"HeLa S3 Adherent人宮頸癌細胞系
細胞背景資料:該細胞是1955年由PuckTT,MarcusPI和CieciuraSJ建系的,含HPV-18序列;角蛋白陽性;可用于與染色體突變、細胞營養(yǎng)、集落形成相關(guān)的哺乳動物細胞的克隆分析。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞株(系)的使用,為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分,減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HeLa S3 Adherent人宮頸癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
OCM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV-173細胞、GM03320D細胞、Mv1.Lu細胞
RK 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2405細胞、HNE3細胞、SNU601細胞
HCC1500細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OEC33細胞、HTR-8/SV neo細胞、H1417細胞
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
38C-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAVER細胞、HT-3細胞、U343細胞
Y3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCLM3細胞、DiFi細胞、DHL8細胞
T-ALL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR75-30細胞、NUGC-3細胞、OCI-Ly 19細胞
細胞生長特性:貼壁生長
HeLa S3 Adherent人宮頸癌細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮樣
購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。
Y3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCLM3細胞、DiFi細胞、DHL8細胞
H322細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-x63-Ag8 653細胞、Jiyoye細胞、293F細胞
NBLAN5T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KFB細胞、HEL-299細胞、CEK細胞
EFM192B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-394細胞、NCI-H2227細胞、Helacyton gartleri細胞
Swiss3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T6-Swiss albino細胞、NCI-BL6細胞、NCIH661細胞
D-341 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR8/ADR細胞、EOC-20細胞、HuCC-T1細胞
Tu212細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FOX-NY細胞、RT4P細胞、H-1436細胞
SJCRH30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SBC-3細胞、RCC-10RGB細胞、NCI660細胞
LAN-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH460細胞、KMM1細胞、BTI-Tn5B14細胞
LAN-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H82sclc細胞、207細胞、CFPAC細胞
SUM 190細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV-HUC-1細胞、SH-SY5Y Parental細胞、HPAF-II/CD18細胞
MMVECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE 280細胞、MOLT16細胞、JIMT1細胞
HCEC-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-637細胞、HSF2細胞、Normal Rat Kidney-49F細胞
HeLa S3 Adherent人宮頸癌細胞系
624細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCMEC細胞、D10.G4.1細胞、CMT 64細胞
FAO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 174 T細胞、CORL23細胞、NCI-H2330細胞
BERH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1-S細胞、HL-7702細胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細胞
OCI-AML-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-294T細胞、MHCC-97細胞、UMUC3細胞
HS-294細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL-4細胞、RIN-m5F細胞、Huh 7.5細胞
CA-OV-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT T15細胞、VK2 (E6/E7)細胞、L6565細胞
MGHU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM2664細胞、MDA-MB-415細胞、RC-K8細胞
FDCP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M21細胞、HCC1599細胞、GT1-1細胞
OsA-CL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE11細胞、TE6細胞、NRK 52E細胞
NCI-H510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1755細胞、BE(2)M17細胞、BI-Mel細胞
RPMI 1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMC-HN8細胞、CMT64細胞、TE85細胞
SCL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-175-VII細胞、SO-RB50細胞、NCI-H1581細胞
ZYM-DIEC02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPaSteC(HPSC)細胞、RPPVEC細胞、NL20SV細胞
University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1376.T細胞、OVCAR 433細胞、PANC 1005細胞
CT26.WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1341細胞、SCC-25細胞、SN-12C細胞
639V細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs695T細胞、OPM2細胞、SUDHL-4細胞
NCIH1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST 486細胞、CT26.WT細胞、H-1299細胞
C-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-878細胞、NS-1-Ag4-1細胞、J-774A.1細胞
DoTc2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 688(A).T細胞、FU-OV-1細胞、MV4:11細胞
HCC-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRMT-1細胞、Swiss 3T3細胞、OCI-Ly1細胞
OVCA-432細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC-5細胞、NCI-H209細胞、SCC90細胞
NCI-H2291細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1299細胞、OCI-LY-19細胞、H1435細胞
Jurkat, Clone E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2452細胞、HEYA8細胞、MC3T3E1細胞
HaCaT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO-1-N-1細胞、Be Wo細胞、MGSMC細胞
Calu3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PY8119細胞、CV1細胞、TM3細胞
HPMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hela-mock細胞、GEO細胞、FAK+/+細胞
U-251_MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKGT4細胞、MDA-MB-134VI細胞、A673細胞
JS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-O RCC細胞、GM07404A細胞、CHP-126細胞
SK-MEL 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1-Ag4細胞、OSC19細胞、IHC-ST1細胞
RWPE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C 643細胞、SF-539細胞、NT2D1細胞
SNU-449細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2347細胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞、TPC1細胞
WM 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FU-OV-1細胞、N-2a細胞、BT325細胞
hFOB 1.19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR8細胞、MiaPaCa2細胞、THP-1(ATCC)細胞
Panc02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P815細胞、KTA-7細胞、CHOS細胞
SW 1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OB2細胞、SKMEL1細胞、U-2 OS細胞
SF126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMH-2細胞、MCA 205細胞、MKN 7細胞
H358細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NS1/1-Ag4.1細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、ACC-2細胞
CAL-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 subline B78細胞、EA.hy 926細胞、MC-3T3-E1細胞
QSG7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKUT-1細胞、CCRF-SB細胞、PGBE1細胞
P 815細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPCA1細胞、SNU354細胞、EU-3細胞
MRC-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1155細胞、Hep-3B細胞、SNU-C2A細胞
GM05372細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J 774A.1細胞、HF-91細胞、FaDu細胞
HeLa S3 Adherent人宮頸癌細胞系
WILL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、BMF細胞、NCIH2172細胞
RCC10RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA801-95C細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞、MIO-M1細胞
Normal Rat Kidney-52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-138-MG細胞、MDA-MB157細胞、Wayne State University-Head and Neck 13細胞
WEHI 231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn 5B1-4細胞、H1793細胞、H647細胞
alpha TC1 clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leukemic 1210細胞、COLO-320-HSR細胞、H19-7細胞
Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GTL16細胞、T47-D細胞、MDA-468細胞
Emory University-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME 180細胞、MDA-MB-157細胞、HIT clone T15細胞
Panc203細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCH細胞、HCASMC細胞、Human podocyte細胞
Mevo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sci-1細胞、BxPC-3細胞、MDA2B細胞
BC-3H-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H766T細胞、P3.times.63 Ag8.653細胞、OVCA433_Bast細胞
CCD 966SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MS 751細胞、KYSE 520細胞、PG-4細胞
NBLAN5T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KFB細胞、KU 19-19細胞、RBVEC細胞
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