"A-498 epithelioid cells人腎癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細(xì)胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
CHL-CL-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AE1201細(xì)胞、H-2228細(xì)胞、H125細(xì)胞
4-1st細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞、HL 60細(xì)胞、NCI H548細(xì)胞
H676細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC38細(xì)胞、SKMES-1細(xì)胞、BC-025細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
A-498 epithelioid cells人腎癌細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前，細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細(xì)胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細(xì)胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細(xì)胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存：計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細(xì)胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存：使用分離試劑從基層分離細(xì)胞，分離時盡可能溫和，使對細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細(xì)胞，確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細(xì)胞/ml密度，在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
RL-952細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16細(xì)胞、BEND細(xì)胞、TE3A細(xì)胞
QGY-7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT 93細(xì)胞、CAL 12T細(xì)胞、U20S細(xì)胞
NH-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE-2細(xì)胞、HS0578T細(xì)胞、SK-MES1細(xì)胞
HCC-1937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBMEC細(xì)胞、OE21細(xì)胞、MDAMB330細(xì)胞
SN12CPM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV40-HCEC細(xì)胞、COLO 320HSR細(xì)胞、Hs-274-T細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
A-498 epithelioid cells人腎癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
Hs604T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSCCa細(xì)胞、P3X63細(xì)胞、GA-10 clone 4細(xì)胞
NUGC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRC-RCZ細(xì)胞、SU-DHL6細(xì)胞、16-HBEo細(xì)胞
Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa S-3細(xì)胞、RPMI-8402細(xì)胞、G-Olig2細(xì)胞
LIXC-002細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B4G12細(xì)胞、MRC9細(xì)胞、M059J細(xì)胞
SKMEL-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOMO1細(xì)胞、EST81細(xì)胞、b.End3細(xì)胞
HBL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U2-OS細(xì)胞、VSMC細(xì)胞、D324細(xì)胞
SNU869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞、MNNG/HOS細(xì)胞、A2780CP70細(xì)胞
LA795細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero from pool #76細(xì)胞、HLF-a細(xì)胞、OVCAR-5細(xì)胞
HEY-A8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1395細(xì)胞、SNU520細(xì)胞、CHO cell clone K1細(xì)胞
NCIH378細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320-DM細(xì)胞、COS-7細(xì)胞、EC9706細(xì)胞
A-498 epithelioid cells人腎癌細(xì)胞系
NCIH1838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：High Five細(xì)胞、A-20細(xì)胞、RMS 1598細(xì)胞
CHL-IU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU-812-F細(xì)胞、SK-BR3細(xì)胞、QGY-7703細(xì)胞
CORL279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MILE SVEN1細(xì)胞、SR細(xì)胞、U87 MG細(xì)胞
SR786細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOR-10細(xì)胞、NCIH1944細(xì)胞、639-V細(xì)胞
HCC38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2171細(xì)胞、Hs 766.T細(xì)胞、MGC803細(xì)胞
Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA87-1細(xì)胞、Porcine Kidney-15細(xì)胞、IPLB-SF-21細(xì)胞
Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA87-1細(xì)胞、Porcine Kidney-15細(xì)胞、IPLB-SF-21細(xì)胞
PLC-8024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：aTC1-6細(xì)胞、BT-B細(xì)胞、AMC-HN8細(xì)胞
HEK293-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNMC細(xì)胞、OCI AML4細(xì)胞、U87MG細(xì)胞
H-676B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCCLM3細(xì)胞、MN-9D細(xì)胞、NT2-D1細(xì)胞
LN-382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：W256細(xì)胞、SVGp12細(xì)胞、U-266細(xì)胞
Panc203細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCH細(xì)胞、HCASMC細(xì)胞、Human podocyte細(xì)胞
H-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1648細(xì)胞、NALM6細(xì)胞、H4IIE細(xì)胞
MEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-I細(xì)胞、HCC-2935細(xì)胞、NCI-H889細(xì)胞
H1650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2171細(xì)胞、PLB-985細(xì)胞、HCCLM6細(xì)胞
MCF-7/AdrR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI no 8226細(xì)胞、NCIH28細(xì)胞、HBE135-E6E7細(xì)胞
Hs 683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RDES細(xì)胞、Hs606細(xì)胞、HuH-6細(xì)胞
RKOE6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 190PT細(xì)胞、BCECs細(xì)胞、BC-3-H-I細(xì)胞
MonoMac 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231-luc細(xì)胞、LA795細(xì)胞、AMC-HN-8細(xì)胞
SU-DHL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH8994細(xì)胞、NPC-TW 01細(xì)胞、H184A1細(xì)胞
Hs 888.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT細(xì)胞、PL12細(xì)胞、P3J細(xì)胞
SU-DHL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SL-1細(xì)胞、H2227細(xì)胞、B-CPAP細(xì)胞
NCIH2052細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G361mel細(xì)胞、A10細(xì)胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞
COLO-679細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-6細(xì)胞、H283細(xì)胞、3T3-442A細(xì)胞
LI7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BxPC-3細(xì)胞、3T3 J2細(xì)胞、T173細(xì)胞
210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C32 [Human melanoma]細(xì)胞、QSG-7701細(xì)胞、NCIH650細(xì)胞
BDCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML2細(xì)胞、Plaepi 34細(xì)胞、SUIT-2細(xì)胞
HS 1.Tes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCFs細(xì)胞、NCI-747細(xì)胞、NCI-H-69細(xì)胞
Kit225-K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H358細(xì)胞、Okayama University Medical School-27細(xì)胞、HeLa.S3細(xì)胞
NCI-H1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1618細(xì)胞、COLO-1細(xì)胞、T 24細(xì)胞
HEK 293 c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBEpiC細(xì)胞、OVCAR 420細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞
LA 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T/G HA-VSMC細(xì)胞、Fao細(xì)胞、BC3H-1細(xì)胞
Colo-201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92 MI細(xì)胞、BEL 7404細(xì)胞、Ha Fe細(xì)胞
H1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-14細(xì)胞、QGY7703細(xì)胞、NE1-E6E7細(xì)胞
SW1783細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-GEO細(xì)胞、HuH-1細(xì)胞、LNCaP-C4-2細(xì)胞
SK-BR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS11細(xì)胞、CAMA-1細(xì)胞、OVCAR 432細(xì)胞
ACC-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF10-A細(xì)胞、NFS60細(xì)胞、HN13細(xì)胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-869細(xì)胞、SK-Col-1細(xì)胞、D341細(xì)胞
RT4-D6-P2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI.1細(xì)胞、H-2196細(xì)胞、AR-42J細(xì)胞
HCC70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1819細(xì)胞、KHYG-1細(xì)胞、MCF-10 Attached細(xì)胞
686LN-M4e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-2細(xì)胞、Dx5細(xì)胞、786-O RCC細(xì)胞
TGW-I-nu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOK細(xì)胞、N1E-115細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞
NUGC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEpiC細(xì)胞、IGROV-1細(xì)胞、TGW-nu-1細(xì)胞
SKNMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU812-F細(xì)胞、BC-028細(xì)胞、CAL 39細(xì)胞
SK-MEL-2-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VE細(xì)胞、CORL105細(xì)胞、B16-F10細(xì)胞
SVGp12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2066細(xì)胞、SW-1573細(xì)胞、TE354T細(xì)胞
HPAEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon-38細(xì)胞、IMR-90細(xì)胞、hRPTC細(xì)胞
M-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCCC9810細(xì)胞、CAL148細(xì)胞、MUVEC細(xì)胞
Scott and White No. 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H735細(xì)胞、MCF-7ADR細(xì)胞、NCIH740細(xì)胞
A375SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PBMC細(xì)胞、MKN-7細(xì)胞、SLMT1細(xì)胞
HUVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1436細(xì)胞、H2081細(xì)胞、SKMEL-1細(xì)胞
A-498 epithelioid cells人腎癌細(xì)胞系
SK-BR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-74細(xì)胞、DMS-114細(xì)胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞
NCIH1623細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC5細(xì)胞、NCI-H1238細(xì)胞、NCIH1836細(xì)胞
HNE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RINm5F細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞、NS-1-Ag4-1細(xì)胞
Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa S-3細(xì)胞、NIH-OVCAR-3細(xì)胞、Ly10細(xì)胞
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