"PY8119 epithelioid cells小鼠乳腺癌細胞系
細胞背景資料:乳腺癌;雌性;C57BL/6
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。
H-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2 CL8細胞、ZR751細胞、NCI-H661細胞
RSC 96細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ej138細胞、SKMEL-31細胞、IEC 18細胞
U87 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F56 [Human neoplasm]細胞、Chinese Hamster Lung細胞、NCI-H929細胞
細胞生長:貼壁
PY8119 epithelioid cells小鼠乳腺癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
Mo 59J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10 clone 4細胞、HuTu 80細胞、Ca759細胞
NCM356細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK II細胞、REC1細胞、AK細胞
KM-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T8細胞、MZCRC1細胞、U-251 MG細胞
K562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM52細胞、LWnt-3A細胞、EO771細胞
HSC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1105細胞、mIMCD-3細胞、NSH細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
PY8119 epithelioid cells小鼠乳腺癌細胞系
細胞生長特性:貼壁
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
TE354T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2008細胞、RPMI6666細胞、PANC 813細胞
SW837細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC 5細胞、293AD細胞、EBC-1細胞
Hs68細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 114細胞、OCI-LY-1細胞、M21細胞
Neuro 2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A10細胞、HCC-95細胞、OLN 93細胞
Hs888 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE-4C細胞、NTERA-2 cl.D1細胞、Ca9-22細胞
GM3570細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-729細胞、OCILY10細胞、GM02132細胞
Hi5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JC細胞、SKCO1細胞、CEMx721.174.T2細胞
MPP89細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNEpC細胞、MBdSMC細胞、KS-SLK細胞
INS1E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC1B細胞、KTCTL140細胞、HEK 293T/17細胞
HSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 H細胞、HOP 62細胞、WI-38細胞
PY8119 epithelioid cells小鼠乳腺癌細胞系
PC3M-2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO684細胞、Tu 212細胞、G361-mel細胞
OCI-Ly3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8166細胞、WERI-Rb-1細胞、PLA801D細胞
T-CAM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-52PE細胞、Clone Y1細胞、H1993細胞
KYSE-510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR432細胞、KE37細胞、B78細胞
GM00215A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOSEpiC細胞、H2122細胞、GM02219D細胞
BrCL12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM2-4175細胞、HM06.A1細胞、EOL1細胞
BrCL12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM2-4175細胞、HM06.A1細胞、EOL1細胞
KYSE 450細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Med 283細胞、WM239細胞、SNU354細胞
MOLT-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL92.1.7細胞、RGC-5細胞、SNU668細胞
MARC145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRH-0201細胞、IPLB-SF-21-AE細胞、HCC2157細胞
NCI-H676細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKN-SH細胞、OCILY-3細胞、BC-027細胞
DHBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW900細胞、Suzhou Human Glioma-44細胞、Hep 3B2_1-7細胞
HEK-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos 2G6.4C10細胞、OCI-Ly19細胞、NPA'87細胞
SJ-RH30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-7細胞、ZR75-1細胞、HFB細胞
SACC-83細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM-TK-細胞、SGC996細胞、HCC-38細胞
RMG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE-280細胞、NCI-H2110細胞、H82sclc細胞
NP69SV40T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3E1細胞、HOEC細胞、MGHU1細胞
GC-1 spg細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H3255細胞、CHL-CL-11細胞、NMC-G1細胞
SW900細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H510細胞、HCA7細胞、BxPC-3細胞
R.K.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134-VI細胞、Microbiological Associates-104細胞、OCI AML5細胞
A 2058細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE2C細胞、G-292, clone A141B1細胞、LS 174 T細胞
HCC0038細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-373MG細胞、Hs688(A)T細胞、J-774細胞
RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 266-4細胞、H-2195細胞、CCD-112 CoN細胞
PBMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:kms 11細胞、LLC-MK-2細胞、526-mel細胞
EST81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1954細胞、WB-F344細胞、OVCAR.3細胞
A-704細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM C7細胞、HCV29細胞、NCI-H676B細胞
SKNF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HAC-84細胞、SNU638細胞、AtT-20細胞
KPL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-940-T細胞、C2BBe1細胞、MV 3細胞
LAD-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293FT細胞、PLC-PRF-5細胞、TB1 Lu細胞
MDAMB-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KTCTL140細胞、SUM 149PT細胞、PC3-M細胞
H1618細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-12細胞、TCMK-1細胞、H810細胞
BCPAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCCIT細胞、X63-AG 8.653細胞、COLO-357細胞
HCV 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly19細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、OSRC2細胞
TE32細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH-3T3細胞、LC1-Sq細胞、MDA-MB-415細胞
MGHU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM2664細胞、MDA-MB-415細胞、RC-K8細胞
ABE8.1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bovine ENDometrial cells細胞、RC-K8細胞、FL 62891細胞
PC-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 982細胞、DV90細胞、C33A細胞
Panc 3.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774細胞、P3JHR-1細胞、HS852.T細胞
DHL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTHY-ORI3.1細胞、Panc-813細胞、H2110細胞
8305-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CDC/EU.HMEC-1細胞、TGHAVSMC細胞、MCF12F細胞
KP 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Saos2細胞、D341Med細胞、CCD 19Lu細胞
OVCAR-432細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE細胞、SKMEL24細胞、Human Embryonic Kidney 293細胞
HCA 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-292細胞、GC1-SPG細胞、AR4-IP細胞
hOMF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nthy ori 3.1細胞、JM-1細胞、OV 2008細胞
Rca-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GT39細胞、MDA-MB 231細胞、NCI-H1792細胞
CCRF-CEM C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIMEC細胞、FaDu細胞、HCT-GEO細胞
H-EMC-SS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC-40細胞、HS 683T細胞、U-373 MG細胞
HMO6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG 108-15細胞、CNE2Z細胞、H-378細胞
ARO81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12C細胞、Y3-Ag1,2,3細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞
SK Hep1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-324MED細胞、Murine Lung Epithelial-12細胞、CCD841CoTr細胞
Bowes melanoma cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1187細胞、Panc327細胞、QGY-7701細胞
PY8119 epithelioid cells小鼠乳腺癌細胞系
C33-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly03細胞、A-498細胞、NGP細胞
SKCO 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE32細胞、SK UT 1細胞、Cloudman M3細胞
H2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7細胞、HIEC6細胞、National Medical Center-Glioma 1細胞
HS688AT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OPM2細胞、CV-1 in Origin Simian-1細胞、P30/0HK細胞
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