"TE-4 Adherent人食管癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項:細(xì)胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至70%單層時收獲細(xì)胞,計數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實,細(xì)胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對細(xì)胞的損傷等等。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
TE-4 Adherent人食管癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細(xì)胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣,消化下來也是一團(tuán)的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細(xì)胞生長挺快,那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能:一、細(xì)胞消化后吹打不均勻,造成細(xì)胞成團(tuán)生長:二、細(xì)胞細(xì)化太過,細(xì)胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細(xì)胞聚團(tuán)生長。解決辦法:根據(jù)細(xì)胞生長的情況進(jìn)行多次消化,將同次消化下來的細(xì)胞放在一個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴(yán)重的時候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細(xì)胞處理時間可適當(dāng)放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細(xì)胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
KE 37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-4細(xì)胞、NCI-H747細(xì)胞、KP-N-RT細(xì)胞
Institute for Medical Research-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CACO2細(xì)胞、NCIH2009細(xì)胞、NCI-H322T細(xì)胞
SKMEL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-20細(xì)胞、GC-2spd(ts)細(xì)胞、BAC1.2F5細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
BT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 19細(xì)胞、SHP-77細(xì)胞、SCC25細(xì)胞
Hce8693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC-154細(xì)胞、ME-1 [Human leukemia]細(xì)胞、CMT-167細(xì)胞
Earle's L cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGECs細(xì)胞、NCI-SNU-620細(xì)胞、JHH7細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
TE-4 Adherent人食管癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細(xì)胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換;3)購買的復(fù)蘇細(xì)胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細(xì)胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
HS0578T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L cells (TK-)細(xì)胞、TK 10細(xì)胞、MGc80-3細(xì)胞
UT-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCC-9810細(xì)胞、Panc_04_03細(xì)胞、FL62891細(xì)胞
High-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH446細(xì)胞、CL-40細(xì)胞、HCC-1359細(xì)胞
GM03190A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-253細(xì)胞、Fu97細(xì)胞、TEC細(xì)胞
Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs822T細(xì)胞、SNU-449細(xì)胞、U266 B1細(xì)胞
CALU 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637I細(xì)胞、NCI H226細(xì)胞、Hs 695.T細(xì)胞
CAKI 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-6666細(xì)胞、BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞、CHL/IU細(xì)胞
MKN7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 1細(xì)胞、HS-445細(xì)胞、WM266mel細(xì)胞
RGC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI7666細(xì)胞、RKO-AS45-1細(xì)胞、RCC10 RGB細(xì)胞
AN3-CA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-M20細(xì)胞、GM16136細(xì)胞、SNK-1細(xì)胞
UCLA SO M14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-220細(xì)胞、CEF細(xì)胞、C2BBe 1細(xì)胞
UCW 100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTEC/TERT 1細(xì)胞、SW839細(xì)胞、TCam 2細(xì)胞
HDQ-P1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT.116細(xì)胞、A-673細(xì)胞、HIEC細(xì)胞
TE-4 Adherent人食管癌細(xì)胞系
WERI-Rb1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GCT細(xì)胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細(xì)胞、CAOV3細(xì)胞
KMB17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Verda reno細(xì)胞、CNE-2Z細(xì)胞、801-D細(xì)胞
HEC1-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C33A細(xì)胞、hA549細(xì)胞、LAPC-4細(xì)胞
HEC1-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C33A細(xì)胞、hA549細(xì)胞、LAPC-4細(xì)胞
HME-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACT-1細(xì)胞、GM02219C細(xì)胞、MIHA細(xì)胞
XWLC-05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1770細(xì)胞、V79-1細(xì)胞、Hela-mock細(xì)胞
NCIH1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P 815細(xì)胞、NCI H345細(xì)胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞
KG-1a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HVSMC細(xì)胞、ROS17/28細(xì)胞、QG-56細(xì)胞
GM03671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-3A細(xì)胞、NCI-H295R細(xì)胞、E304細(xì)胞
PC 61-5-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM637細(xì)胞、NIH-3T3細(xì)胞、BNL.CL2細(xì)胞
GM04154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE-1細(xì)胞、PC9細(xì)胞、CEL細(xì)胞
Ramos-RA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-740細(xì)胞、H2052_MM細(xì)胞、870細(xì)胞
WM 266-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT 167細(xì)胞、SNU484細(xì)胞、CTLL-2細(xì)胞
NCI-BL1339細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Neuro-2a細(xì)胞、Tb 1-Lu細(xì)胞、NCTC1469細(xì)胞
HCC1954 BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞、HPC-Y5細(xì)胞、SW 900細(xì)胞
FOXNY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16/F1細(xì)胞、P815細(xì)胞、251 MG細(xì)胞
8505C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BGC823細(xì)胞、NCI-H1930細(xì)胞、Danio rerio Gill細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP-FGC細(xì)胞、HOC-1細(xì)胞、CMT-64細(xì)胞
IPLB-Sf21-AE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU1細(xì)胞、H-1648細(xì)胞、MT-2J細(xì)胞
WC00079細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549ATCC細(xì)胞、MKN74細(xì)胞、D 407細(xì)胞
mIMCD-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR4細(xì)胞、BJA-B細(xì)胞、H1882細(xì)胞
HOC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2073細(xì)胞、293S細(xì)胞、H1648細(xì)胞
H-2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F10--RED細(xì)胞、H341細(xì)胞、GM04671細(xì)胞
CAL-33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 678細(xì)胞、WM451細(xì)胞、hTERT-HPNE細(xì)胞
HR-8348細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV(4;11)細(xì)胞、NCI-H441細(xì)胞、PLC/PRF5細(xì)胞
SKNMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU812-F細(xì)胞、BC-028細(xì)胞、CAL 39細(xì)胞
MeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly3細(xì)胞、HBVSMC細(xì)胞、OPM-2細(xì)胞
SK-ChA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sc-1細(xì)胞、BetaTC6細(xì)胞、SCaBER細(xì)胞
OCI/AML-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC94細(xì)胞、SKNFI細(xì)胞、HC11細(xì)胞
Hs 729T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA175細(xì)胞、3T3-F442A細(xì)胞、SW1463細(xì)胞
OC-3-VGH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-6細(xì)胞、PJ34細(xì)胞、SUD-4細(xì)胞
H-1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:143BTK-細(xì)胞、LN 229細(xì)胞、hADSCs細(xì)胞
CAL-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-51細(xì)胞、My-La 2059細(xì)胞、NCI-747細(xì)胞
PK 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC-MSB1細(xì)胞、HCC95細(xì)胞、Panc 3.27細(xì)胞
SEG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H929細(xì)胞、MDA-435細(xì)胞、Jurkat E6細(xì)胞
Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2452細(xì)胞、HEYA8細(xì)胞、MC3T3E1細(xì)胞
Wien-133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-322細(xì)胞、NL20細(xì)胞、NCIH2030細(xì)胞
R 1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:E0771細(xì)胞、PA1細(xì)胞、MLE12細(xì)胞
CCD19Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kasumi-1細(xì)胞、McA-RH7777細(xì)胞、Kit-225細(xì)胞
Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCLY8細(xì)胞、HCC-15細(xì)胞、HPAF細(xì)胞
PIG3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 29細(xì)胞、786-O RCC細(xì)胞、JURKAT E-61細(xì)胞
A 72細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AC29細(xì)胞、SW-579細(xì)胞、UPCISCC154細(xì)胞
TE-4 Adherent人食管癌細(xì)胞系
H9c2(2-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE296細(xì)胞、PLCPRF5細(xì)胞、HCC0044細(xì)胞
CTV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞、NEC細(xì)胞、PANC.1細(xì)胞
MUTZ-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1915細(xì)胞、NCIH1734細(xì)胞、DV-90細(xì)胞
Tu-177細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUG-Chor1細(xì)胞、NIH:OVCAR-10細(xì)胞、WM2664細(xì)胞
VK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L26細(xì)胞、H2170細(xì)胞、H2171細(xì)胞
B16-F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/mIL-6細(xì)胞、HEK293-A細(xì)胞、EU-4細(xì)胞
MAntle cell VERona-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL88細(xì)胞、PASMCS細(xì)胞、Tu686細(xì)胞
PAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-8/V細(xì)胞、293/EBNA-1細(xì)胞、2B4-L細(xì)胞
BRL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293細(xì)胞、LAD 2細(xì)胞、Hs 445細(xì)胞
C4-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-024細(xì)胞、MIN-6細(xì)胞、Swiss-3T3細(xì)胞
SKHEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNT-8細(xì)胞、EL4細(xì)胞、JB 6細(xì)胞
High5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2BBe 1細(xì)胞、CEF細(xì)胞、RetroPack PT67細(xì)胞
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