"PA-1 epithelioid cells人卵巢畸胎瘤細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn):(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時(shí),要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時(shí)更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。 NPA-87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC92A細(xì)胞、H-4細(xì)胞、SUPT-1細(xì)胞 HCC-1954BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker256-TC細(xì)胞、WSUDLCL2細(xì)胞、MEF細(xì)胞 H1373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Opossum Kidney細(xì)胞、SUP-T1細(xì)胞、JEKO細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 PA-1 epithelioid cells人卵巢畸胎瘤細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時(shí)因安剖未封嚴(yán),浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺(tái)上打開蓋,用吸管吸出細(xì)胞懸液,裝入離心管中,再補(bǔ)加10ml培養(yǎng)液,吹打使細(xì)胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細(xì)胞時(shí),處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請(qǐng)檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請(qǐng)立即通知細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細(xì)胞回溫至37°C,并讓運(yùn)送過程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長(zhǎng)。隔天后,于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中,或細(xì)胞已長(zhǎng)滿盤,則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代方法:1:4-1:10傳代;每周2-3次。 RTMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL 45細(xì)胞、J-111細(xì)胞、KMH-2細(xì)胞 NCI522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-kb2細(xì)胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞、OCI-LY-19細(xì)胞 BIU-87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT 28細(xì)胞、COLO320DM細(xì)胞、MDA-MB-468-RED細(xì)胞 Jiyoye(P-2003)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞、ECC1細(xì)胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞 OCIAML5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leukemia 1210細(xì)胞、HS-294細(xì)胞、HEL-92-1-7細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 PA-1 epithelioid cells人卵巢畸胎瘤細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞 為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性,也就是說當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候,它就會(huì)停止生長(zhǎng),及時(shí)傳代后,細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。 NCI-UMC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-115細(xì)胞、H1623細(xì)胞、NK-92 MI細(xì)胞 P3/NS1/1-Ag4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2444細(xì)胞、IR 983F細(xì)胞、LC1細(xì)胞 BT-474細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-47-D細(xì)胞、Ly10細(xì)胞、BC-028細(xì)胞 SUM 52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA415細(xì)胞、SU86-86細(xì)胞、SKRC-20細(xì)胞 TOV-112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-626細(xì)胞、RWPE2細(xì)胞、RCSMC細(xì)胞 Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:451Lu細(xì)胞、BNL CL.2細(xì)胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞 MIHA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCS-2/8細(xì)胞、NPC-039細(xì)胞、PaTu8988s細(xì)胞 LTPA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH244細(xì)胞、HT-55細(xì)胞、NCIH1299細(xì)胞 Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-676B細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞、RIN-m 14B細(xì)胞 T8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-65細(xì)胞、SK-SH-SY5Y細(xì)胞、RCC23細(xì)胞 PA-1 epithelioid cells人卵巢畸胎瘤細(xì)胞系 HEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSA細(xì)胞、MPP 89細(xì)胞、MDAMB175VII細(xì)胞 578T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME1細(xì)胞、MES 23.5細(xì)胞、HT 29細(xì)胞 HCC-2218細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WRL 68細(xì)胞、SCC4細(xì)胞、RT-BM 1細(xì)胞 HEK-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTPA細(xì)胞、VAESBJ細(xì)胞、NCIH747細(xì)胞 PANC 327細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepG2/C3A細(xì)胞、PC-3M IE8細(xì)胞、2E8細(xì)胞 COV 434細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK/EBNA細(xì)胞、SKNBE2C細(xì)胞、HT1197細(xì)胞 COV 434細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK/EBNA細(xì)胞、SKNBE2C細(xì)胞、HT1197細(xì)胞 Pa17C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-345細(xì)胞、2B4-L細(xì)胞、HT 1197.T細(xì)胞 Daudi細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 837細(xì)胞、SK-Mel 1細(xì)胞、NKM1細(xì)胞 PaTu-8988s細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:8305-C細(xì)胞、EBC-1/original細(xì)胞、SCC154細(xì)胞 HCT GEO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ISHI細(xì)胞、Rainbow Trout Embryo細(xì)胞、T_T_細(xì)胞 MAVER1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-761細(xì)胞、HuNS1細(xì)胞、FF-WT-BJ細(xì)胞 C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSF細(xì)胞、SW-962細(xì)胞、NSC-34細(xì)胞 Panc-3_27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WiDr細(xì)胞、SUIT 2細(xì)胞、PC3M-2B4細(xì)胞 LTEP-sm 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono-Mac-6細(xì)胞、UPCI-SCC-090細(xì)胞、SNU-475細(xì)胞 HCC1569細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC57細(xì)胞、UPCI-SCC-154細(xì)胞、SU86-86細(xì)胞 ChaGo-K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-118 MG細(xì)胞、MDA-330細(xì)胞、alpha TC1.6細(xì)胞 WEHI 164 TC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs683T細(xì)胞、OVCA 432細(xì)胞、MARC 145細(xì)胞 UMC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryo Kidney-2細(xì)胞、TSCCa細(xì)胞、SNU-620細(xì)胞 MES-SA-Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-39細(xì)胞、3T3細(xì)胞、38C13細(xì)胞 Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs729T細(xì)胞、BMU-S1細(xì)胞、Rca-B細(xì)胞 B-95-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-cell細(xì)胞、CAMA細(xì)胞、KTC-1細(xì)胞 MFD-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAPC-4細(xì)胞、JHH-7細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞 Hep 3B2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JKT-1細(xì)胞、CCD-841-CoN細(xì)胞、769-P細(xì)胞 DMS 53細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-CEM C7細(xì)胞、VB細(xì)胞、Eca 109細(xì)胞 HCC-1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCaBER細(xì)胞、MOLP8細(xì)胞、HO1-N1細(xì)胞 Earle's L cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGECs細(xì)胞、NCI-SNU-620細(xì)胞、JHH7細(xì)胞 Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GH3細(xì)胞、DrG細(xì)胞、Hs 819.T細(xì)胞 NCIH1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FET細(xì)胞、RGM-1細(xì)胞、MILE SVEN1細(xì)胞 T47D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR-42J細(xì)胞、Hs895T細(xì)胞、Hs888T細(xì)胞 Calu 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN6細(xì)胞、H220細(xì)胞、K299細(xì)胞 Kato-III細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos 1細(xì)胞、Mel-RM細(xì)胞、ME180細(xì)胞 H-1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A431/P細(xì)胞、SC1細(xì)胞、LTEP-sm細(xì)胞 BNL-HCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker 256細(xì)胞、Vero細(xì)胞、QGY細(xì)胞 NS20Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA-782細(xì)胞、bEnd.3[BEND3]細(xì)胞、Mc Coy細(xì)胞 MMQ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞、PANC0504細(xì)胞、EBTr (NBL-4)細(xì)胞 CCD-841CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fao細(xì)胞、NuTu 19細(xì)胞、UPCI-SCC-090細(xì)胞 130T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 132細(xì)胞、HuPT4細(xì)胞、F81細(xì)胞 130T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 132細(xì)胞、HuPT4細(xì)胞、F81細(xì)胞 GM00346B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ReNcell CX細(xì)胞、RCC10 RGB細(xì)胞、TR-146細(xì)胞 MDA1386細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-549細(xì)胞、CEM/C1細(xì)胞、MN-60細(xì)胞 MDAMB134VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R2C細(xì)胞、HCC0015細(xì)胞、RPMI 1846細(xì)胞 PA I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637H細(xì)胞、P3J.HR1K細(xì)胞、EU-2細(xì)胞 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