"SO-RB50 epithelioid cells人視網(wǎng)膜母細胞瘤細胞系
細胞背景資料:視網(wǎng)膜母細胞瘤;女性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
UO31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHH-CALL-2細胞、MV-4:11細胞、293 HEK細胞
293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI/ADRRES細胞、SKNAS細胞、Vero E-6細胞
SK-N-BE(1)n細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSC34細胞、H-2023細胞、EAHY-926細胞
細胞生長:貼壁
SO-RB50 epithelioid cells人視網(wǎng)膜母細胞瘤細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
FLS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs68細胞、PC10細胞、SNU484細胞
HFLS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC11細胞、HCC-9204細胞、HEM細胞
H-1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV 1063細胞、ZR75_1細胞、C-Lu65細胞
HCGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC3H-1細胞、PG-BE1細胞、OCUM-1細胞
NCIH747細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel 1細胞、RFL-6細胞、U266BL細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SO-RB50 epithelioid cells人視網(wǎng)膜母細胞瘤細胞系
細胞生長特性:懸浮
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復(fù)蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認(rèn)為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
TM4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UC-3細胞、CWR22R-V1細胞、TE-11細胞
CHL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-03.27細胞、MALME.3M細胞、SUDHL-8細胞
THLE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:7860細胞、SCC90細胞、SNK-6細胞
brain-derived Endothelial cells.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NH-6細胞、RPMI 7951細胞、OCI-Ly 3細胞
SUDHL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-1 spg細胞、ZR7530細胞、Huh 7.5.1細胞
OVCAR 432細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME16C細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞、HEI193細胞
HuPT4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-38細胞、Loucy細胞、SJSA1細胞
JHH-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03671細胞、Hs_578t細胞、HBE 135-E6E7細胞
T241細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JeKo 1細胞、VMCUB1細胞、MRC5細胞
CT 26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI/ADR-RES細胞、CMT 64細胞、GM-346細胞
SO-RB50 epithelioid cells人視網(wǎng)膜母細胞瘤細胞系
LN 382細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-FI細胞、T98G細胞、HuNS1細胞
GS9L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse INsulinoma 6細胞、RAMOS2G64C10細胞、RGE細胞
KYSE 140細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU19-19細胞、SG231細胞、LC1/Sq細胞
PTK 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Medical Research Council cell strain-9細胞、SKRC-42細胞、SHI-1細胞
PLC/PRF/5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos.G6.C10細胞、HEY A8細胞、OS-RC-2細胞
KBM5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMM-1細胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞、NW38細胞
DMS79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL-1細胞、SK MES 1細胞、BGC-823細胞
NCI-H165細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H69C細胞、MC-4細胞、HPF細胞
Hep 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RA細胞、HEK 293FT細胞、HOSEpiC細胞
MUS-M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE-37細胞、PCI-4M細胞、BNCL2細胞
HPAF-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM.12細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞、Hs 832(C).T細胞
OVCAR433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL/FU細胞、HBZY-1細胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞
M-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEEpiC細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞、RPMI7951細胞
CAL12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L6細胞、SEG1細胞、NCI H747細胞
MCF 7B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J-111細胞、CCD 1112SK細胞、Hep 2細胞
MUGCHOR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:no.11細胞、HCCC-9810細胞、WIL2S細胞
NCI-H1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC26細胞、H2030細胞、D-283 Med細胞
PY8119細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-165細胞、LN382細胞、BC-022細胞
L5178Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Transformed Human Liver Epithelial-3細胞、J774.A1細胞、PL-5細胞
H-1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1289細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞
CTSC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFF細胞、Nb2-11細胞、SU-DHL-5細胞
Hs819T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-766-T細胞、U2OS細胞、INS1-E細胞
CL1.0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L 105細胞、M14-MEL細胞、MMAc-Serum Free細胞
BRL3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-164細胞、NTera-2D1細胞、COLO-205細胞
SW837細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC 5細胞、293AD細胞、EBC-1細胞
OVCAR 420細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 02.03細胞、GM01232細胞、Hs675T細胞
MLFC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Carcinoma-38細胞、Karpas422細胞、MM1細胞
KP4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS653細胞、F9細胞、VP229細胞
LAPC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSA Dx5細胞、COR-L51細胞、B95.8細胞
NCI-SNU-398細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-9細胞、MDA 231-LM2-4175細胞、SNU423細胞
HLEB3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:McA-RH 7777細胞、2780CP細胞、NRK-52E細胞
Hs 578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-AS細胞、F98細胞、WM 239-A細胞
MA-c細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H69/P細胞、UMUC-3細胞、Alexander cells細胞
H-2110細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC 786-O細胞、Hs-729-T細胞、WC00079細胞
SW1271細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT325細胞、P3X63 AG8-653細胞、3T3L1細胞
NCIH2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Large Cell Lung Cancer-103H細胞、BJAB-1細胞、MESSA-DX5細胞
OCI/AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hRMECs細胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細胞、PC.3細胞
H-2107細胞系相關(guān)產(chǎn)品:rUCMSCs細胞、HDQP1細胞、H-1688細胞
NIH:OVCAR-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori:3細胞、HLE-B3細胞、ECC-1細胞
HRVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCK-81細胞、COLO_320DM細胞、L-6細胞
MGH-U3 (RN)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63Ag8細胞、MCF-10 Attached細胞、BV-173細胞
SF17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2157細胞、OCI-Ly3細胞、SK-N-BE-2細胞
B16 melanoma F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH69細胞、OKT3細胞、EFO-27細胞
SK Mel 24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Earle's L cells細胞、SNK-6細胞、Mono Mac 6細胞
Normal Rat Kidney-49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-172MG細胞、Tu177細胞、HCC-1419細胞
OCI AML5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1693細胞、Hs-688A-T細胞、X63Ag8.653細胞
Panc2_03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1836細胞、D 407細胞、UCLA SO M21細胞
YD-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ketr3細胞、NSC34細胞、Panc-10.05細胞
McArdle RH-7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WB F344細胞、786.O細胞、OVCAR-420細胞
RBL2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:b.End3細胞、NCTC 929細胞、NCI-SNU-449細胞
COLO320HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2110細胞、SuDHL 4細胞、H2073細胞
SO-RB50 epithelioid cells人視網(wǎng)膜母細胞瘤細胞系
EL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHDF細胞、16HBE14o-細胞、MHCC-97細胞
PFSK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GT38細胞、H-345細胞、CHL細胞
B-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-738細胞、624-mel細胞、ES-2細胞
THLE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:7860細胞、Fox/NY細胞、UPCI-SCC090細胞
"