"NCI-H2141 Adherent人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,總是會(huì)出現(xiàn)各種意想不到的問(wèn)題,一不留神就會(huì)全盤(pán)皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍,我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法,希望對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助:1)觀察細(xì)胞狀態(tài):貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%,即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏,拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài);2)細(xì)胞清洗:培養(yǎng)皿表面消毒后,轉(zhuǎn)移至生物安全柜中,去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液,加入12mlPBS,輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞,隨后吸除PBS清洗液;3)細(xì)胞消化:將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中,完全覆蓋細(xì)胞,置于顯微鏡下觀察(期間禁止搖晃培養(yǎng)皿),當(dāng)細(xì)胞剛開(kāi)始脫落時(shí),立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中,除去大部分胰酶,剩余約0.5ml胰酶,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化,每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài),至細(xì)胞成流沙狀完全脫落,轉(zhuǎn)移至生物安全柜中,加入12ml完全培養(yǎng)基,終止消化;4)細(xì)胞離心:將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻,吸取至15ml離心管中,1000r/min(110g),離心3min;5)細(xì)胞凍存:離心后去除細(xì)胞上清液,按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml,吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀,吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中,進(jìn)行凍存;6)細(xì)胞保藏:凍存管做好標(biāo)記,放至程序降溫盒中,于4℃冰箱放置30min,轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過(guò)夜,將過(guò)夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
NCI-H2141 Adherent人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
常規(guī)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)(增殖,凋亡,遷移,分化之類(lèi)的),受消化影響不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用潤(rùn)洗的方法消化的話(難消化細(xì)胞例外)。但少數(shù)實(shí)驗(yàn),比如病毒包裝,對(duì)細(xì)胞代數(shù),對(duì)細(xì)胞狀態(tài)要求極高。這個(gè)時(shí)候,胰酶消化,就是潤(rùn)洗,都會(huì)對(duì)細(xì)胞包裝病毒的能力有影響,傳代次數(shù)一多,細(xì)胞包裝能力就會(huì)逐漸下降(當(dāng)然也有其它因素影響包裝效率)。這個(gè)時(shí)候都不用胰酶消化,用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過(guò)影響ECM相關(guān)酶的活性,來(lái)使得細(xì)胞脫離基質(zhì)附著表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。許多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白,trypsin切割ECM的一些負(fù)責(zé)粘連和附著的蛋白,而EDTA通過(guò)螯合Ca離子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者對(duì)付特別難消化的細(xì)胞,添加多一些EDTA,就是這個(gè)道理。一般不要試圖延長(zhǎng)消化時(shí)間(如果10min還消化不徹底的話),而應(yīng)該想其它辦法;PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌,是常見(jiàn)的操作,因?yàn)镾erum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問(wèn)可以講,對(duì)于一些難消化細(xì)胞,那么可以配制不含Ca,Mg離子的PBS,因?yàn)檫@些離子也會(huì)抑制trypsin的活性。但對(duì)于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤(rùn)洗即可消化的細(xì)胞,不需要配制如此溶液。
CCD 966SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MS 751細(xì)胞、DHL8細(xì)胞、TGBC11TKB細(xì)胞
MN-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wien133細(xì)胞、H-838細(xì)胞、HCC1599細(xì)胞
KYSE-510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR432細(xì)胞、KE37細(xì)胞、B78細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:3-4天換液1次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
MOLP8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341MD細(xì)胞、LX-2細(xì)胞、McCoy B細(xì)胞
HBMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP clone FGC細(xì)胞、U-266 AR1細(xì)胞、LS-174T細(xì)胞
HCC-1500細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMES1細(xì)胞、Nb-2細(xì)胞、SW-1783細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng)
NCI-H2141 Adherent人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:聚團(tuán)懸浮
養(yǎng)了幾年細(xì)胞,說(shuō)一點(diǎn)自己培養(yǎng)細(xì)胞方面的看法:1)培養(yǎng)細(xì)胞前,可以看看細(xì)胞特點(diǎn)說(shuō)明書(shū),包括細(xì)胞正常生長(zhǎng)的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類(lèi)型等;2)不同細(xì)胞生長(zhǎng)周期不同,有的生長(zhǎng)很快,比如說(shuō)MDA-MB-231,傳代的時(shí)候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了,有的又是特別慢,等的人心焦,BT474就是,傳代是一分二,復(fù)蘇起始的時(shí)候兩周多才能長(zhǎng)滿(mǎn),所以就要在培養(yǎng)細(xì)胞的過(guò)程中多多摸索了;3)對(duì)于嬌弱的細(xì)胞,就得細(xì)心呵護(hù)了,胰酶消化不能過(guò)久,吹得時(shí)候要輕柔,離心時(shí)候也要注意轉(zhuǎn)速和時(shí)間,每天都要去看一下細(xì)胞,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況;4)凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基;5)培養(yǎng)箱隔一段時(shí)間徹底用酒精棉擦洗一次;6)養(yǎng)細(xì)胞的教訓(xùn):不能偷懶!細(xì)胞虐我千百遍,我待細(xì)胞如初戀。1)不管買(mǎi)的細(xì)胞、惠贈(zèng)的細(xì)胞,剛拿到手趕緊做兩件事:檢測(cè)是否有支原體污染; 迅速擴(kuò)增凍存;2)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉,特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時(shí); 細(xì)菌污染,真菌污染很容易發(fā)現(xiàn),支原體污染的話,細(xì)胞會(huì)長(zhǎng)的慢,買(mǎi)個(gè)支原體檢測(cè)的kit定期檢測(cè)一下;3)傳代細(xì)胞日常的值日清潔是必須的,此外還要定期熏蒸;4)細(xì)胞的傳代一定要規(guī)律,保持相同的confluency和傳代時(shí)間間隔,不要隨心所欲或者拖延;5)注意個(gè)人衛(wèi)生。
251 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2BS細(xì)胞、NCIH1618細(xì)胞、Hep G2/C3A細(xì)胞
Rainbow Trout Embryo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SupB15W細(xì)胞、BOWES細(xì)胞、TOG細(xì)胞
SUD-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHOK1細(xì)胞、H4-II-E-C3細(xì)胞、CHL-IU細(xì)胞
MMVECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE 280細(xì)胞、MOLT16細(xì)胞、JIMT1細(xì)胞
NCIH1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-125細(xì)胞、EB-2細(xì)胞、Soleus clone 8細(xì)胞
NCI.H522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4 (S+L-)細(xì)胞、GM03573A細(xì)胞、NS1-1 Ag4.1細(xì)胞
PC-3M 2B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE510細(xì)胞、Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細(xì)胞
EAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-373 MG細(xì)胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞、Swiss-3T3細(xì)胞
KYSE 450細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Med 283細(xì)胞、WM239細(xì)胞、SNU354細(xì)胞
HSC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61 5.3細(xì)胞、HLMVEC細(xì)胞、HT1376細(xì)胞
Hs 636.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFO-27細(xì)胞、HCC1428細(xì)胞、PAa細(xì)胞
SNUC2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 549細(xì)胞、Panc_02_03細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞
PK (15)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM07404D細(xì)胞、Hs-578T細(xì)胞、NCIH2286細(xì)胞
NCI-H2141 Adherent人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
EFM-192A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H524細(xì)胞、Anip 973細(xì)胞、Mv1Lu細(xì)胞
SK RC 52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC-10細(xì)胞、NCI-BL2141細(xì)胞、H-322細(xì)胞
PL-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA1細(xì)胞、RINm-5F細(xì)胞、B 95.8細(xì)胞
PL-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA1細(xì)胞、RINm-5F細(xì)胞、B 95.8細(xì)胞
Be-Wo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-022細(xì)胞、SIRC細(xì)胞、3T3(A31)細(xì)胞
HEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSA細(xì)胞、MPP 89細(xì)胞、MDAMB175VII細(xì)胞
SKNDZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:751-NA-15細(xì)胞、HCC366細(xì)胞、PFSK-1細(xì)胞
MC-116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SBC3細(xì)胞、NPA87-1細(xì)胞、H-510細(xì)胞
HIT clone T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NL20細(xì)胞、SVEC4-10細(xì)胞、NW-38細(xì)胞
UACC812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-719細(xì)胞、HAEC細(xì)胞、SW1990細(xì)胞
WEHI-3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Okayama University Medical School-23細(xì)胞、H1385細(xì)胞、GA-10-Clone-4細(xì)胞
639-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-TU-8988S細(xì)胞、CAL27細(xì)胞、NCI-H1435細(xì)胞
Hs706T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SR786細(xì)胞、JC細(xì)胞、Panc02細(xì)胞
PG-BE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1792細(xì)胞、SUPT-1細(xì)胞、H510A細(xì)胞
KAT5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori-3.1細(xì)胞、MHH-CALL2細(xì)胞、H-1404細(xì)胞
Colo320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC/PRF/5細(xì)胞、RBL-I細(xì)胞、TERT-RPE1細(xì)胞
NTERA2D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MARC145細(xì)胞、MGH-U3細(xì)胞、H2195細(xì)胞
EB-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1783細(xì)胞、SK-NM-C細(xì)胞、Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞
PIEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-SH-SY5Y細(xì)胞、GC-1 spg細(xì)胞、WiDr-TC細(xì)胞
J 82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RK-13細(xì)胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞、REC細(xì)胞
MDA468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QSG-7701細(xì)胞、FHs74Int細(xì)胞、HFSF細(xì)胞
KPNRTBM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D clone3細(xì)胞、H 9細(xì)胞、CP-70細(xì)胞
CAL39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-UT-1細(xì)胞、RBE細(xì)胞、BT-20細(xì)胞
T.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU5細(xì)胞、H1838細(xì)胞、KNS81細(xì)胞
HMCB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞、MDCKII-WT細(xì)胞、NPC-TW 01細(xì)胞
ME180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNT1-a細(xì)胞、L78細(xì)胞、Fetal Human Colon細(xì)胞
UWB1.289+BRCA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan 1細(xì)胞、MDA-MB-435細(xì)胞、SUM149細(xì)胞
RIN m5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2141細(xì)胞、ROS-17/2.8細(xì)胞、SF 295細(xì)胞
U-118MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK-15細(xì)胞、293EBNA細(xì)胞、HPDEC細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375SM細(xì)胞、RL-95-2細(xì)胞、IB-RS-2細(xì)胞
Hs 888Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos 2G6 4C10細(xì)胞、KP2細(xì)胞、KYSE70細(xì)胞
L-5178-Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone 929細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞、GM03569D細(xì)胞
EBTr (NBL-4)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep3B細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞、HHL5細(xì)胞
RPMI 1788細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca Ski細(xì)胞、BIU-87/Adr細(xì)胞、GM637A細(xì)胞
X63Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT144mel細(xì)胞、Leydig細(xì)胞、SW-962細(xì)胞
Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC-7901/DDP細(xì)胞、BAEC細(xì)胞、UPCI-SCC-154細(xì)胞
no.11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCE-2 [50.B1]細(xì)胞、THC-8307細(xì)胞、HCA-7細(xì)胞
PF382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRTL-5 Cl 2細(xì)胞、RWPE1細(xì)胞、PC 61 5.3細(xì)胞
GM0637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM149細(xì)胞、TOV112D細(xì)胞、Leukemic 1210細(xì)胞
SPC-A-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM.C1細(xì)胞、BC-024細(xì)胞、751細(xì)胞
Ketr-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C42細(xì)胞、CCD 966SK細(xì)胞、MES-SA/Dx5細(xì)胞
FDC-P1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT-93細(xì)胞、NCTC clone 929細(xì)胞、COLO 829細(xì)胞
NCI-H2141 Adherent人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
H345細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW039細(xì)胞、UMR106細(xì)胞、P3-X63-Ag8細(xì)胞
NB-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LYR細(xì)胞、HEM細(xì)胞、HEK-AD 293細(xì)胞
MONO-MAC 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2135細(xì)胞、P30/OHK細(xì)胞、EOC 20細(xì)胞
SNU1040細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE14o-細(xì)胞、PLA-801D細(xì)胞、RSC 96細(xì)胞
OVCAR8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC4細(xì)胞、SKRC-39細(xì)胞、Panc4.03細(xì)胞
3396細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 361細(xì)胞、Panc 05.04細(xì)胞、PC-3M-2B4細(xì)胞
BNL.CL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TFK-1細(xì)胞、MA-104細(xì)胞、NCIH244細(xì)胞
SCC090細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A673細(xì)胞、MOLM13細(xì)胞、Lewis Lung細(xì)胞
NCIH1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J45.01細(xì)胞、293 F細(xì)胞、Kasumi 1細(xì)胞
H-2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WILL-2細(xì)胞、HEK 293-H細(xì)胞、NCIH1993細(xì)胞
NUGC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRC-RCZ細(xì)胞、A549/DDP細(xì)胞、2008細(xì)胞
SUD-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHOK1細(xì)胞、P3-x63-Ag8 653細(xì)胞、Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞
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