"HeLa 229 Adherent人宮頸癌細胞系
細胞背景資料:宮頸癌;女性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內形成單層,需要再次進行傳代。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HeLa 229 Adherent人宮頸癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
TE-12細胞系相關產(chǎn)品:SKNBE細胞、U2-OS細胞、SuDHL 1細胞
SKRC-52細胞系相關產(chǎn)品:VA-ES-BJ細胞、Ly19細胞、Sci-1細胞
CAL-27細胞系相關產(chǎn)品:CAL-51細胞、My-La 2059細胞、NCI-747細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
PNT1/A細胞系相關產(chǎn)品:HCC-1599細胞、Hs729T細胞、NRK-49F細胞
BRL3A細胞系相關產(chǎn)品:WEHI-164細胞、NTera-2D1細胞、COLO-205細胞
Hs-729-T細胞系相關產(chǎn)品:RPMI8226細胞、OCILY-10細胞、MM96L細胞
細胞生長特性:貼壁
HeLa 229 Adherent人宮頸癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
HO1-N1細胞系相關產(chǎn)品:SU-DHL-8細胞、Dakiki細胞、YH-13細胞
CTLA4Ig-24細胞系相關產(chǎn)品:HEK293-H細胞、NCTC-929細胞、A2008細胞
MDA453細胞系相關產(chǎn)品:EMT-6細胞、CEM clone 7細胞、P3/X63-Ag8細胞
LLC-MK2細胞系相關產(chǎn)品:Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞、PC3細胞、L-M (TK-)細胞
OCILY7細胞系相關產(chǎn)品:SNU-520細胞、PT-67細胞、Hs839T細胞
HCC9724細胞系相關產(chǎn)品:BIU87細胞、MRAEC細胞、T-47D細胞
PC9細胞系相關產(chǎn)品:CNE1細胞、HME-1細胞、SU-DHL-6細胞
GM15452細胞系相關產(chǎn)品:Hs 343.T細胞、Human Hepatocyte Line 5細胞、COLO 320細胞
P3HR1-BL細胞系相關產(chǎn)品:Pan02細胞、MCA-205細胞、SK-ES-1細胞
GM04678細胞系相關產(chǎn)品:P388細胞、L cells (TK-)細胞、GCT細胞
GL261細胞系相關產(chǎn)品:GM02131細胞、SK-N-MC細胞、HuH-1細胞
NCI-H1623細胞系相關產(chǎn)品:COLO 320HSR細胞、HHUA細胞、ST486細胞
ELD-1細胞系相關產(chǎn)品:SKNEP-1細胞、22Rv-1細胞、BT-483細胞
HeLa 229 Adherent人宮頸癌細胞系
Pa14C細胞系相關產(chǎn)品:DLD 1細胞、HL7702細胞、RPMI no. 8226細胞
OVCAR-420細胞系相關產(chǎn)品:LICR-HN-6細胞、MDA435細胞、SNU-216細胞
HTR-8/SV neo細胞系相關產(chǎn)品:BDCM細胞、RMa-bm細胞、NCI-H747細胞
HTR-8/SV neo細胞系相關產(chǎn)品:BDCM細胞、RMa-bm細胞、NCI-H747細胞
HCT15細胞系相關產(chǎn)品:P-3J細胞、HuT 102細胞、OVCAR 8細胞
HPMC細胞系相關產(chǎn)品:FF-WT-BJ細胞、HEL-92_1_7細胞、RFL6細胞
HEK 293FT細胞系相關產(chǎn)品:CBRH7919細胞、HBE細胞、IAR 20細胞
HCT FET細胞系相關產(chǎn)品:NBLAN5T細胞、MDCK supertube細胞、HO1-N-1細胞
NCI-H1770細胞系相關產(chǎn)品:SKGIIIA細胞、HuH28細胞、TK.10細胞
T.T細胞系相關產(chǎn)品:SNU5細胞、H1838細胞、KNS81細胞
PC-3M-IE8細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-231-GFP細胞、M059J細胞、CCK-81細胞
C22細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR 420細胞、Ca759細胞、NCIH1417細胞
HCC1438細胞系相關產(chǎn)品:SK-N-BE-2細胞、OVCA-433細胞、A-673細胞
MEF (CF-1)細胞系相關產(chǎn)品:HPDE6c7細胞、RMG-I細胞、1301細胞
HCC-1937細胞系相關產(chǎn)品:RBMEC細胞、OE21細胞、MDAMB330細胞
NOZC-1細胞系相關產(chǎn)品:F442A細胞、MFE-280細胞、Hs 636.T細胞
S-16細胞系相關產(chǎn)品:Hs578Bst細胞、Vero 76 clone E-6細胞、QGY 7701細胞
210RCY3-Ag1.2.3細胞系相關產(chǎn)品:C32 [Human melanoma]細胞、QSG-7701細胞、NCIH650細胞
Mink細胞系相關產(chǎn)品:ROS 17/28細胞、SUIT2細胞、Human Microglia Clone 3細胞
VB細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H526細胞、H-2452細胞、CCC-HEH-2細胞
NGEC細胞系相關產(chǎn)品:Duke University 145細胞、TCam-2細胞、SF-763細胞
TE-9細胞系相關產(chǎn)品:DMS-79細胞、MCF/Adr細胞、ECC10細胞
MCF.10A細胞系相關產(chǎn)品:HEP-3B2細胞、P1-Raji細胞、F442A細胞
NCI.H23細胞系相關產(chǎn)品:KYSE450細胞、751細胞、AG06814-J細胞
LAD 2細胞系相關產(chǎn)品:GC-1細胞、SN4741細胞、Hs 746T細胞
P-19細胞系相關產(chǎn)品:HPAF/CD18細胞、184A1細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞
LC-1Sq細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2172細胞、Hs 281.T細胞、Ramos G6.C10細胞
SW 48細胞系相關產(chǎn)品:HCe-8693細胞、MFHL-2細胞、Detroit-562細胞
RAG細胞系相關產(chǎn)品:HFTF細胞、OSRC2細胞、CD18細胞
HuTu 80細胞系相關產(chǎn)品:BT483細胞、MPC-83細胞、Nakata-1細胞
LC1/Sq細胞系相關產(chǎn)品:Hs 822.T細胞、Be-Wo細胞、HCC-1806細胞
EBC1細胞系相關產(chǎn)品:Panc 04.03細胞、NK 10a細胞、KNS-62細胞
U-87細胞系相關產(chǎn)品:LLC-WRC 256細胞、TE-12細胞、McArdle RH-7777細胞
Pro-Lec1.3C細胞系相關產(chǎn)品:3T3 clone A31細胞、UACC 812細胞、NCI-H1770細胞
RL-952細胞系相關產(chǎn)品:B16細胞、BEND細胞、TE3A細胞
Tb1.Lu細胞系相關產(chǎn)品:CPA47細胞、H-1869細胞、L363細胞
U266BL細胞系相關產(chǎn)品:HP615細胞、RMG1細胞、NOZ細胞
NPA87細胞系相關產(chǎn)品:DU 145細胞、Sc-1細胞、SHEP1細胞
P31/FUJ細胞系相關產(chǎn)品:SNUC2A細胞、NFS-60細胞、MIA-Pa-Ca-2細胞
HuH6細胞系相關產(chǎn)品:Mel526細胞、LC1細胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細胞
HeLa/DDP細胞系相關產(chǎn)品:COLO 320細胞、KATO 3細胞、L-6 myoblast細胞
H-596細胞系相關產(chǎn)品:H-661細胞、CAL62細胞、Tb1Lu細胞
HeLa 229 Adherent人宮頸癌細胞系
NCI-H1238細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1668細胞、BAC1.2F5細胞、SKMEL-31細胞
TE354T細胞系相關產(chǎn)品:A2008細胞、RPMI6666細胞、PANC 813細胞
CCRFCEM細胞系相關產(chǎn)品:MM-1S細胞、SR786細胞、HTori:3細胞
PLC/PRF5細胞系相關產(chǎn)品:KYSE 510細胞、SUPB15細胞、LC1sq細胞
TC-1 [Mouse lung]細胞系相關產(chǎn)品:Hs 274細胞、HuH-28細胞、NCIH2023細胞
SKML-28細胞系相關產(chǎn)品:CT26.CL25細胞、TE32細胞、PG13細胞
Sol8細胞系相關產(chǎn)品:RAW2647細胞、Oregon J-111細胞、U-118MG細胞
SNU449細胞系相關產(chǎn)品:BNL 1MEA.7R.1細胞、NCI-H1975細胞、HUC-1細胞
TB-1 Lu細胞系相關產(chǎn)品:Jurkat細胞、b.End3細胞、D341MD細胞
HONE-1細胞系相關產(chǎn)品:PG-4 S+L-細胞、ARIP細胞、RPMI8402細胞
Jurkat, Clone E6-1細胞系相關產(chǎn)品:H2452細胞、PZ-HPV-7細胞、NCIH1435細胞
MDA453細胞系相關產(chǎn)品:EMT-6細胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細胞、KM12細胞
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