"Co-115 epithelioid cells人結腸腺癌細胞系
細胞背景資料：結腸腺癌；女性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉速和時間，轉的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候對一般細胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
MDA-MB436細胞系相關產品：LA-795細胞、X63Ag8.653細胞、Colon 38細胞
CL 1-0細胞系相關產品：HFT-8810細胞、U373-MG細胞、NCI-H292細胞
NIH3T3細胞系相關產品：MGH-U1細胞、266 Bl細胞、TE-4細胞
細胞生長：貼壁
Co-115 epithelioid cells人結腸腺癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞復蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴，浸入了液氮，取出后因安剖內液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應帶有防護眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細胞懸液，裝入離心管中，再補加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉/分）５分鐘，取上清后再重復用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細胞時，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即通知細胞實驗室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細胞回溫至３７°C，并讓運送過程中少數脫落的細胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內取出flask內之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內，依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中，或細胞已長滿盤，則將細胞做傳代培養(yǎng)。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Hs895.T細胞系相關產品：BMU-S1細胞、D10細胞、H1395細胞
DU_145細胞系相關產品：ETCC-007細胞、FT-293細胞、RCC 7860細胞
BN-CL2細胞系相關產品：SW-1271細胞、OCI/AML-4細胞、Calu-3細胞
H-345細胞系相關產品：V79細胞、X63.Ag8.653細胞、MDA-PCa-2b細胞
Swiss 3T3細胞系相關產品：JROECL 19細胞、624細胞、HNE2細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
Co-115 epithelioid cells人結腸腺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數，傳相應數目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
PK15細胞系相關產品：WM 2664細胞、HEC151細胞、Mel RM細胞
293H細胞系相關產品：SMC-1細胞、HEK (AD293)細胞、MSB-1細胞
NCI-HUT-292細胞系相關產品：NCIH2291細胞、H322T細胞、SUDHL4細胞
SK-RC-52細胞系相關產品：SC細胞、H4IIE細胞、HT 1080.T細胞
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REC細胞系相關產品：JROECL21細胞、SUD6細胞、C4-2B細胞
DITNC1細胞系相關產品：GES-1細胞、LU165細胞、HEK-AD293細胞
COR-L23細胞系相關產品：CF Pac1細胞、J774A1細胞、NFS 60細胞
Jeko1細胞系相關產品：Mel-RM細胞、MMVECs細胞、ChaGo-K1細胞
BL1339細胞系相關產品：L363細胞、OVISE細胞、H-358細胞
3D4/21細胞系相關產品：32D CL3細胞、MNNG/HOS Cl #5細胞、TFH細胞
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L428細胞系相關產品：Roswell Park Memorial Institute 2650細胞、MCF-7/AdrR細胞、H82細胞
HNTEC細胞系相關產品：MES-SA細胞、NRK clone 52E細胞、MCM細胞
WIL2S細胞系相關產品：TGW細胞、HOC細胞、SF-539細胞
Pfeiffer細胞系相關產品：L-Wnt-3A細胞、OCILY7細胞、MFHL-2細胞
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CWR22R細胞系相關產品：EAhy926細胞、A72細胞、SK_N_BE2C細胞
KTC1細胞系相關產品：VMM39細胞、3T3 Swiss Albino細胞、HCC-94細胞
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PLA-801D細胞系相關產品：THP1細胞、PMVEC細胞、NCIH64細胞
SW-837細胞系相關產品：P3HR-1細胞、WM451Lu細胞、TCam-2細胞
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H209細胞系相關產品：HN6細胞、SKHEP1細胞、SPCA1細胞
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MDAPCa-2b細胞系相關產品：TOV-112D細胞、U-373MG細胞、HS-683細胞
JG細胞系相關產品：SCC9細胞、High5細胞、MFE-296細胞
H-2023細胞系相關產品：Kelly細胞、NCI-H102細胞、Reh細胞
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GM0637細胞系相關產品：SUM149細胞、TOV112D細胞、Leukemic 1210細胞
RA.1細胞系相關產品：TT細胞、H-1092細胞、COLO 680N細胞
NTHY-ORI3.1細胞系相關產品：hEEC細胞、Mv1Lu細胞、HMy2.CIR細胞
FaDu細胞系相關產品：Farage細胞、D-407細胞、SK-MES-1細胞
MCF10A細胞系相關產品：NCI-H647細胞、GP5d細胞、CV-1.K細胞
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H358細胞系相關產品：P3/NS1/1-Ag4.1細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、ACC-2細胞
NR8383細胞系相關產品：HAPI細胞、WM 451-Lu細胞、HEK293細胞
Co-115 epithelioid cells人結腸腺癌細胞系
SPC-A-1細胞系相關產品：CEM.C1細胞、BC-024細胞、751細胞
BrCL15細胞系相關產品：Hep II細胞、McG-1細胞、UCLA NPA871細胞
NU-GC-4細胞系相關產品：TK-1細胞、KYSE0030細胞、NBL-1細胞
NCI-HUT-292細胞系相關產品：NCIH2291細胞、HS-766-T細胞、BEL/FU細胞
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