"NIT-1 Adherent小鼠胰腺β細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細(xì)胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NIT-1 Adherent小鼠胰腺β細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
冷凍細(xì)胞解凍程序：依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒炐枰仨氂兴煌瑫r，務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細(xì)胞適應(yīng)后，方進(jìn)行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細(xì)胞而言差異極大，請務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細(xì)胞種類和濃度，于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細(xì)胞而言，１%以下之冷凍保護(hù)劑DMSO，不會對細(xì)胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細(xì)胞中去除，待第二天確定細(xì)胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細(xì)胞分化之細(xì)胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細(xì)胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
JF305細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT115細(xì)胞、HT22細(xì)胞、HTh74細(xì)胞
SNU5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-C2B細(xì)胞、Hela-Ap-1細(xì)胞、HEK 293-EBNA細(xì)胞
B16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-08.13細(xì)胞、CCD33Co細(xì)胞、Panc-8_13細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代，每周換液１-２次
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
CAOV3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEL細(xì)胞、ACHN細(xì)胞、B16-F1細(xì)胞
SNU368細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB-4細(xì)胞、GM02219細(xì)胞、Detroit562細(xì)胞
REC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL21細(xì)胞、SUD6細(xì)胞、C4-2B細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
NIT-1 Adherent小鼠胰腺β細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細(xì)胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細(xì)胞的實驗穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
GM02219C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF 10A細(xì)胞、Lec1細(xì)胞、RD 2細(xì)胞
526-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMAc-Serum Free細(xì)胞、LLC-MK2細(xì)胞、JROECL 19細(xì)胞
C918細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL CL.2細(xì)胞、HCT-15細(xì)胞、MDA435細(xì)胞
Sol8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW2647細(xì)胞、Oregon J-111細(xì)胞、U-118MG細(xì)胞
JM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI No. 1846細(xì)胞、Clone Y-1細(xì)胞、H7721細(xì)胞
GM02132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-620細(xì)胞、VMM5A細(xì)胞、A549ATCC細(xì)胞
NW-MEL-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2(LLc1)細(xì)胞、D324 Med細(xì)胞、NCIH1944細(xì)胞
WIL2 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSKM-1細(xì)胞、SW-1222細(xì)胞、HCC-2218細(xì)胞
B16/F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H345細(xì)胞、HEK293E細(xì)胞、NCIH1648細(xì)胞
NOZAWA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME180細(xì)胞、NCI-SNU-878細(xì)胞、HepaRG細(xì)胞
MCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-36細(xì)胞、C3H 10T1/2細(xì)胞、MFE280細(xì)胞
KM933細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi-2 DAP細(xì)胞、SK-Mel1細(xì)胞、BT549細(xì)胞
WERI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV3121細(xì)胞、AHH1細(xì)胞、HAC-84細(xì)胞
NIT-1 Adherent小鼠胰腺β細(xì)胞系
IOSE80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H69C細(xì)胞、Jurkat E6-1細(xì)胞、MGECs細(xì)胞
JIMT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMel-28細(xì)胞、CL40細(xì)胞、Calu-6細(xì)胞
CL11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH6細(xì)胞、P3-X63.Ag8.653細(xì)胞、HL7702細(xì)胞
CL11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH6細(xì)胞、P3-X63.Ag8.653細(xì)胞、HL7702細(xì)胞
ABC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1869細(xì)胞、L 363細(xì)胞、NCIH1930細(xì)胞
GM-637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BL1339細(xì)胞、CHAGOK1細(xì)胞、AsPC-1細(xì)胞
CMT 64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGBC11T細(xì)胞、M20 [Human melanoma]細(xì)胞、NEC8細(xì)胞
Hs 888.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPDC-CCL141細(xì)胞、LC-MS細(xì)胞、TCC-PAN2細(xì)胞
ZR75_1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML193細(xì)胞、CCC-ESF-1細(xì)胞、RPMI 2650細(xì)胞
PA-TU-8988S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2286細(xì)胞、OVCA 420細(xì)胞、MDA1386細(xì)胞
CAL 12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS-TE85細(xì)胞、SW-1990細(xì)胞、MES-SA/Dx-5細(xì)胞
KATO III細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES 23.5細(xì)胞、PLC8024細(xì)胞、TGW-I-nu細(xì)胞
OV90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McG-1細(xì)胞、Hs 821.T細(xì)胞、PANC-03-27細(xì)胞
8305C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN28細(xì)胞、NCI-H719細(xì)胞、SK-MEL2細(xì)胞
OAW-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNDZ細(xì)胞、Granta519細(xì)胞、NCIH2085細(xì)胞
RGCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MES-1細(xì)胞、C81-61細(xì)胞、3T6 Swiss Albino細(xì)胞
SK Col 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOSC-2細(xì)胞、NCIH2228細(xì)胞、NCI H929細(xì)胞
NCI-H460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel28細(xì)胞、NCI-H1793細(xì)胞、SW 480細(xì)胞
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H211細(xì)胞、CLL-CII細(xì)胞、bEnd.3[BEND3]細(xì)胞
HCT.116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SO-Rb 50細(xì)胞、P3-X63-Ag8-653細(xì)胞、SHSY-5Y細(xì)胞
Panc 08.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AZ 521細(xì)胞、HKF細(xì)胞、HSAS1細(xì)胞
HEK-AD 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H184A1細(xì)胞、M059K細(xì)胞、CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞
HS940細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc_02_03細(xì)胞、Anip-973細(xì)胞、A-9細(xì)胞
GL261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02131細(xì)胞、SK-N-MC細(xì)胞、HuH-1細(xì)胞
WRL 68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAT2細(xì)胞、LIXC002細(xì)胞、U 138 MG細(xì)胞
ASPC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-144細(xì)胞、TE671/RD細(xì)胞、MFM223細(xì)胞
Hs870T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JG細(xì)胞、NCI-H748細(xì)胞、SK-MEL-1細(xì)胞
H220細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-676細(xì)胞、L cells細(xì)胞、EL 4細(xì)胞
UMC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryo Kidney-2細(xì)胞、TSCCa細(xì)胞、SNU-620細(xì)胞
HUASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HC11細(xì)胞、SKLU01細(xì)胞、hTERT-HME1細(xì)胞
RBE4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B95-8細(xì)胞、MCF-12F細(xì)胞、NCIH522細(xì)胞
P3X63 AG8-653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-CAM2細(xì)胞、HMEC細(xì)胞、HELF細(xì)胞
HOS-TE85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SkMel31細(xì)胞、MS1細(xì)胞、OCI/AML-4細(xì)胞
MEG-01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H165細(xì)胞、CAL 33細(xì)胞、LOU-NH91細(xì)胞
H-865細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh-7.5細(xì)胞、A20細(xì)胞、SKES-1細(xì)胞
MBdSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH810細(xì)胞、MC3T3-E細(xì)胞、HCT.116細(xì)胞
MLM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1581細(xì)胞、NPA-87細(xì)胞、GM03320D細(xì)胞
QBC-939細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC13細(xì)胞、TSUpr1細(xì)胞、P31/Fujioka細(xì)胞
NCIH1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-T1細(xì)胞、E.L.4細(xì)胞、Panc 2.03細(xì)胞
YES 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU520細(xì)胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞、SUM-159細(xì)胞
PC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lec1細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 93細(xì)胞、H2141細(xì)胞
H-2087細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-12細(xì)胞、NIH/3T3細(xì)胞、MDA-MB-453細(xì)胞
NIT-1 Adherent小鼠胰腺β細(xì)胞系
LUDLU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP62細(xì)胞、SY5Y細(xì)胞、NCIH1734細(xì)胞
DoTc2-4510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS-751細(xì)胞、RPMI no. 8226細(xì)胞、SG231細(xì)胞
COS-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-87MG細(xì)胞、HS-695T細(xì)胞、TE-9細(xì)胞
CF PAC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSU-DLCL(2)細(xì)胞、NCI-H841細(xì)胞、TE12細(xì)胞
GC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 4細(xì)胞、C57/B6-L細(xì)胞、TSCC1細(xì)胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFB細(xì)胞、PL-5細(xì)胞、MCF 7B細(xì)胞
NCI-H727細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-ALL 1細(xì)胞、NCI-H1993細(xì)胞、KG-1細(xì)胞
JURKAT E-6.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEL細(xì)胞、NCIH647細(xì)胞、Balb/c3T3細(xì)胞
SuDHL 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578.Bst細(xì)胞、LS-411細(xì)胞、ChaGo K-1細(xì)胞
NCI-H1648細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26-clone 25細(xì)胞、293E細(xì)胞、H-23細(xì)胞
CWR-22rv1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-929細(xì)胞、Hs294T細(xì)胞、OCI-LY-19細(xì)胞
C918細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL CL.2細(xì)胞、CL11細(xì)胞、HPF細(xì)胞
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