"TE-10 Adherent人食管癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉速和時間，轉的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
TE-10 Adherent人食管癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
Clone M-3細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB435細胞、MOPC細胞、SNU-368細胞
HG2855細胞系相關產(chǎn)品：P116細胞、H-735細胞、MLE-12細胞
DCS細胞系相關產(chǎn)品：GM16136細胞、KMS-26細胞、DU_145細胞
細胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內(nèi)可長滿。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
KASUMI6細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1435細胞、OCI/AML-3細胞、RMG1細胞
GM00637細胞系相關產(chǎn)品：KYSE0410細胞、H847細胞、CTSC-3細胞
AU565細胞系相關產(chǎn)品：BV2細胞、COLO-741細胞、RL-952細胞
細胞生長特性：貼壁生長
TE-10 Adherent人食管癌細胞系
細胞形態(tài)特性：上皮樣
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
OEC33細胞系相關產(chǎn)品：ZR-75-1細胞、HPF細胞、Wien133細胞
266 Bl細胞系相關產(chǎn)品：GM03671C細胞、KM-H2細胞、SACC-83細胞
PLA 802細胞系相關產(chǎn)品：MCF-7ADR細胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞、MGH-UI細胞
BGC-823細胞系相關產(chǎn)品：Pa17C細胞、7404細胞、H-2106細胞
BEL 7405細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H128細胞、D-341細胞、IOSE80UBC細胞
MOLM-14細胞系相關產(chǎn)品：C-643細胞、OCI-Ly07細胞、PANC0203細胞
Panc-05.04細胞系相關產(chǎn)品：SW 1353細胞、WEHI164細胞、EVSA/T細胞
Anip-973細胞系相關產(chǎn)品：D 407細胞、HR-8348細胞、RKOE6細胞
D10細胞系相關產(chǎn)品：HDLM2細胞、ACC-2細胞、AAV293細胞
RPE-hTERT細胞系相關產(chǎn)品：alpha TC1.6細胞、NTERA2細胞、D-283MED細胞
BE2C細胞系相關產(chǎn)品：H.Ep.-2細胞、DLD1細胞、LA4細胞
RPTEC/TERT1細胞系相關產(chǎn)品：PTK-2細胞、H1819細胞、NT2細胞
Institute for Medical Research-32細胞系相關產(chǎn)品：MDA-415細胞、HCC1187細胞、COLO357細胞
TE-10 Adherent人食管癌細胞系
HCC1588細胞系相關產(chǎn)品：H-211細胞、MDA-kb2細胞、H-3255細胞
SUSM-1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2073細胞、Hs604T細胞、MKN45細胞
SC1細胞系相關產(chǎn)品：H-1105細胞、3AO細胞、RH30SJ細胞
GC-2spd(ts)細胞系相關產(chǎn)品：Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞、TMD8細胞、SKNBE-1細胞
HFE-145細胞系相關產(chǎn)品：VSMC細胞、H1876細胞、T 84細胞
NCI H747細胞系相關產(chǎn)品：NKL細胞、HeLa-S3細胞、Colon 26細胞
HARAB細胞系相關產(chǎn)品：EA. hy 926細胞、Jurkat FHCRC細胞、FUOV1細胞
HET1A細胞系相關產(chǎn)品：COR-L279細胞、Mv 1 Lu細胞、HAVSMC細胞
801-D細胞系相關產(chǎn)品：IPEC1細胞、Panc02細胞、PANC0813細胞
HN6細胞系相關產(chǎn)品：HPB-ALL細胞、NOZ細胞、MOPC細胞
FET細胞系相關產(chǎn)品：CTLL-2細胞、N-Tera-2細胞、H-1563細胞
NCIH208細胞系相關產(chǎn)品：L6565細胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞、M-G63細胞
HuLEC-5a細胞系相關產(chǎn)品：AG06814-M細胞、OCI-AML-5細胞、NBLAN5T細胞
SK-N-BE2C細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB468細胞、TE 32.T細胞、OVCAR-432細胞
H28細胞系相關產(chǎn)品：H1618細胞、HOK細胞、V79-GalK1細胞
VMCUB1細胞系相關產(chǎn)品：H-508細胞、CEMC1細胞、PANC0403細胞
Y1細胞系相關產(chǎn)品：CaSki細胞、28SC細胞、LS-123細胞
HRCEC細胞系相關產(chǎn)品：Calu3細胞、McArdle RH-7777細胞、OCI-Ly 10細胞
H-1650細胞系相關產(chǎn)品：IPLB-SF 21細胞、DAKIKI Clone 1細胞、U 266細胞
NGEC細胞系相關產(chǎn)品：Duke University 145細胞、TCam-2細胞、SF-763細胞
Lu-99A細胞系相關產(chǎn)品：P3X63 Ag8細胞、HPAF II細胞、CHO K1細胞
SK-N-BE(2)-M17細胞系相關產(chǎn)品：MAntle cell VERona-1細胞、Mono-Mac-1細胞、J111細胞
NCI-H23細胞系相關產(chǎn)品：HEL-92細胞、H676細胞、VSMC細胞
L cell細胞系相關產(chǎn)品：C38細胞、CHO-K1細胞、Hep-G2細胞
Walker-256-TC細胞系相關產(chǎn)品：CWR22R細胞、EFM192細胞、MV(4;11)細胞
KATOIII細胞系相關產(chǎn)品：NCI-841細胞、Z310細胞、NIH:OVCAR-4細胞
Hs 940.T細胞系相關產(chǎn)品：CoC1細胞、TE10細胞、MEF (CF-1)細胞
HEK293F細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL-2細胞、P3 NS1 Ag4/1細胞、SupT1細胞
H-1819細胞系相關產(chǎn)品：5637細胞、SKNDZ細胞、OCI-Ly3細胞
MDA-MB-330細胞系相關產(chǎn)品：U-226AR1細胞、SNU-216細胞、HLE B-3細胞
Mv 1 Lu (NBL-7)細胞系相關產(chǎn)品：BCaP 37細胞、H-1944細胞、NCI-UMC-11細胞
AGS細胞系相關產(chǎn)品：Glioma 261細胞、B 95.8細胞、H-596細胞
MSTO-211 H細胞系相關產(chǎn)品：H-1666細胞、L5178Y-R細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞
YT細胞系相關產(chǎn)品：LLC細胞、HCEpiC細胞、SKNMC細胞
ONS76細胞系相關產(chǎn)品：TCam 2細胞、He-La細胞、MG63細胞
MV-4:11細胞系相關產(chǎn)品：SUM-159-PT細胞、FHs74 Int細胞、H-1755細胞
KYSE 510細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1105細胞、RK 13細胞、Hs737T細胞
NCI-H250細胞系相關產(chǎn)品：H-295細胞、H1341細胞、NCI-H226細胞
A3細胞系相關產(chǎn)品：SF-763細胞、X63-Ag8-653細胞、NPA87細胞
CPA 47細胞系相關產(chǎn)品：HCC1954-BL細胞、CEM T4細胞、FHL-124細胞
SNU398細胞系相關產(chǎn)品：G 401細胞、SKUT-1細胞、SK-N-BE(2)-C細胞
NMCG1細胞系相關產(chǎn)品：HBVSMC細胞、SaOS-2細胞、HEK-EBNA細胞
TE-10 Adherent人食管癌細胞系
RBL-2H3細胞系相關產(chǎn)品：EFM192B細胞、KB細胞、C4-2 Bone metastatic細胞
Colo320細胞系相關產(chǎn)品：PLC/PRF/5細胞、RBL-I細胞、TERT-RPE1細胞
LC1sq細胞系相關產(chǎn)品：Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞、RPMI-8226S細胞、RenCa細胞
SK-MES1細胞系相關產(chǎn)品：G519細胞、MCF7-CTRL細胞、MB468細胞
L132細胞系相關產(chǎn)品：SW 579細胞、UCLA SO M14細胞、SK-LMS-1細胞
HRIF細胞系相關產(chǎn)品：CV-1細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞、MCF-10A細胞
P3 NS1 Ag4細胞系相關產(chǎn)品：Hs 706.T細胞、National Medical Center-Glioma 1細胞、RCC-10細胞
Mino細胞系相關產(chǎn)品：EoL-1-cell細胞、LM6細胞、RPMI.8226細胞
OCUM-1細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-157細胞、NCI-H1666細胞、HEK (AD293)細胞
NCIH2171細胞系相關產(chǎn)品：CAL-148細胞、Alexander細胞、NCI-SNU-449細胞
KRC-Y細胞系相關產(chǎn)品：Human Foreskin Fibroblast細胞、KU-812F細胞、RKN細胞
PLA 802細胞系相關產(chǎn)品：MCF-7ADR細胞、NCI-H1105細胞、OCI Ly1細胞
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