"Y1 Adherent小鼠腎上腺皮質(zhì)瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng):細(xì)胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯(cuò),就是記得到時(shí)間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞:補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至70%單層時(shí)收獲細(xì)胞,計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個(gè)最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點(diǎn):當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí),有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實(shí),細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡單的實(shí)驗(yàn),不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會(huì)盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對(duì)細(xì)胞的損傷等等。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Y1 Adherent小鼠腎上腺皮質(zhì)瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來,很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣,消化下來也是一團(tuán)的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕,避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長挺快,那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能:一、細(xì)胞消化后吹打不均勻,造成細(xì)胞成團(tuán)生長:二、細(xì)胞細(xì)化太過,細(xì)胞成片脫落,吹打時(shí)沒有受力點(diǎn),細(xì)胞聚團(tuán)生長。解決辦法:根據(jù)細(xì)胞生長的情況進(jìn)行多次消化,將同次消化下來的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間,若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn):HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細(xì)胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
CD-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 melanoma F10細(xì)胞、NCIH1573細(xì)胞、RAEC細(xì)胞
LS-411細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1693細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞、OVCA433_Bast細(xì)胞
MiaPaCa-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TW-039細(xì)胞、FET細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
P388-D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-I細(xì)胞、SU8686細(xì)胞、CoCL3細(xì)胞
NCI H929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 159細(xì)胞、J82COT細(xì)胞、CCRF-CEM細(xì)胞
H661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABC1細(xì)胞、BHK21細(xì)胞、TSUpr1細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分
Y1 Adherent小鼠腎上腺皮質(zhì)瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因?yàn)楹窟^低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營養(yǎng)不足,過高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時(shí)須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間,按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換;3)購買的復(fù)蘇細(xì)胞,為何會(huì)有脫落?因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^程中不可避免的會(huì)有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
NCTC clone 1469細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 729T細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞、WM 239細(xì)胞
Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1588細(xì)胞、MPC5細(xì)胞、SW-527細(xì)胞
C2BBe1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3-M細(xì)胞、GT39細(xì)胞、HPAF2細(xì)胞
WIL2-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 824細(xì)胞、TH1細(xì)胞、HRPEpiC細(xì)胞
Hs 445細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OP9細(xì)胞、TK.10細(xì)胞、H-1963細(xì)胞
HO-8910PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T6細(xì)胞、TYKnu細(xì)胞、T98G細(xì)胞
SKO-007細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1833細(xì)胞、NBL-5細(xì)胞、HKBML細(xì)胞
RPTEC/TERT 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RFL6細(xì)胞、NCIH1568細(xì)胞、Psi2 DAP細(xì)胞
PK (15)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM07404D細(xì)胞、Hs-578T細(xì)胞、NCIH2286細(xì)胞
INS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-8細(xì)胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、MRCV細(xì)胞
KBM-7/Hap8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEP3B2細(xì)胞、GCT0404細(xì)胞、4T1-A細(xì)胞
RCC-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKCO-1細(xì)胞、OCI-Ly 18細(xì)胞、NCIH1355細(xì)胞
R1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H510細(xì)胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細(xì)胞、HUT 28細(xì)胞
Y1 Adherent小鼠腎上腺皮質(zhì)瘤細(xì)胞系
NCIH2052細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G361mel細(xì)胞、A10細(xì)胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞
Ly3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H295R細(xì)胞、MDA-MB-330細(xì)胞、LLC-WRC 256細(xì)胞
OV-1063細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C127細(xì)胞、SKMES1細(xì)胞、HCT-15細(xì)胞
OV-1063細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C127細(xì)胞、SKMES1細(xì)胞、HCT-15細(xì)胞
HT1376細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH30SJ細(xì)胞、RL-65細(xì)胞、NK62a細(xì)胞
CATH.a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC 12細(xì)胞、NCIADRRES細(xì)胞、SUP-M2細(xì)胞
Duke University 4475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-190PT細(xì)胞、EM3細(xì)胞、CMT64細(xì)胞
HeLa-229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293T/17細(xì)胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞、SP2/0 Ag-14細(xì)胞
OEC19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE671細(xì)胞、PE/CA-PJ34細(xì)胞、Mia PACA 2細(xì)胞
8505C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BGC823細(xì)胞、NCI-H1930細(xì)胞、Danio rerio Gill細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCKII細(xì)胞、NCI-HUT-596細(xì)胞、SK-ES細(xì)胞
Hs 688(A).T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC25細(xì)胞、E.G7-OVA細(xì)胞、SK LU 1細(xì)胞
ACC-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF10-A細(xì)胞、NFS60細(xì)胞、HN13細(xì)胞
CG4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu 8988s細(xì)胞、PLC/PRF/5細(xì)胞、HCC1954-BL細(xì)胞
KMH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE(2)細(xì)胞、ARIP細(xì)胞、PG-4 (S+L-)細(xì)胞
C1R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293細(xì)胞、UMNSAH-DF1細(xì)胞、NOR 10細(xì)胞
PANC0327細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3 L1細(xì)胞、EU-2細(xì)胞、Granta-519細(xì)胞
Panc_08_13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-112CoN細(xì)胞、Jurkat 77細(xì)胞、PCI-4M細(xì)胞
H-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2126細(xì)胞、NCI-H2228細(xì)胞、UACC-812細(xì)胞
CCD-1112sk細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Renal Carcinoma細(xì)胞、Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞、H727細(xì)胞
Nb 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3F442A細(xì)胞、A-549細(xì)胞、G401細(xì)胞
AN-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U373MG細(xì)胞、COLO 320細(xì)胞、HCM細(xì)胞
Nb-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C666-1細(xì)胞、SK MEL 5細(xì)胞、CL40細(xì)胞
MFE 296細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK UT 1細(xì)胞、RPMI-7666細(xì)胞、NCI-SNU-1040細(xì)胞
YD15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs940T細(xì)胞、Emory University-2細(xì)胞、SKNO-1細(xì)胞
OCI-AML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-94細(xì)胞、F36P細(xì)胞、Colo320細(xì)胞
THLE-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human podocyte細(xì)胞、SKMES細(xì)胞、95D細(xì)胞
GLRK 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IB-RS-2細(xì)胞、RCC_7860細(xì)胞、67NR細(xì)胞
HLEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:50.B1細(xì)胞、HEK293A細(xì)胞、KE-39細(xì)胞
OVCA-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS細(xì)胞、NCC-IT細(xì)胞、Bowes melanoma cells細(xì)胞
KCL22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC9811-P細(xì)胞、EC-GI細(xì)胞、Hs27F細(xì)胞
CD18/HPAF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB-9細(xì)胞、RL95-2細(xì)胞、Chinese Hamster Lung細(xì)胞
Hep G2/C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa-229細(xì)胞、GM05887細(xì)胞、SK-MEL28細(xì)胞
CTSC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFF細(xì)胞、Nb2-11細(xì)胞、SU-DHL-5細(xì)胞
COV362細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL-1細(xì)胞、L5178YR細(xì)胞、P30 OHK細(xì)胞
Hs604T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TSCCa細(xì)胞、P3X63細(xì)胞、GA-10 clone 4細(xì)胞
HBE 135-E6/E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHL-124細(xì)胞、SCC 9細(xì)胞、HPMC細(xì)胞
HBE 135-E6/E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHL-124細(xì)胞、SCC 9細(xì)胞、HPMC細(xì)胞
BC-3-H-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP126細(xì)胞、Lewis Lung細(xì)胞、NBL-3細(xì)胞
GC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞、Hs 695T細(xì)胞、GM05372E細(xì)胞
AsPC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF12A細(xì)胞、HCT-8/V細(xì)胞、LSECs細(xì)胞
HBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-446細(xì)胞、RL細(xì)胞、mIMCD3細(xì)胞
Y1 Adherent小鼠腎上腺皮質(zhì)瘤細(xì)胞系
GOTO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MTC-TT細(xì)胞、OV 1063細(xì)胞、KRC-Y細(xì)胞
Detroit-562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T98細(xì)胞、H-35 Reuber細(xì)胞、QGP-1細(xì)胞
TE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RASMC細(xì)胞、NKM-1細(xì)胞、PLA-801D細(xì)胞
REC 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-4006細(xì)胞、U266B1細(xì)胞、HOS (TE85, Clone F5)細(xì)胞
SK-N-BE(2)-M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAntle cell VERona-1細(xì)胞、Mono-Mac-1細(xì)胞、J111細(xì)胞
SNU-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2E8細(xì)胞、JurkatE6-1細(xì)胞、X63-Ag8.653細(xì)胞
A875細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU182細(xì)胞、U2932細(xì)胞、H820細(xì)胞
OVCAR-420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LICR-HN-6細(xì)胞、MDA435細(xì)胞、SNU-216細(xì)胞
Hs729T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIHOVCAR3細(xì)胞、EJ細(xì)胞、MDA361細(xì)胞
Mouse Podocyte Clone-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DSL-6A/C1細(xì)胞、MiaPaCa-2細(xì)胞、Pro-Lec1.3C細(xì)胞
X63-Ag8-653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CemT4細(xì)胞、SK MEL-28細(xì)胞、HUCCT1細(xì)胞
C2BBe1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3-M細(xì)胞、LTEP-a-2細(xì)胞、MDA435細(xì)胞
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