"NCI-H211 Adherent人小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞培養(yǎng)時分布不均勻,通常操作步驟:做細胞生物學實驗,細胞鋪板大概是我們最常見的一個實驗。但有時候鋪得不是很均勻:要么中間密周圍稀,要么周圍密中間禿頂。下面為大家分享幾點經(jīng)驗。盡量消化細胞分散成單細胞懸液。對于易于消化的細胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶潤洗一遍(25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板),棄掉胰酶,37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右,鏡下觀察是否細胞消化較為分散。如果不夠,延長消化時間。96孔板一般以100微升每孔接種,直接用100微升移液器吸取細胞懸液,沿孔壁(稍離開一點孔底即可,不要離底太高)直接接入,移液器不需完全打到,輕輕按下即可,每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細胞懸液。都加完后蓋上蓋子,左手輕輕扶住板的左邊,右手輕輕敲擊板的右邊緣,注意把握力度(我一般輕巧敲三下),太強或次數(shù)太多會導致細胞集中成堆,將板順時針旋轉(逆時針效果不好),依次敲擊剩余三個邊,靜置約5分鐘,放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板,可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基,晃動浸潤整個孔底,然后用移液槍吸至第二孔,同樣方法浸潤孔底,其它孔依此類推,這樣整個孔底都是濕潤的,細胞懸液會平鋪在整個孔底,注意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點慢,但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式,但力度沒有96孔板好掌握,效果沒有96孔板好。培養(yǎng)瓶里面加好細胞以后(比如傳代好/分好細胞以后),先順時針搖晃3次,馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復延X軸Y軸分別水平搖動3次。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H211 Adherent人小細胞肺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
很多朋友討論細胞培養(yǎng)問題,見到很多很好的經(jīng)驗總結,這里說一些我個人的經(jīng)驗,因為一些比較特殊的原因,我自己培養(yǎng)接觸過近300種細胞,常用于做實驗的,累積有百余種,可以說遇到過許多各式各樣古怪的細胞。這里挑細胞消化開始做我的篇專題,并不是因為細胞消化最重要,而是近期看到大家頻繁討論這個話題,我就拋磚引玉,下面幾點拙見,可能與其它朋友總結的一些經(jīng)驗有點出入,僅供大家參考。許多同學對細胞消化做了許多研究,得出了很多有價值的經(jīng)驗,也見到很多人的困惑。其實細胞培養(yǎng),尤其是細胞系的培養(yǎng),就消化而言,不是太難,做得多了,善于總結經(jīng)驗,就能把細胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟,細節(jié)操作,我這里就不講了,只講一些基本操作背后的知識,如果不對之處,歡迎指正,總結下來,細胞培養(yǎng)中消化很重要,但其實消化并不是細胞培養(yǎng)的關鍵所在(雖然很重要),關鍵所在是細胞來源,血清質量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細胞遇到各種各樣的問題,很多時候bottleneck沒有找到,雖然通過其它方法有所改善,但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作,總覺得自己沒有經(jīng)驗,而忽視試劑,溶液尤其是細胞的質量,后者其實才是許多細胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。
RAMSCs細胞系相關產(chǎn)品:H920細胞、DHL-6細胞、A3細胞
HSC-3細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2081細胞、Nb2細胞、HUCEC細胞
TR 146細胞系相關產(chǎn)品:SW1222細胞、SNB19細胞、KM H-2細胞
細胞傳代方法:3-4天換液1次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
OCI-Ly03細胞系相關產(chǎn)品:L929細胞、A-253細胞、MC/9細胞
SW 1353細胞系相關產(chǎn)品:Hs 729.T細胞、WM266-4細胞、alphaTC clone 6細胞
RA 1細胞系相關產(chǎn)品:NCTC 1469細胞、A549 ATCC細胞、A-704細胞
細胞生長特性:懸浮生長
NCI-H211 Adherent人小細胞肺癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
養(yǎng)了幾年細胞,說一點自己培養(yǎng)細胞方面的看法:1)培養(yǎng)細胞前,可以看看細胞特點說明書,包括細胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等;2)不同細胞生長周期不同,有的生長很快,比如說MDA-MB-231,傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了,有的又是特別慢,等的人心焦,BT474就是,傳代是一分二,復蘇起始的時候兩周多才能長滿,所以就要在培養(yǎng)細胞的過程中多多摸索了;3)對于嬌弱的細胞,就得細心呵護了,胰酶消化不能過久,吹得時候要輕柔,離心時候也要注意轉速和時間,每天都要去看一下細胞,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細胞生長狀況;4)凍存細胞復蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基;5)培養(yǎng)箱隔一段時間徹底用酒精棉擦洗一次;6)養(yǎng)細胞的教訓:不能偷懶!細胞虐我千百遍,我待細胞如初戀。1)不管買的細胞、惠贈的細胞,剛拿到手趕緊做兩件事:檢測是否有支原體污染; 迅速擴增凍存;2)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉,特別是當你養(yǎng)了很多種細胞時; 細菌污染,真菌污染很容易發(fā)現(xiàn),支原體污染的話,細胞會長的慢,買個支原體檢測的kit定期檢測一下;3)傳代細胞日常的值日清潔是必須的,此外還要定期熏蒸;4)細胞的傳代一定要規(guī)律,保持相同的confluency和傳代時間間隔,不要隨心所欲或者拖延;5)注意個人衛(wèi)生。
RBMEC細胞系相關產(chǎn)品:mRTEC細胞、Hs 729細胞、Ramos(RA1)細胞
OSA細胞系相關產(chǎn)品:SHIN3細胞、SUDHL-4細胞、OCI-Ly07細胞
DoTc2-4510細胞系相關產(chǎn)品:MS-751細胞、RPMI no. 8226細胞、SG231細胞
P36細胞系相關產(chǎn)品:MGSMC細胞、NCIH2227細胞、NHDF細胞
H1666_DA細胞系相關產(chǎn)品:RK13細胞、NCI-SNU-387細胞、ARO細胞
A375S2細胞系相關產(chǎn)品:H1341細胞、PANC 1005細胞、PNT1-a細胞
HH [Human lymphoma]細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1184細胞、H-1882細胞、C2A細胞
Tu212細胞系相關產(chǎn)品:FOX-NY細胞、RT4P細胞、H-1436細胞
H2087細胞系相關產(chǎn)品:MIN6細胞、HCC0827細胞、CCD-33Co細胞
H2591細胞系相關產(chǎn)品:Hep G2-Luc細胞、SKOV-3細胞、CEMC7細胞
NCI-H3255細胞系相關產(chǎn)品:CATH-a細胞、C8166-CD4細胞、H-196細胞
H-889細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1930細胞、NS-I/1細胞、SCL-1細胞
H1650_CO細胞系相關產(chǎn)品:SNGM細胞、SW948細胞、H295R細胞
NCI-H211 Adherent人小細胞肺癌細胞系
H1672細胞系相關產(chǎn)品:MIHA細胞、H-1437細胞、HS-695T細胞
NCIH2107細胞系相關產(chǎn)品:H295R細胞、CD-18細胞、Hs 822.T細胞
HSC 3細胞系相關產(chǎn)品:P1-Raji細胞、YES2細胞、SNU368細胞
HSC 3細胞系相關產(chǎn)品:P1-Raji細胞、YES2細胞、SNU368細胞
Ku812細胞系相關產(chǎn)品:VK-2/E6E7細胞、HTh 74細胞、EFM192細胞
OCILY-3細胞系相關產(chǎn)品:Hs 888Lu細胞、Walker/LLC-WRC256細胞、P3X63 Ag8.653細胞
C-4I細胞系相關產(chǎn)品:BMF細胞、YH-13細胞、Pa18C細胞
HAVSMC細胞系相關產(chǎn)品:HCC95細胞、P3/NS1/1-Ag4-1細胞、Colon-38細胞
Centre Antoine Lacassagne-62細胞系相關產(chǎn)品:MESSA細胞、IHC-ST1細胞、CEM-CCRF (CAMR)細胞
Laboratory of Allergic Diseases 2細胞系相關產(chǎn)品:SU-DHL-1細胞、Hep 3B2_1-7細胞、GM-215細胞
mRTEC細胞系相關產(chǎn)品:MOLM-14細胞、MES13細胞、LL2細胞
HCC0827細胞系相關產(chǎn)品:RPMI-8402細胞、3 LL細胞、IBRS-2細胞
Hs-675-T細胞系相關產(chǎn)品:HO8910細胞、C4 I細胞、RPMI-8226S細胞
TE6細胞系相關產(chǎn)品:MEF細胞、Hs 274.T細胞、DLM8細胞
LICCF細胞系相關產(chǎn)品:Emory University-3細胞、DB細胞、EJ1細胞
Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞系相關產(chǎn)品:CHP-212細胞、Caco2BBe細胞、MDA330細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞系相關產(chǎn)品:MeWo細胞、HCC-9724細胞、H-520細胞
Hs 600.T細胞系相關產(chǎn)品:B 95.8細胞、SuDHL 1細胞、H1963細胞
Hs 695.T細胞系相關產(chǎn)品:HSC6細胞、IBRS-2細胞、CHL-11細胞
Cor L51細胞系相關產(chǎn)品:NU-GC-3細胞、8305C細胞、MeSoTheliOma-211H細胞
Panc 02.03細胞系相關產(chǎn)品:HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、VK2/E6E7細胞、CCD-841CoN細胞
J.E6-1細胞系相關產(chǎn)品:JROECL 33細胞、SU86_86細胞、18G3.cl 1細胞
MPVECs細胞系相關產(chǎn)品:WM 239A細胞、PL-9細胞、Hs819.T細胞
FRH-0201細胞系相關產(chǎn)品:LNCaP-Clone-FGC細胞、H-125細胞、SCLC-21H細胞
SP2/0 Ag-14細胞系相關產(chǎn)品:Cloudman S91 melanoma細胞、KTA7細胞、Psi-2-DAP細胞
Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞系相關產(chǎn)品:THP 1細胞、IGR-OV1細胞、BHK-21細胞
K562細胞系相關產(chǎn)品:SUM52細胞、LWnt-3A細胞、EO771細胞
Pa17C細胞系相關產(chǎn)品:H-345細胞、2B4-L細胞、HT 1197.T細胞
RCM1細胞系相關產(chǎn)品:J-82細胞、RMS 1598細胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細胞
SKNFI細胞系相關產(chǎn)品:Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞、NCI-H1155細胞、WBF344細胞
NCI H157細胞系相關產(chǎn)品:Hs-606-T細胞、HPAF/CD18細胞、KGN細胞
CCC-HSF-1細胞系相關產(chǎn)品:McArdle RH-7777細胞、UMNSAH-DF-1細胞、2780細胞
MZ-CRC-1細胞系相關產(chǎn)品:H2030細胞、KM933細胞、SUM 102細胞
OKa-C-1細胞系相關產(chǎn)品:RPMI-1788細胞、C33細胞、N-87細胞
NG 108-15細胞系相關產(chǎn)品:GM03569B細胞、MDA-MB-436細胞、A431細胞
H2591細胞系相關產(chǎn)品:Hep G2-Luc細胞、SKOV-3細胞、CEMC7細胞
CAL-12T細胞系相關產(chǎn)品:BEL-7404細胞、RF/6A細胞、NCI-HUT-292細胞
A253細胞系相關產(chǎn)品:RPE-hTERT細胞、ME16C細胞、LED-WiDr細胞
SUPM2細胞系相關產(chǎn)品:GM05887A細胞、JAR細胞、Tu177細胞
SUD-4細胞系相關產(chǎn)品:CHOK1細胞、H4-II-E-C3細胞、CHL-IU細胞
hRPTC細胞系相關產(chǎn)品:PANC0504細胞、Medical Research Council cell strain-9細胞、KCL-22細胞
KE39細胞系相關產(chǎn)品:HFT8810細胞、ChaGo K-1細胞、HBE 135-E6/E7細胞
NCI-H211 Adherent人小細胞肺癌細胞系
OB2細胞系相關產(chǎn)品:Lieming Xu-2細胞、OCI/AML4細胞、A2780細胞
N9細胞系相關產(chǎn)品:KB細胞、KU-812-F細胞、HT144mel細胞
NCI-H2087細胞系相關產(chǎn)品:SW962細胞、2B4細胞、KYSE30細胞
HCV-29細胞系相關產(chǎn)品:E.L.4細胞、NCI-H-295細胞、Hmy.2 CIR細胞
KM12-SM細胞系相關產(chǎn)品:143B TK-細胞、Potorous tridactylus Kidney 2細胞、HLFa細胞
P3X63NS1細胞系相關產(chǎn)品:KYSE 30細胞、RSC 96細胞、VP 267細胞
A-673細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2085細胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞、KG-1a細胞
RCC-4細胞系相關產(chǎn)品:A549細胞、KPL1細胞、COLO 320 HSR細胞
OVCAR420細胞系相關產(chǎn)品:SiHa細胞、MDA MB 134VI細胞、SF767細胞
H1395細胞系相關產(chǎn)品:MIO-M1細胞、BRL3A細胞、CT26.WT細胞
KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1299細胞、PC3M細胞、CEM T4細胞
DoTc2-4510細胞系相關產(chǎn)品:MS-751細胞、CHO-Lec1細胞、HMEL細胞
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