xì)胞、BPH-1細(xì)胞、MC3T3-L1細(xì)胞
Hep 3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞、SNGM細(xì)胞、HEK 293 c18細(xì)胞
ECC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞、GM-3573細(xì)胞、DKMG細(xì)胞
Panc-08.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-I細(xì)胞、Normal Rat, August 3, 1983細(xì)胞、MCF 7細(xì)胞
CEK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEAS 2B細(xì)胞、HS 445T細(xì)胞、Calu-1細(xì)胞
L 132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 8226細(xì)胞、MES-13細(xì)胞、H1694細(xì)胞
TC-1[JHU-1]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML5細(xì)胞、BEL/FU細(xì)胞、MLA 144細(xì)胞
ZR751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK (15)細(xì)胞、DI TNC1細(xì)胞、CHP-212細(xì)胞
CEM-0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:33604細(xì)胞、NCIH1341細(xì)胞、NB1-RGB細(xì)胞
WI-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD細(xì)胞、LMTK-細(xì)胞、OCI-AML3細(xì)胞
Hs 839.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H661細(xì)胞、HEK 293細(xì)胞、HEK293-A細(xì)胞
PC-3M-IE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-231-GFP細(xì)胞、M059J細(xì)胞、CCK-81細(xì)胞
MCF-7/ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 62細(xì)胞、CRFK細(xì)胞、SCC9細(xì)胞
CEM/0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1734細(xì)胞、GM01232E細(xì)胞、NTera-2D1細(xì)胞
HME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC 116細(xì)胞、LNCaP clone FGC細(xì)胞、NCIH1666細(xì)胞
A549-Taxol細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLM細(xì)胞、KYSE410細(xì)胞、LNCaP-Clone-FGC細(xì)胞
Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-138-MG細(xì)胞、MDA-MB157細(xì)胞、Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞
LTEP-a-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BOWES細(xì)胞、SKNBE(2c)細(xì)胞、A498細(xì)胞
MBdSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH810細(xì)胞、MC3T3-E細(xì)胞、HCT.116細(xì)胞
MDAMB435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH647細(xì)胞、PTK1細(xì)胞、UACC 812細(xì)胞
MSB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIPF178C細(xì)胞、HGC-27細(xì)胞、KPL1細(xì)胞
H2444細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1437細(xì)胞、NCI-H1568細(xì)胞、SW 48細(xì)胞
EST81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1954細(xì)胞、WB-F344細(xì)胞、OVCAR.3細(xì)胞
Astrocyte type I clone細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-1細(xì)胞、H2.35細(xì)胞、SHI1細(xì)胞
HuH 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC812細(xì)胞、OE19細(xì)胞、NCI-SNU-601細(xì)胞
GLAG-66細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Molm 13細(xì)胞、RPMI7666細(xì)胞、SV-HUC-1細(xì)胞
PANC 327細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepG2/C3A細(xì)胞、PC-3M IE8細(xì)胞、2E8細(xì)胞
VSC4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCH-1細(xì)胞、KE-37細(xì)胞、118 MG細(xì)胞
EL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK.2細(xì)胞、SK-MEL3細(xì)胞、SV40-HCEC細(xì)胞
GP2d細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD19Lu細(xì)胞、GM2131細(xì)胞、GM637細(xì)胞
LAN-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H82sclc細(xì)胞、207細(xì)胞、CFPAC細(xì)胞
GC9811-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip973細(xì)胞、HNE-3細(xì)胞、BE2_C細(xì)胞
H1048細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGROV1細(xì)胞、HT55細(xì)胞、NL20細(xì)胞
SCC-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN 28細(xì)胞、SK-MEL-1細(xì)胞、OB2細(xì)胞
1E8-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 7666細(xì)胞、RBSMC細(xì)胞、LNCaP細(xì)胞
LNCaP C4-2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB1細(xì)胞、HCE細(xì)胞、MAD109細(xì)胞
LNCaP C4-2 Adherent人前列腺癌細(xì)胞系
SF767細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780CP70細(xì)胞、TE14細(xì)胞、KE 37細(xì)胞
GM0637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM149細(xì)胞、TOV112D細(xì)胞、Leukemic 1210細(xì)胞
COLO-320-HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA 433細(xì)胞、TERT-RPE1細(xì)胞、RPTEC/TERT1細(xì)胞
H510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-1細(xì)胞、BEL7404細(xì)胞、IMR-90細(xì)胞
hSCC-25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 295細(xì)胞、K1735細(xì)胞、HDF-a細(xì)胞
HANK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJAB-1細(xì)胞、HCT/FU細(xì)胞、SUP-B1細(xì)胞
HCC78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-SH細(xì)胞、SK-MEL2細(xì)胞、SW-837細(xì)胞
RT4P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B2細(xì)胞、DMS153細(xì)胞、FRhK-4細(xì)胞
NCI-SNU-449細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-330細(xì)胞、D-341Med細(xì)胞、EOC20細(xì)胞
HIT T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 8細(xì)胞、PK-15細(xì)胞、SNK1細(xì)胞
COLO 357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB-49細(xì)胞、U138-MG細(xì)胞、EM3細(xì)胞
MM134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H526細(xì)胞、IHH細(xì)胞、GLC-82細(xì)胞
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