"Onda 11 Adherent人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細(xì)胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
Onda 11 Adherent人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時(shí)體積會增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因?yàn)闀枞^濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”，常會誤認(rèn)為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認(rèn)為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點(diǎn)應(yīng)不會影響細(xì)胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號的血清。
RCM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-82細(xì)胞、RMS 1598細(xì)胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞
NCIH929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251MG細(xì)胞、HuCCT-1細(xì)胞、MARC145細(xì)胞
MBVP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-16細(xì)胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞、SK-N-DZ細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
COLO-824細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Med 341細(xì)胞、Rat Skin 1細(xì)胞、M1細(xì)胞
EJ 138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC18細(xì)胞、MV(4;11)細(xì)胞、MSCs（mUCMSCs）細(xì)胞
Melanoma 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T. T細(xì)胞、NSC-34細(xì)胞、OVCAR5細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
Onda 11 Adherent人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線，不會臨時(shí)要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時(shí)間就你一個人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
Nthy-ori 3-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 636 T細(xì)胞、LYR細(xì)胞、L 929細(xì)胞
SW-1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDBK (NBL-1)細(xì)胞、IM 9細(xì)胞、NR 8383細(xì)胞
MCF 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-GP細(xì)胞、MyLa2059細(xì)胞、NCI-H2444細(xì)胞
NCI-H1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sol8細(xì)胞、Colo-678細(xì)胞、H-2135細(xì)胞
FRTL 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW264細(xì)胞、OCI/AML-5細(xì)胞、NS1-Ag 4/1細(xì)胞
FK81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK-10細(xì)胞、DMS53細(xì)胞、A375SM細(xì)胞
COLO-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS27細(xì)胞、P3-X63-Ag8.653細(xì)胞、SW900細(xì)胞
SCC90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO.205細(xì)胞、U-373MG ATCC細(xì)胞、W256細(xì)胞
M059K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NMCG1細(xì)胞、C-Lu65細(xì)胞、M07e細(xì)胞
H-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV522細(xì)胞、EOC20細(xì)胞、RBL 1細(xì)胞
H1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Col 1細(xì)胞、GA-10 clone 4細(xì)胞、MCF-7/ADR細(xì)胞
OVCA 420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE 80細(xì)胞、RT-112細(xì)胞、NK92MI細(xì)胞
C-33A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH740細(xì)胞、CEM-T4細(xì)胞、PC3M-IE8細(xì)胞
Onda 11 Adherent人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
NTera-2D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH7細(xì)胞、NALM-6-M1細(xì)胞、TKB1細(xì)胞
MLA-144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1963細(xì)胞、WEHI 231細(xì)胞、P3X63Ag8653細(xì)胞
T-98細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKml2細(xì)胞、MKN-28細(xì)胞、MDCK Type II細(xì)胞
T-98細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKml2細(xì)胞、MKN-28細(xì)胞、MDCK Type II細(xì)胞
A101D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-C2B細(xì)胞、NCI-A549細(xì)胞、B6Tert-1細(xì)胞
HSC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M-2B4細(xì)胞、OVCAR.8細(xì)胞、Ca Ski細(xì)胞
OVCA 433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Japanese Tissue Culture-28細(xì)胞、HPAF-II細(xì)胞、H-1944細(xì)胞
H1838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DCS細(xì)胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細(xì)胞、MDAMB157細(xì)胞
143B TK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03571細(xì)胞、MH-22a細(xì)胞、SK RC 52細(xì)胞
Jurkat77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEC細(xì)胞、P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞、H766T細(xì)胞
Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H128細(xì)胞、HASMC細(xì)胞、NCI-H1299細(xì)胞
MH7A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOK細(xì)胞、BHP-10細(xì)胞、H1793細(xì)胞
SR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 1788細(xì)胞、CaEs17細(xì)胞、MALME.3M細(xì)胞
OVCAR 433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO394細(xì)胞、SMMC7721細(xì)胞、RPMI 8226細(xì)胞
NCI-BL1339細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro-2a細(xì)胞、Tb 1-Lu細(xì)胞、NCTC1469細(xì)胞
Case 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2106細(xì)胞、BGC823細(xì)胞、H1666細(xì)胞
B/C3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1672細(xì)胞、HMC細(xì)胞、HNE3細(xì)胞
LI7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BxPC-3細(xì)胞、3T3 J2細(xì)胞、T173細(xì)胞
ME16C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H250細(xì)胞、Hs-611-T細(xì)胞、3T3J2細(xì)胞
P-36細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT_116細(xì)胞、Chinese Hamster Ovary細(xì)胞、VM-CUB-1細(xì)胞
MDCK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-BR-3細(xì)胞、PNEC30細(xì)胞、293/EBNA-1細(xì)胞
LLC-PK(1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞、mRTEC細(xì)胞、HLMVEC細(xì)胞
U2-OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：bEnd3細(xì)胞、SK-RC-52細(xì)胞、OAW-42細(xì)胞
KP-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-S細(xì)胞、Colo-206F細(xì)胞、NCI-SNU-16細(xì)胞
NCIH2009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FD-LSC-1細(xì)胞、CCD1095Sk細(xì)胞、CT26.WT細(xì)胞
MCF 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-GP細(xì)胞、MyLa2059細(xì)胞、NCI-H2444細(xì)胞
IPLB-SF-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Z-138細(xì)胞、COLO320 DM細(xì)胞、786O細(xì)胞
GTL16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1184細(xì)胞、H-1341細(xì)胞、MBVP細(xì)胞
DMS 273細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN-3細(xì)胞、OCI-Ly7細(xì)胞、Hs940-T細(xì)胞
K562/ADP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJRH-30細(xì)胞、TE-85 clone 5細(xì)胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞
A549-Taxol細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLM細(xì)胞、KYSE410細(xì)胞、LNCaP-Clone-FGC細(xì)胞
Leydig細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTSC-3細(xì)胞、BPH-1細(xì)胞、MC3T3-L1細(xì)胞
LC-2-Ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC 39細(xì)胞、HLFa細(xì)胞、WB-F344細(xì)胞
JKT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEYA8細(xì)胞、NCI-SNU-449細(xì)胞、HCC0366細(xì)胞
NIH-OVCAR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：251 MG細(xì)胞、Mono-Mac-6細(xì)胞、High-5細(xì)胞
MGC803細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780-CP細(xì)胞、SK-GT-4細(xì)胞、CEM細(xì)胞
HEM-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Z310細(xì)胞、SU.86.86細(xì)胞、ECC-12細(xì)胞
NCI-H838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT-RPE-1細(xì)胞、R1610細(xì)胞、Okayama University Medical School-23細(xì)胞
CCD18Co細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLE B-3細(xì)胞、NCI-H1385細(xì)胞、HBL 100細(xì)胞
NU-GC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGC803細(xì)胞、ACCM細(xì)胞、MC 116細(xì)胞
H-2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT116/L細(xì)胞、LoVo細(xì)胞、H1563細(xì)胞
CCD1095Sk細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H711細(xì)胞、ETCC-007細(xì)胞、MM134細(xì)胞
Onda 11 Adherent人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
EOL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2126細(xì)胞、NCI-SNU-475細(xì)胞、CMT.64細(xì)胞
B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C57/B6-L細(xì)胞、HHL5細(xì)胞、C166細(xì)胞
SW780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV-21G細(xì)胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細(xì)胞、Vero E6細(xì)胞
X63Ag8-653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCMEC(BL12-H)細(xì)胞、HCCLM3細(xì)胞、GNM細(xì)胞
KU-19-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1.S細(xì)胞、SK-NEP-1細(xì)胞、HT細(xì)胞
HEM-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Z310細(xì)胞、SU.86.86細(xì)胞、ECC-12細(xì)胞
FCCH1018細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP 229細(xì)胞、210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞、EFM-192C細(xì)胞
NCI-H1672細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BL2141細(xì)胞、Turbot Embryonic Cell line細(xì)胞、OVCA432_Bast細(xì)胞
SUNE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D10G41細(xì)胞、SCC 15細(xì)胞、Hs822T細(xì)胞
UO31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHH-CALL-2細(xì)胞、Toledo細(xì)胞、A.704細(xì)胞
COR-L23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CF Pac1細(xì)胞、MDA-MB-134-VI細(xì)胞、NBL-S細(xì)胞
MCF 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-GP細(xì)胞、PK13細(xì)胞、TE353.SK細(xì)胞
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