"TE-4 Adherent人食管癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
TE-4 Adherent人食管癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
KE 37細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-4細胞、NCI-H747細胞、KP-N-RT細胞
Institute for Medical Research-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CACO2細胞、NCIH2009細胞、NCI-H322T細胞
SKMEL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-20細胞、GC-2spd(ts)細胞、BAC1.2F5細胞
細胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
BT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 19細胞、SHP-77細胞、SCC25細胞
Hce8693細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC-154細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞、CMT-167細胞
Earle's L cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGECs細胞、NCI-SNU-620細胞、JHH7細胞
細胞生長特性:貼壁生長
TE-4 Adherent人食管癌細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮樣
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復(fù)蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
HS0578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L cells (TK-)細胞、TK 10細胞、MGc80-3細胞
UT-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCC-9810細胞、Panc_04_03細胞、FL62891細胞
High-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH446細胞、CL-40細胞、HCC-1359細胞
GM03190A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-253細胞、Fu97細胞、TEC細胞
Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs822T細胞、SNU-449細胞、U266 B1細胞
CALU 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637I細胞、NCI H226細胞、Hs 695.T細胞
CAKI 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-6666細胞、BNL 1MEA.7R.1細胞、CHL/IU細胞
MKN7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 1細胞、HS-445細胞、WM266mel細胞
RGC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI7666細胞、RKO-AS45-1細胞、RCC10 RGB細胞
AN3-CA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-M20細胞、GM16136細胞、SNK-1細胞
UCLA SO M14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-220細胞、CEF細胞、C2BBe 1細胞
UCW 100細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTEC/TERT 1細胞、SW839細胞、TCam 2細胞
HDQ-P1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT.116細胞、A-673細胞、HIEC細胞
TE-4 Adherent人食管癌細胞系
WERI-Rb1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GCT細胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、CAOV3細胞
KMB17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Verda reno細胞、CNE-2Z細胞、801-D細胞
HEC1-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C33A細胞、hA549細胞、LAPC-4細胞
HEC1-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C33A細胞、hA549細胞、LAPC-4細胞
HME-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACT-1細胞、GM02219C細胞、MIHA細胞
XWLC-05細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1770細胞、V79-1細胞、Hela-mock細胞
NCIH1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P 815細胞、NCI H345細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞
KG-1a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HVSMC細胞、ROS17/28細胞、QG-56細胞
GM03671細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-3A細胞、NCI-H295R細胞、E304細胞
PC 61-5-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM637細胞、NIH-3T3細胞、BNL.CL2細胞
GM04154細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE-1細胞、PC9細胞、CEL細胞
Ramos-RA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-740細胞、H2052_MM細胞、870細胞
WM 266-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT 167細胞、SNU484細胞、CTLL-2細胞
NCI-BL1339細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Neuro-2a細胞、Tb 1-Lu細胞、NCTC1469細胞
HCC1954 BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、HPC-Y5細胞、SW 900細胞
FOXNY細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16/F1細胞、P815細胞、251 MG細胞
8505C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BGC823細胞、NCI-H1930細胞、Danio rerio Gill細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP-FGC細胞、HOC-1細胞、CMT-64細胞
IPLB-Sf21-AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU1細胞、H-1648細胞、MT-2J細胞
WC00079細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549ATCC細胞、MKN74細胞、D 407細胞
mIMCD-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR4細胞、BJA-B細胞、H1882細胞
HOC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2073細胞、293S細胞、H1648細胞
H-2172細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F10--RED細胞、H341細胞、GM04671細胞
CAL-33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 678細胞、WM451細胞、hTERT-HPNE細胞
HR-8348細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV(4;11)細胞、NCI-H441細胞、PLC/PRF5細胞
SKNMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU812-F細胞、BC-028細胞、CAL 39細胞
MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly3細胞、HBVSMC細胞、OPM-2細胞
SK-ChA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sc-1細胞、BetaTC6細胞、SCaBER細胞
OCI/AML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC94細胞、SKNFI細胞、HC11細胞
Hs 729T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA175細胞、3T3-F442A細胞、SW1463細胞
OC-3-VGH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-6細胞、PJ34細胞、SUD-4細胞
H-1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品:143BTK-細胞、LN 229細胞、hADSCs細胞
CAL-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-51細胞、My-La 2059細胞、NCI-747細胞
PK 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC-MSB1細胞、HCC95細胞、Panc 3.27細胞
SEG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H929細胞、MDA-435細胞、Jurkat E6細胞
Jurkat, Clone E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2452細胞、HEYA8細胞、MC3T3E1細胞
Wien-133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-322細胞、NL20細胞、NCIH2030細胞
R 1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品:E0771細胞、PA1細胞、MLE12細胞
CCD19Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kasumi-1細胞、McA-RH7777細胞、Kit-225細胞
Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCLY8細胞、HCC-15細胞、HPAF細胞
PIG3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 29細胞、786-O RCC細胞、JURKAT E-61細胞
A 72細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AC29細胞、SW-579細胞、UPCISCC154細胞
TE-4 Adherent人食管癌細胞系
H9c2(2-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE296細胞、PLCPRF5細胞、HCC0044細胞
CTV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞、NEC細胞、PANC.1細胞
MUTZ-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1915細胞、NCIH1734細胞、DV-90細胞
Tu-177細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUG-Chor1細胞、NIH:OVCAR-10細胞、WM2664細胞
VK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L26細胞、H2170細胞、H2171細胞
B16-F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/mIL-6細胞、HEK293-A細胞、EU-4細胞
MAntle cell VERona-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL88細胞、PASMCS細胞、Tu686細胞
PAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-8/V細胞、293/EBNA-1細胞、2B4-L細胞
BRL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293細胞、LAD 2細胞、Hs 445細胞
C4-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-024細胞、MIN-6細胞、Swiss-3T3細胞
SKHEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNT-8細胞、EL4細胞、JB 6細胞
High5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2BBe 1細胞、CEF細胞、RetroPack PT67細胞
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