"PaTu 8988s Adherent人胰腺癌細胞系
細胞背景資料：胰腺癌；女性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數活細胞數，用凍存液調整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據不同的細胞類型調整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內生長，應在５０%條件培養(yǎng)基內(細胞在無血清培養(yǎng)基內生長２４小時)內凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現問題！細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內取出細胞時，有可能會出現凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
PaTu 8988s Adherent人胰腺癌細胞系
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經驗分享：支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長，營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達，又不能通過可視法對其進行檢測，而且它對細胞的生長率影響較小，不易引起注意。國內外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細胞的支原體種類是很多的，國外調查證明，大約有二十多種支原體能污染細胞，有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個方面來預防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作；細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后，特別是重要的細胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯合處理。支原體最突出的結構特征是沒有細胞壁，一般來講，對作用于細胞壁生物合成的抗生素，如萬古霉素等完全不敏感；對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用，所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。
NIHOVCAR3細胞系相關產品：FL62891細胞、H2052細胞、MC-116細胞
526-mel細胞系相關產品：MMAc-Serum Free細胞、LLC-MK2細胞、JROECL 19細胞
Swiss-3T3細胞系相關產品：H-1688細胞、Capan2細胞、HCC1395細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
KYSE 140細胞系相關產品：KU19-19細胞、SG231細胞、LC1/Sq細胞
SK-ES細胞系相關產品：LK 2細胞、Emory University-3細胞、U-138 MG細胞
SK-NEP-1細胞系相關產品：SCL II細胞、Dunn LM8細胞、COLO-829細胞
細胞生長特性：貼壁
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細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數據上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸的過程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經解凍后，為何會發(fā)生細胞數目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現細胞數目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
NCIH82細胞系相關產品：HT55細胞、NTera 2細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞
A427細胞系相關產品：CCD 841 CoN細胞、SW 954細胞、RH-35細胞
HT55細胞系相關產品：SUM 159PT細胞、UM-UC-14細胞、ML-2細胞
HEC151細胞系相關產品：Monomac-1細胞、LN-382細胞、253J細胞
RSMC細胞系相關產品：SU-DH-L5細胞、TKB1細胞、UWB1.289細胞
JURKAT E-61細胞系相關產品：MT-4細胞、WM-2664細胞、HNEpC細胞
H810細胞系相關產品：C-6細胞、L-929細胞、SW 756細胞
WEHI 164 TC細胞系相關產品：Hs683T細胞、OVCA 432細胞、MARC 145細胞
OCI-Ly18細胞系相關產品：HCC9724細胞、C-643細胞、LoVo細胞
M3 Clone M-3細胞系相關產品：HMy2.CIR細胞、HN-6細胞、T/G HA-VSMC細胞
32D:cl3細胞系相關產品：Farage OL細胞、LS174細胞、HepG2/C3A細胞
NCI-H345細胞系相關產品：MOVAS-1細胞、MAC1細胞、K-1735細胞
EFM-192A細胞系相關產品：H524細胞、Anip 973細胞、Mv1Lu細胞
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MCF10-A細胞系相關產品：ME-1 [Human leukemia]細胞、SNU387細胞、SNU251細胞
AML193細胞系相關產品：NCIH146細胞、MOLP2細胞、GM01232E細胞
HGE細胞系相關產品：Hs343T細胞、ECGI10細胞、A-2058細胞
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S.B.細胞系相關產品：BEL7402細胞、HEK-293-EBNA細胞、DU 145細胞
UCLA NPA-87-1細胞系相關產品：SNU-16細胞、MHCC97-L細胞、HCC78細胞
Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞系相關產品：SCC VII細胞、OCI/AML5細胞、MONO-MAC 6細胞
NCIH1437細胞系相關產品：H1385細胞、Madison lung細胞、PL11細胞
HOS (TE85)細胞系相關產品：H4-IIE-C3細胞、HT-1080細胞、PANC-08-13細胞
P3HR1-BL細胞系相關產品：Pan02細胞、MCA-205細胞、SK-ES-1細胞
CWR22-R1細胞系相關產品：Bat lung細胞、MCF-7B細胞、LS-411細胞
NG 108-15細胞系相關產品：GM03569B細胞、MDA-MB-436細胞、A431細胞
SC細胞系相關產品：DU145細胞、HT 115細胞、H87細胞
Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞系相關產品：PC 12細胞、NCI-H810細胞、Hs 578.T細胞
SNU-638細胞系相關產品：Hu-P-T4細胞、VeroC1008細胞、Anip[973]細胞
NR8383細胞系相關產品：HAPI細胞、WM 451-Lu細胞、HEK293細胞
SK BR 03細胞系相關產品：3T3NIH細胞、KTC1細胞、Hs 739.T細胞
SUDHL-5細胞系相關產品：MX-1細胞、NCI-H929細胞、SKml2細胞
AGS細胞系相關產品：Glioma 261細胞、B 95.8細胞、H-596細胞
MPC5細胞系相關產品：COLO-HSR細胞、CCRF.CEM細胞、H-2052細胞
SNU638細胞系相關產品：NIH:OVCAR3細胞、SP2-0-Ag14細胞、AD293細胞
J774.A1細胞系相關產品：DMS114細胞、UMR 106細胞、RGC-6細胞
Y-79細胞系相關產品：MBT2細胞、DITNC1細胞、CX-1細胞
COLO-320HSR細胞系相關產品：UACC-812細胞、G-401細胞、NIH3T3細胞
AML-2細胞系相關產品：OCI-Ly7細胞、NCI-H1755細胞、C-28I2細胞
NB-4細胞系相關產品：NCI-HUT-125細胞、HCC-1438細胞、HT clone H9細胞
H-1650細胞系相關產品：IPLB-SF 21細胞、DAKIKI Clone 1細胞、U 266細胞
293GP細胞系相關產品：BT.549細胞、H-23細胞、R3/1細胞
PC-3M IE8細胞系相關產品：Vertebral Cancer of the Prostate細胞、MRC-V細胞、AML-12細胞
MMQ細胞系相關產品：Potorous tridactylus Kidney 2細胞、PANC0504細胞、EBTr (NBL-4)細胞
SCC 9細胞系相關產品：MLE-12細胞、SK-MEL-24細胞、GM03671C細胞
BC-021細胞系相關產品：Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞、BRL細胞、MDA-MB 453細胞
KY180細胞系相關產品：SW1353細胞、SW 1088細胞、RKO-E6細胞
H2170細胞系相關產品：MBdSMC細胞、IM95細胞、MADB 106細胞
L-5178-Y-R細胞系相關產品：WPE-int細胞、SW260細胞、OUMS23細胞
Calu-3細胞系相關產品：H-378細胞、OP-9細胞、Hs 611.T細胞
253J B-V細胞系相關產品：MNNG/HOS Cl #5細胞、HEC-1A細胞、H838細胞
C22細胞系相關產品：OVCAR 420細胞、Ca759細胞、NCIH1417細胞
NCI-H1618細胞系相關產品：3396細胞、H-1417細胞、SNU-1細胞
NRK 49F細胞系相關產品：MCA205細胞、YAC-1細胞、T-CAM2細胞
Human Hepatocyte Line 5細胞系相關產品：COLO206F細胞、NB.4細胞、Huh7.5細胞
NCI-H2135細胞系相關產品：DV90細胞、TGBC11T細胞、ISHI細胞
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DMS 273細胞系相關產品：AN-3細胞、OCI-Ly7細胞、Hs940-T細胞
K-1735細胞系相關產品：786.O細胞、Calu 6細胞、HSAS3細胞
HCT-15細胞系相關產品：HEK293E細胞、J-82細胞、U373 MG細胞
JIMT-1細胞系相關產品：TFK1細胞、H-1568細胞、BJA-B細胞
KYSE 520細胞系相關產品：H2122細胞、RC-4B/C細胞、NCIH889細胞
B35細胞系相關產品：HT-3細胞、NCI-H1688細胞、MeT-5A細胞
NCIH647細胞系相關產品：Kit 225-K6細胞、Tca-83細胞、CX1細胞
NCIH446細胞系相關產品：Medical University of Graz-Chordoma 1細胞、Ketr3細胞、HRA 19細胞
SK-MEL5細胞系相關產品：HemECs細胞、HUT-28細胞、SW 403細胞
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D324細胞系相關產品：IMR32細胞、HDLM-2細胞、T/G HA VSMC細胞
HT-55細胞系相關產品：BT-474細胞、COR-L88細胞、TE9細胞
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