"HCT 116 Adherent人結腸癌細胞系
細胞背景資料：結腸腺癌；男性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HCT 116 Adherent人結腸癌細胞系
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
RL95-2細胞系相關產品：Clone 166細胞、GM03570細胞、Molm 13細胞
PK 15細胞系相關產品：MDCC-MSB1細胞、HCC95細胞、Panc 3.27細胞
NCI-H220細胞系相關產品：HEC-1A細胞、WM 239細胞、MUTZ1細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
RBE4細胞系相關產品：B95-8細胞、MCF-12F細胞、NCIH522細胞
SK Hep1細胞系相關產品：D-324MED細胞、Murine Lung Epithelial-12細胞、CCD841CoTr細胞
NRK49F細胞系相關產品：SN4741細胞、GM04678細胞、3T3-L1 ad細胞
細胞生長特性：貼壁
HCT 116 Adherent人結腸癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
IMCD3細胞系相關產品：P560細胞、MKN-1細胞、NCI-H2052細胞
Calu-3細胞系相關產品：H-378細胞、OP-9細胞、Hs 611.T細胞
C-32細胞系相關產品：EST81細胞、Cloudman M3細胞、UK Pan-1細胞
RL細胞系相關產品：SCC90細胞、NCIH596細胞、C22細胞
X63-AG 8.653細胞系相關產品：LAN-5細胞、OVCAR433細胞、H-157細胞
PIG1細胞系相關產品：L78細胞、FTC133細胞、SKMEL24細胞
MKN28細胞系相關產品：TOV112細胞、D324細胞、SKLU1細胞
GB-1細胞系相關產品：DLD-1細胞、RPVSMC細胞、MOLT3細胞
WB-F344細胞系相關產品：NCI-H211細胞、Kit225/K6細胞、WM239A細胞
WM-115細胞系相關產品：NCIH1944細胞、MHHCALL2細胞、SK-BR-3細胞
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F9細胞系相關產品：Roswell Park Memorial Institute 8402細胞、NCI-H2052細胞、A-1847細胞
TE354.T細胞系相關產品：S.B.細胞、HCC44細胞、RS1細胞
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293 Ad5細胞系相關產品：MO59J細胞、639V細胞、NCIADR.RES細胞
NU-GC-2細胞系相關產品：NCI-460細胞、Human Melanoma Cell Bowes細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞
LTEP a2細胞系相關產品：P3X63 AG 8.653細胞、870細胞、Malme-3 M細胞
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WBF344細胞系相關產品：HCC1428細胞、TF-1細胞、WRL 68細胞
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hTERT-RPE-1細胞系相關產品：SAS細胞、MASMC細胞、TE32細胞
COLO-824細胞系相關產品：Med 341細胞、Rat Skin 1細胞、M1細胞
LO2細胞系相關產品：IOSE 29細胞、NR 8383細胞、Hs 695T細胞
DB細胞系相關產品：RGB細胞、NBL-3細胞、HEL299細胞
624細胞系相關產品：MCMEC細胞、D10.G4.1細胞、CMT 64細胞
CCC-HPF-1細胞系相關產品：rHSC-99細胞、COLO-205細胞、U138-MG細胞
SK RC 52細胞系相關產品：RCC-10細胞、NCI-BL2141細胞、H-322細胞
Kit 225-K6細胞系相關產品：3T3-F442A細胞、PIEC細胞、SK-MEL-3細胞
KMS18細胞系相關產品：NS20-Y細胞、UCLA NPA-87-1細胞、JHH-7細胞
HUT125細胞系相關產品：MLE 12細胞、P3X63Ag8653細胞、32D clone3細胞
MS 751細胞系相關產品：OVCA5細胞、BALB 3T3 clone A31細胞、NCI-H520細胞
GBCSD細胞系相關產品：Vx2細胞、IGROV細胞、Hs 274.T細胞
RMG1細胞系相關產品：MFE-280細胞、NCI-H2110細胞、H82sclc細胞
NRK49F細胞系相關產品：SN4741細胞、GM04678細胞、3T3-L1 ad細胞
HCC-94細胞系相關產品：RPE D407細胞、8226/S細胞、H2081細胞
Kit225 K6細胞系相關產品：2780細胞、PA12細胞、NCI-H508細胞
BIC1細胞系相關產品：NCI-H1048細胞、TR 146細胞、AHH-1細胞
Pro-Lec1.3C細胞系相關產品：3T3 clone A31細胞、UACC 812細胞、NCI-H1770細胞
SV40 MES 13細胞系相關產品：DITNC1細胞、OCI-Ly 10細胞、HCC-95細胞
RD細胞系相關產品：MDA MB231細胞、Hs281T細胞、KYSE0410細胞
32Dc3細胞系相關產品：L-M(TK-)細胞、BMSCs（mBMSCs）細胞、BE(2)M-17細胞
HT-1080細胞系相關產品：AMJ2C8細胞、Capan-2細胞、U266細胞
EFM192A細胞系相關產品：X63-Ag8-653細胞、HSC（Human Schwann）細胞、SU-DHL-8細胞
Mel624細胞系相關產品：NCIH847細胞、CAL 148細胞、SK Mel 24細胞
HCT 116 Adherent人結腸癌細胞系
MBMEC細胞系相關產品：CNLMG-B5537SKIN細胞、alphaTC1 Clone 6細胞、UPCI:SCC90細胞
H1618細胞系相關產品：TE-12細胞、TCMK-1細胞、H810細胞
HN 4細胞系相關產品：NTERA2細胞、EFM-192A細胞、NCI-H1915細胞
SNU182細胞系相關產品：U266細胞、CC-LP-1細胞、hTERT-RPE1細胞
SUM-190細胞系相關產品：NCI-H1355細胞、FL62891細胞、Oka-C1細胞
H2452細胞系相關產品：BrCL12細胞、PTK2細胞、EB2細胞
CMT-167細胞系相關產品：SCLC21H細胞、Hs-578-T細胞、SU8686細胞
R 2 C細胞系相關產品：CCD-841-CoTr細胞、MDA-468細胞、HCEC-12細胞
H2444細胞系相關產品：H1437細胞、NCI-H1568細胞、SW 48細胞
PC3M-1E8細胞系相關產品：CEMx721.174.T2細胞、SKCO1細胞、MDAMB436細胞
ChaGo-K-1細胞系相關產品：Michigan Cancer Foundation-7細胞、DU4475細胞、NCI-N87細胞
C-32細胞系相關產品：EST81細胞、CEMO-1細胞、N-87細胞
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