"Malme-3M細胞：人惡性黑色素瘤細胞系

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

細胞生長：貼壁

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)

細胞傳代方法：１：２-１：４傳代，２天換液１次。

細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系

細胞生長特性：混合生長

如何進行細胞復蘇：１)從液氮容器中取出凍存管，直接浸入３７℃溫水中，并不時搖動令其盡快融化；２)從３７℃水浴中取出凍存管，打開蓋子，用吸管吸出細胞懸液，加到離心管并滴加１０倍以上培養(yǎng)液，混勻；３)離心，１０００rpm，５min；４)棄去上清液，加入含１０%小牛血清培養(yǎng)液重懸細胞，計數(shù)，調整細胞密度，接種培養(yǎng)瓶，３７℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；５)次日更換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。【溫馨提醒】１)從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養(yǎng)細胞都可以用于凍存，但為對數(shù)生長期細胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液；２)將凍存管放入液氮容器或從中取出時，要做好防護工作(戴棉手套)，以免凍傷；３)凍存和復蘇用新配制的培養(yǎng)液。細胞復蘇的時候，有些初次實驗員將凍存管從液氮中取出后，放在室溫下，經(jīng)常發(fā)生凍存管爆炸，該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎？其中在擰緊凍存管的時候是否有哪些細節(jié)要注意的？一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺中用酒精棉球擦試管口，再稍擰松蓋子，再放３７度水浴鍋中搖溶，在將細胞轉移到裝有３７度預熱過的培養(yǎng)基的試管中，迅速離心，再用培養(yǎng)基洗一遍。

細胞培養(yǎng)無菌操作步驟和注意事項：１.打開無菌工作臺及凈化室的紫外燈，消毒半小時以上。２.進入凈化室前先關閉紫外燈，打開超凈臺風機，等待３０min以上，以排盡臭氧。３.穿好隔離衣，戴好口罩，帽子。４.風淋２分鐘。５.０.１%水泡手，擦干。６.點燃酒精燈;超凈臺內應避免放入過多的物品;使用的吸管，滴管，試管，培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。７.打開各類瓶蓋前先過火，以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰，鑷子使用前應經(jīng)火焰燒灼。８.水平式風機的超凈臺，應使瓶口斜置，應盡量避免瓶口敞開直立。９.同一根吸管或滴管不應連續(xù)用于幾個不同的細胞系；吸取培養(yǎng)基的吸管應離開培養(yǎng)瓶或試管口０.５cm，避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口；以防止細胞系的互相混雜污染。１０.漏在培養(yǎng)瓶上或臺上的液體，立即用酒精棉球擦凈。１１.操作完畢后恢復工作臺面。

細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉移到液氮中貯存。

V79-GalK1細胞系相關產(chǎn)品：GM05372E細胞、NCIH322細胞、NCIH2196細胞

PK 15細胞系相關產(chǎn)品：MDCC-MSB1細胞、HCC95細胞、Panc 3.27細胞

HPAEC細胞系相關產(chǎn)品：Vero細胞、FBHE細胞、SK-SH-SY5Y細胞

MAVER-1細胞系相關產(chǎn)品：AML-193細胞、NCI-H2170細胞、SNU-520細胞

PK13細胞系相關產(chǎn)品：MIA PaCa-2細胞、MM1S細胞、BEAS-2B細胞

BC3H-1細胞系相關產(chǎn)品：769P細胞、ETCC007細胞、GEO細胞

293GP細胞系相關產(chǎn)品：BT.549細胞、H-23細胞、R3/1細胞

HCC0078細胞系相關產(chǎn)品：HT144細胞、OVCAR-4細胞、HRCEC細胞

hTERT RPE1細胞系相關產(chǎn)品：RPMI-8226細胞、MHCC97-H細胞、H-2108細胞

KYSE0030細胞系相關產(chǎn)品：hOMF細胞、P31/Fujioka細胞、Human Epithelioma-2細胞

HuH1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H747細胞、Wien133細胞、AKR細胞

HS-445細胞系相關產(chǎn)品：PC.3細胞、HLE-SRA-01/04細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞

A-704細胞系相關產(chǎn)品：CEM C7細胞、HCV29細胞、NCI-H676B細胞

Clone M-3細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB435細胞、MOPC細胞、SNU-368細胞

Panc_04_03細胞系相關產(chǎn)品：YD38細胞、J 111細胞、SNU-739細胞

MKN 28細胞系相關產(chǎn)品：AG06814-N細胞、RPMI #1846細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞

MKN 28細胞系相關產(chǎn)品：AG06814-N細胞、RPMI #1846細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞

MALME.3M細胞系相關產(chǎn)品：P3J細胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、SP-2細胞

KU-812F細胞系相關產(chǎn)品：E304細胞、LAN-6細胞、BpRc1細胞

Hs839.T細胞系相關產(chǎn)品：SCC154細胞、VMM39細胞、Becker細胞

LN382細胞系相關產(chǎn)品：526mel細胞、PL5細胞、GC1-SPG細胞

H727細胞系相關產(chǎn)品：OCM-1細胞、A2780/CP70細胞、NCI-H358細胞

AML-193細胞系相關產(chǎn)品：SNU878細胞、KYSE 30細胞、Kelly細胞

Lewis-Lung細胞系相關產(chǎn)品：NCIH187細胞、CCRF細胞、HCC-1954細胞

MC3T3細胞系相關產(chǎn)品：P3-NS1/1-Ag4-1細胞、Panc 02細胞、COLO 201細胞

BTT739細胞系相關產(chǎn)品：U-937細胞、H1869細胞、My-La 2059細胞

WM35細胞系相關產(chǎn)品：A-172細胞、293F細胞、H-2286細胞

SK-MEL-28細胞系相關產(chǎn)品：HSF細胞、AQ-Mel細胞、4-1st細胞

Hs683T細胞系相關產(chǎn)品：H1836細胞、PBL細胞、HTori3細胞

624 MEL細胞系相關產(chǎn)品：SNUC1細胞、CCD-841CoN細胞、COLO-684細胞

HEK/293細胞系相關產(chǎn)品：VMM5A細胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞、L-M[TK-]細胞

LIPF178C細胞系相關產(chǎn)品：NEC8細胞、GM04154細胞、C41細胞

COLO-741細胞系相關產(chǎn)品：HPAF2細胞、Swiss/3T3細胞、MDA-435細胞

KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1299細胞、SUP-B15細胞、C6細胞

PM6細胞系相關產(chǎn)品：H-1694細胞、hEEC細胞、HCT116細胞

MODE-K細胞系相關產(chǎn)品：RC-4B細胞、GM03190A細胞、H-69細胞

PK13細胞系相關產(chǎn)品：MIA PaCa-2細胞、MM1S細胞、BEAS-2B細胞

MDA-435細胞系相關產(chǎn)品：GA-10 (Clone 4)細胞、SK-RC-20細胞、F-36P細胞

Mouse Forestomach Carcinoma細胞系相關產(chǎn)品：MCA 205細胞、GM00346B細胞、Capan-1細胞

HCC44細胞系相關產(chǎn)品：NCIH358細胞、SF295細胞、ME1細胞

OVCAR.3細胞系相關產(chǎn)品：Vero C1008細胞、SKNEP1細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞

SUM-159細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1341細胞、HS5細胞、JurkatE6-1細胞

Earles's cells細胞系相關產(chǎn)品：BC3 H1細胞、OCI-LY-8細胞、NCI-SNU-C2B細胞

RCC 7860細胞系相關產(chǎn)品：COLO-205細胞、WEHI231細胞、CAKI 2細胞

Anip[973]細胞系相關產(chǎn)品：B16BL6細胞、WTRL1細胞、293-EBNA細胞

G292細胞系相關產(chǎn)品：Nb 2細胞、HS940細胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞

U2-OS細胞系相關產(chǎn)品：bEnd3細胞、SK-RC-52細胞、OAW-42細胞

CNE細胞系相關產(chǎn)品：JB6Cl30細胞、SP-2細胞、MC26細胞

Potorous tridactylus Kidney 2細胞系相關產(chǎn)品：KYSE30細胞、RCC 7860細胞、Farage細胞

LS-411細胞系相關產(chǎn)品：H1693細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞、OVCA433_Bast細胞

HCC15細胞系相關產(chǎn)品：FRO81-2細胞、YD-38細胞、MOLT.4細胞

WM 266-4細胞系相關產(chǎn)品：CMT 167細胞、SNU484細胞、CTLL-2細胞

H-2342細胞系相關產(chǎn)品：HCT116/L細胞、LoVo細胞、H1563細胞

MCF-12A細胞系相關產(chǎn)品：LSC-1細胞、SKHEP-1細胞、EB-2細胞

HS-766T細胞系相關產(chǎn)品：SW-1353細胞、NCI-H2085細胞、C32r細胞

PL12細胞系相關產(chǎn)品：16HBE140細胞、PA-TU-8988S細胞、HIBEpiC細胞

PL12細胞系相關產(chǎn)品：16HBE140細胞、PA-TU-8988S細胞、HIBEpiC細胞

Hs27F細胞系相關產(chǎn)品：LWnt3A細胞、IPLB-Sf21-AE細胞、HLEpiC細胞

LIXC-002細胞系相關產(chǎn)品：B4G12細胞、MRC9細胞、M059J細胞

NCI-H2172細胞系相關產(chǎn)品：Pt K1細胞、NPC-TW 039細胞、Detroit 562細胞

REC細胞系相關產(chǎn)品：JROECL21細胞、SUD6細胞、C4-2B細胞

SCL1細胞系相關產(chǎn)品：NCTC clone 1469細胞、HTR-8細胞、RWPE1細胞

VMM5A細胞系相關產(chǎn)品：CX-1細胞、Fox/NY細胞、7860細胞

TGW細胞系相關產(chǎn)品：Clone Y-1細胞、ARO細胞、RCC-JF細胞

Ly7細胞系相關產(chǎn)品：CBRH-7919細胞、H-748細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞

NRK clone 52E細胞系相關產(chǎn)品：PBL細胞、ARO81細胞、NIH:OVCAR-5細胞

SNU-878細胞系相關產(chǎn)品：HR8348細胞、OCI-Ly 1細胞、NCI-SNU-878細胞

NCIH522細胞系相關產(chǎn)品：Pa16C細胞、CAL 120細胞、OVCAR433細胞

He-La細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1703細胞、J 82細胞、THP1細胞

Hepa-RG細胞系相關產(chǎn)品：SF 763細胞、DHL4細胞、NCIH1373細胞

SF-126細胞系相關產(chǎn)品：HGSMC細胞、KP 4細胞、BIC細胞

Vertebral Cancer of the Prostate細胞系相關產(chǎn)品：CT26.WT細胞、CCD1095Sk細胞、NCI747細胞

HPAC細胞系相關產(chǎn)品：JVM-3細胞、Psi-2-DAP細胞、EB-3細胞

Mono-Mac-6細胞系相關產(chǎn)品：IMCD3細胞、Ect1/E6E7細胞、TCC-SUP細胞

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