"Malme-3M Adherent人惡性黑色素瘤細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞!
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Malme-3M Adherent人惡性黑色素瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。
TO 175.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAW264.7細胞、HCC70細胞、SCL2細胞
H-1581細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H841細胞、HLE細胞、YH細胞
HS578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-468細胞、EAhy 926細胞、LA-N-6(OAN)細胞
細胞傳代方法:1:2-1:4傳代,2天換液1次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
H 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tadarida brasiliensis 1 lung細胞、BE(2)C細胞、P3/NS1/1-Ag4.1細胞
EOC20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV-434細胞、AgC11x3A細胞、Madin-Darby Canine Kidney細胞
DMS-273細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs840_T細胞、2780細胞、201T細胞
細胞生長特性:混合生長
Malme-3M Adherent人惡性黑色素瘤細胞系
細胞形態(tài)特性:成纖維細胞
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在1-2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
SW 1088細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera2/D1細胞、Hs888T細胞、ECV 304細胞
HCC1143細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞、NL-20細胞、MDCK-II細胞
THC-8307細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 123細胞、SW-403細胞、Medical Research Council cell strain-9細胞
RBL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MMAc.SF細胞、NK92MI細胞、H747細胞
MeT-5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-549細胞、SK-ES1細胞、PANC 327細胞
293T/17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-16細胞、IPEC1細胞、H1693細胞
293-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞、NRK49F細胞、CBRH-7919細胞
SKRC20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32 mel細胞、SV40-HCEC細胞、CCD-112CoN細胞
MDA MB 436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266-B1細胞、EAC-E2G8細胞、KM12-SM細胞
BAC1.2F5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAD-2細胞、HBVP細胞、VB細胞
LNCaP C4-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB1細胞、HCE細胞、MAD109細胞
GM02132細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-620細胞、VMM5A細胞、A549ATCC細胞
SCC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 201細胞、SMA 560細胞、Pt K2細胞
Malme-3M Adherent人惡性黑色素瘤細胞系
MDA-MB-175-VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1463細胞、KOSC2細胞、NB.4細胞
Malme-3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H920細胞、HEK-EBNA細胞、Hs 343.T細胞
C3H10T1/2CL8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNFI細胞、TE-15細胞、H-2073細胞
C3H10T1/2CL8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNFI細胞、TE-15細胞、H-2073細胞
JEG3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L428細胞、CCRF-CEM C1細胞、HuO9細胞
alphaTC clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L細胞、PK(15)細胞、Hs 683.T細胞
S180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2)細胞、HT clone H9細胞、NCI-H1975細胞
M619細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H498細胞、PC-10細胞、UM-RC-2細胞
HMO6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG 108-15細胞、CNE2Z細胞、H-378細胞
Michigan Cancer Foundation-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-239細胞、Hs 888Lu細胞、SW-13細胞
HFTF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa細胞、AX-Mel細胞、NCIH1048細胞
MDA-453細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JCA1細胞、CHP-100細胞、Caco-2/BBe 1細胞
SW1222細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRA 19細胞、Normal Rat Kidney-49F細胞、HCC941122細胞
LS-411N細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-87細胞、H1648細胞、MESSA細胞
SK-N-AS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FDCP-1細胞、NCI N87細胞、CCRF細胞
CV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 1112SK細胞、HCPEpiC細胞、WiDrTC細胞
ATDC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMST-6細胞、OVCAR-3細胞、MBMEC細胞
KU-812F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:E304細胞、LAN-6細胞、BpRc1細胞
Anip 973細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE21細胞、CCD-966SK細胞、Co 115細胞
OE19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-10.05細胞、BT 20細胞、DH82細胞
BNCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H647細胞、IGR.OV1細胞、U-251_MG細胞
NCI-747細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos-2G6-4C10細胞、CHG5細胞、FRO81-2細胞
HONE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4 S+L-細胞、GM05372E細胞、H1522細胞
WM35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-172細胞、293F細胞、H-2286細胞
HEK-293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LK-2細胞、Reh細胞、SHG 44細胞
A-549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB468細胞、HCC1937細胞、P30-OHK細胞
HHL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL 5細胞、NCI-H1963細胞、LAD2細胞
3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Me-Wo細胞、WERIRb1細胞、Line 207細胞
GL-261細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-746T細胞、NCI-H1623細胞、CCLP-1細胞
RPTEC/TERT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK-2細胞、H1819細胞、NT2細胞
BXPC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARPE-19細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、H-7721細胞
Ly7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CBRH-7919細胞、H-748細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞
MDA-MB435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK-21細胞、Me-Wo細胞、NCI-H1238細胞
T24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KCL22S細胞、GA-10細胞、UCLA-RO 81細胞
BT-474細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-47-D細胞、Ly10細胞、BC-028細胞
JF305細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT115細胞、HT22細胞、HTh74細胞
LS 1034細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、LY細胞、OVCA 433細胞
SUD-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHOK1細胞、H4-II-E-C3細胞、CHL-IU細胞
IOSE-80細胞系相關(guān)產(chǎn)品:mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、LO2細胞、H1781細胞
NIH-3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM-4細胞、CAL-85-1細胞、HA1800細胞
HO-8910PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T6細胞、TYKnu細胞、T98G細胞
HeLa/S3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞、NCTC1469細胞、GP-293細胞
Malme-3M Adherent人惡性黑色素瘤細胞系
HAPI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO細胞、H1944細胞、NCIH2227細胞
HuT78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J HR1-K細胞、MHCC 97細胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞
SK-RC-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT 26細胞、L 1210細胞、TE 32.T細胞
HeLa229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-BM-1細胞、CA-46細胞、OCI-Ly 7細胞
EC9706細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EA hy 926細胞、COR-L 105細胞、McA-RH 8994細胞
TC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMBC細胞、LC2/Ad細胞、A-72細胞
MSTO-211 H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1666細胞、L5178Y-R細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞
CMECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1573細胞、JHH2細胞、mREC細胞
CBRH-7919細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MH-S細胞、J774A.1細胞、BT20細胞
Sp 2/0-Ag 14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHP77細胞、H-1819細胞、PC12(高分化)細胞
HO1N1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Case 3細胞、AKR細胞、QG56細胞
TH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A9(Hamprecht)細胞、Hs 888.T細胞、KG1細胞
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