"PaTu 8988s Cell:人胰腺癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:胰腺癌;女性
207細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHOS細胞、Panc-03.27細胞、HEC1-A細胞
NIT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA 87細胞、Co-115細胞、HCC202細胞
OAW-42細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNDZ細胞、Granta519細胞、NCIH2085細胞
Duke University 4475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-190PT細胞、EM3細胞、CMT64細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
PaTu 8988s Cell:人胰腺癌細胞系
細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
TMD-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-FT細胞、SKNBE-2細胞、CEM-0細胞
SK LU 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EMT6細胞、LA-N-6(OAN)細胞、NCIH1836細胞
FL-83B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW954細胞、Hi-5細胞、MDA175細胞
CD 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU1919細胞、Earle's L cells細胞、HR-8348細胞
COC1/CDDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA RO-81A-1細胞、IFRS1細胞、DHL-6細胞
細胞生長特性:貼壁
PaTu 8988s Cell:人胰腺癌細胞系
正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
OVCAR 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-CEM/S細胞、Ball 1細胞、JIMT細胞
NSC-34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMK細胞、FRhK-4細胞、SKRC 39細胞
NE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 180細胞、OV-2008細胞、MEC-1細胞
COS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OACP4C細胞、H-2172細胞、CL-34細胞
H1299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-4-I細胞、Jurkat細胞、T8細胞
Mono Mac 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-841CoN細胞、Walker-Ca.256細胞、Hs 578Bst細胞
Vx-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuPT3細胞、GL-261細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞
PaTu 8988s Cell:人胰腺癌細胞系
PaTu-8988s細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8305-C細胞、EBC-1/original細胞、SCC154細胞
B 95-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-4細胞、HR8348細胞、OCI-Ly 8細胞
H-2171細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2030細胞、MO59J細胞、HIT T-15細胞
NCI-H650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK 1細胞、COLO394細胞、Hs 600.T細胞
LC-2/ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-85 clone 5細胞、SDBMSC細胞、AG 9細胞
NCTC clone 1469細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 729T細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞、WM 239細胞
Murine Carcinoma-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-739細胞、95-D細胞、87MG細胞
MESSA/Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM12-SM細胞、HLEC-B3細胞、MEG01細胞
HCT 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV 434細胞、NCIH2170細胞、MSTO211H細胞
HCT 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV 434細胞、NCIH2170細胞、MSTO211H細胞
INS-1E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AA-Mel細胞、Ramos (RA)細胞、PL-45細胞
A-375.S2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN-229細胞、H35細胞、HCT 15細胞
NCIH64細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo-201細胞、HL-1細胞、HOP62細胞
Emory University-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI747細胞、CHP100細胞、Capan-2細胞
UPCI-SCC-154細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-28/I2細胞、NCIH209細胞、WM-115細胞
H2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1143細胞、Pa14C細胞、OCI-Ly19細胞
Caki-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA-87細胞、NCIH929細胞、GM-3573細胞
CL40細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293H細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞、B16BL-6細胞
NCIH208細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L6565細胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞、M-G63細胞
HF-91細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-7細胞、10T1/2細胞、Ramos-RA1細胞
COV 434細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK/EBNA細胞、SKNBE2C細胞、HT1197細胞
HOP 62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU886細胞、NCI-SNU-16細胞、H-1105細胞
Helacyton gartleri細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCGC細胞、VP229細胞、RBL.2H3細胞
USMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UT7細胞、Hs 840.T細胞、HEK-293-F細胞
MDA-MB436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-795細胞、X63Ag8.653細胞、Colon 38細胞
Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-810細胞、KAT-5細胞、MB39細胞
HEK293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87-MG細胞、251MG細胞、B16F10細胞
HSF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1/2 clone8細胞、MGECs細胞、NCIH2106細胞
P 815細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPCA1細胞、SNU354細胞、EU-3細胞
HCE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-1-A細胞、SMA560細胞、LUDLU-1細胞
143B TK-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03571細胞、MH-22a細胞、SK RC 52細胞
Co 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO829細胞、JHH7細胞、NCIH1688細胞
GT1-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LY-R細胞、BCaP 37細胞、2B4細胞
TE354T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2008細胞、RPMI6666細胞、PANC 813細胞
LS-180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO678細胞、ABC1細胞、K1735細胞
SKNDZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:751-NA-15細胞、HCC366細胞、PFSK-1細胞
SPC-A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H548細胞、NCIH1793細胞、HMEC-1細胞
UACC 893細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M2-10B4細胞、RT-BM-1細胞、293S細胞
MUTZ1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63Ag8細胞、Human Epithelioma-2細胞、HITT15細胞
UWB1.289+BRCA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan 1細胞、MDA-MB-435細胞、SUM149細胞
SUM 190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS174T細胞、HeLaS3細胞、NE-1細胞
NCI-H1048細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 85.T細胞、CMT 167細胞、RAG細胞
YD38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG06814-J細胞、OVCAR-8/ADR細胞、143B細胞
PaTu 8988s Cell:人胰腺癌細胞系
N9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KB細胞、KU-812-F細胞、HT144mel細胞
6-T CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:1.1B4細胞、TR146細胞、Walker256細胞
SF-126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGSMC細胞、OCIAML2細胞、Lu-99A細胞
Human podocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L(TK-)細胞、ECC12細胞、Daoy細胞
H-774細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637細胞、SKNBE細胞、GB-1細胞
RPTEC/TERT 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RFL6細胞、NCIH1568細胞、Psi2 DAP細胞
MONO-MAC 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2135細胞、P30/OHK細胞、EOC 20細胞
KM-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T8細胞、MZCRC1細胞、U-251 MG細胞
MGECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKBR-3細胞、Hs 611.T細胞、QBC(939)細胞
PL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-CEM細胞、UACC-893細胞、NTera2 cl.D1細胞
CWR22R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAhy926細胞、A72細胞、SK_N_BE2C細胞
MCF 10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly01細胞、HR8348細胞、NGP細胞
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