"PA-1 Adherent人卵巢畸胎瘤細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染:懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染,其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理,先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內(nèi)吞作用,將目的基因?qū)爰毎麅?nèi),而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍,所以,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次,脂質(zhì)體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外,懸浮細胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率,可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法,針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的,電擊對細胞有一定的損傷,選用具有細胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑,可以將電擊對細胞的傷害降到最低,懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染,選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
PA-1 Adherent人卵巢畸胎瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準(zhǔn)備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。
Turbot Embryonic Cell line細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAOEC細胞、SKNEP細胞、Caco-2/BBe細胞
AA-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1463細胞、L 929細胞、HT-1080細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM17219細胞、UACC-812細胞、D-324 Med細胞
細胞傳代方法:1:4-1:10傳代;每周2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HFLS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC11細胞、HCC-9204細胞、HEM細胞
8226/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LCD細胞、HCC-4006細胞、293細胞
NCI-H3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CATH-a細胞、C8166-CD4細胞、H-196細胞
細胞生長特性:貼壁生長
PA-1 Adherent人卵巢畸胎瘤細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮細胞
【細胞培養(yǎng)中細菌、霉菌的污染情況總結(jié)】細菌:細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據(jù)感染細菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時放氣時間足夠,壓力足夠!尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象!可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理;霉菌:培養(yǎng)液是清亮的,倒置顯微鏡下無雜質(zhì),37度孵箱培養(yǎng)2-3天,仍清亮,但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì),鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物,可看到明顯的菌絲,細胞仍可生長,但時間長之后,細胞的活力狀態(tài)變差,用酸銅溶液擦拭CO2孵箱內(nèi),再把水盤里也加上飽和量的酸銅?;蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有細胞暫時轉(zhuǎn)移,采用擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把放置在孵箱內(nèi)一個小時,使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后,再移入細胞。孵箱應(yīng)定期清潔(2月左右),尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外燈照。預(yù)防霉菌污染,可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗;但細胞一旦污染,很難挽救,制霉菌素或D或雙抗都于事無補,建議舍棄該污染細胞,將環(huán)境徹底消毒,如果所有細胞都污染,可能是系統(tǒng)污染,檢查一下培養(yǎng)基和器材,如果只是個別污染,可能是操作問題,就要注意操作。
HLF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-T6細胞、NCI-H774細胞、SW-1222細胞
NCI-HUT-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TR-146細胞、ECV 304細胞、H-1869細胞
HSC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc3_27細胞、NCI-H498細胞、HuTu-80細胞
293EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-3573細胞、A375-MEL細胞、Hs-281-T細胞
GES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCET細胞、PC-14細胞、GI-1細胞
PE/CA-PJ34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT-T15細胞、NS20-Y細胞、Hce8693細胞
H2.35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNT-229細胞、CCD1112Sk細胞、Karpas 299細胞
LC2/Ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCM1細胞、McG-1細胞、Hep II細胞
HeLa-229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293T/17細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、SP2/0 Ag-14細胞
PaTu-8988s細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8305-C細胞、EBC-1/original細胞、SCC154細胞
PC-3M-1E8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-4細胞、ARH 77細胞、QBI-293A細胞
J111細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH650細胞、Hs819T細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞
Ly7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CBRH-7919細胞、H-748細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞
PA-1 Adherent人卵巢畸胎瘤細胞系
PBMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:kms 11細胞、LLC-MK-2細胞、526-mel細胞
SMA-560細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞、801-D細胞、Tu-686細胞
Farage細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK clone 52E細胞、NTera2/D1細胞、H-1522細胞
Farage細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK clone 52E細胞、NTera2/D1細胞、H-1522細胞
NTHY-ORI3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hEEC細胞、Mv1Lu細胞、HMy2.CIR細胞
mRMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375mel細胞、SCL-II細胞、SK-GT-2細胞
NCI-H2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-292細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HOS (TE85)細胞
8305-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CDC/EU.HMEC-1細胞、TGHAVSMC細胞、MCF12F細胞
GTL16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1184細胞、H-1341細胞、MBVP細胞
H250細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM-CUB1細胞、RERF-LC-MS細胞、NU-GC-2細胞
MDCK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134細胞、Jurkat77細胞、SPC-A-1細胞
FL62891細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI-SG231細胞、SNU-601細胞、SNU-668細胞
NCI-SNU-216細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL4細胞、ANA-1細胞、H4-II-EC3細胞
GM04671細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HONE-1細胞、Karpas-299細胞、H735細胞
SKMEL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tca-83細胞、SW1353細胞、GM04679細胞
H146細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC 3960細胞、CWR22-Rv1細胞、HFLS-OA細胞
CTLA4Ig-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-H細胞、NCTC-929細胞、A2008細胞
SNU761細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1694細胞、H1755細胞、Bac 1.2F5細胞
P3-NS1/1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHLF細胞、NCI-H524細胞、Caco 2細胞
U266 Bl細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1651細胞、TM4細胞、SU.86.86細胞
CFPAC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PJ34細胞、143B TK-細胞、G-402細胞
H2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hFOB細胞、NCI-H2171細胞、CP70細胞
NCI522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-kb2細胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、OCI-LY-19細胞
H-1672細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M細胞、Calu-3細胞、SK MEL 28細胞
H-1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFPAC1細胞、NCIH1581細胞、KOSC-2 cl3-43細胞
L929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1792細胞、HuCC-T1細胞、293 EBNA細胞
HCT-8/V細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DR2R 1610細胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、TCCSUP細胞
RFL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-1197細胞、CAKI.1細胞、COLO 738細胞
UCLA SO M14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-220細胞、CEF細胞、C2BBe 1細胞
RWPE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞、DMS 153細胞、SCLC21H細胞
MH-22a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:High-5細胞、NCI-H2286細胞、P3-NS1/1Ag 4.1細胞
769-P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:143B細胞、MA 104細胞、RBE細胞
NCIH1435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHG-5細胞、293-GP細胞、JIII細胞
KNS-42細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-388D1細胞、mRMEC細胞、T47-D細胞
HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI8402細胞、NIH3T3細胞、C 643細胞
MC-3T3-E1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC-4細胞、Mo 59J細胞、NCI-SNU-182細胞
GS9L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse INsulinoma 6細胞、RAMOS2G64C10細胞、RGE細胞
Danio rerio Gill細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKG-3a細胞、343MG細胞、FHs74Int細胞
SNU-668細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mac-1細胞、EU-4細胞、NCI-H660細胞
COLO 320 HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DR2R1610細胞、E0771細胞、H-498細胞
HL-60 clone15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLOY4細胞、Tn-5B1-4細胞、NIH-OVCAR-3細胞
KMY1022細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY-19細胞、CT26.CL25細胞、HCC0095細胞
PA-1 Adherent人卵巢畸胎瘤細胞系
A-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM192A細胞、NPA 87細胞、SN4741細胞
MMAc-Serum Free細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly18細胞、TE-4細胞、KTCTL140細胞
P388細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG1細胞、H-378細胞、NH-6細胞
N87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDSMC細胞、Th17細胞、L-M(TK-)細胞
NCIH522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa16C細胞、CAL 120細胞、OVCAR433細胞
C81-61細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB 6細胞、Hs 445細胞、Panc8.13細胞
Colon 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL-31細胞、Ls-174-T細胞、SkMel31細胞
HEK-293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16F10細胞、Jiyoye(P-2003)細胞、High 5細胞
H.Ep. No. 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL 2H3細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞、OVCAR8/ADR細胞
H-522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293-F細胞、Hs 840.T細胞、RWPE-1細胞
BHP10-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375-SM細胞、DMS114細胞、H-1155細胞
HSC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2081細胞、NCI-SNU-5細胞、RT-BM細胞
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