"NCI-H647 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染:懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染,其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理,先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內(nèi)吞作用,將目的基因?qū)爰毎麅?nèi),而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍,所以,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次,脂質(zhì)體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外,懸浮細胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率,可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法,針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的,電擊對細胞有一定的損傷,選用具有細胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑,可以將電擊對細胞的傷害降到最低,懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染,選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H647 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
常規(guī)的細胞實驗(增殖,凋亡,遷移,分化之類的),受消化影響不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數(shù)實驗,比如病毒包裝,對細胞代數(shù),對細胞狀態(tài)要求極高。這個時候,胰酶消化,就是潤洗,都會對細胞包裝病毒的能力有影響,傳代次數(shù)一多,細胞包裝能力就會逐漸下降(當(dāng)然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化,用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性,來使得細胞脫離基質(zhì)附著表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。許多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白,trypsin切割ECM的一些負責(zé)粘連和附著的蛋白,而EDTA通過螯合Ca離子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者對付特別難消化的細胞,添加多一些EDTA,就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果10min還消化不徹底的話),而應(yīng)該想其它辦法;PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌,是常見的操作,因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問可以講,對于一些難消化細胞,那么可以配制不含Ca,Mg離子的PBS,因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞,不需要配制如此溶液。
X63Ag8-653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCMEC(BL12-H)細胞、HCCLM3細胞、GNM細胞
H23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-GI細胞、HUSMC細胞、2T細胞
Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs822T細胞、SNU-449細胞、U266 B1細胞
細胞傳代方法:1:3-1:6傳代;每周換液2次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HBVP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1793細胞、Panc-8_13細胞、Reuber H35細胞
Hs 821.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH-35細胞、SK Mel 24細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞
THP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR420細胞、P388-D1細胞、High Five細胞
細胞生長特性:貼壁生長
NCI-H647 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
【細胞培養(yǎng)中細菌、霉菌的污染情況總結(jié)】細菌:細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據(jù)感染細菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時放氣時間足夠,壓力足夠!尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象!可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理;霉菌:培養(yǎng)液是清亮的,倒置顯微鏡下無雜質(zhì),37度孵箱培養(yǎng)2-3天,仍清亮,但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì),鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物,可看到明顯的菌絲,細胞仍可生長,但時間長之后,細胞的活力狀態(tài)變差,用酸銅溶液擦拭CO2孵箱內(nèi),再把水盤里也加上飽和量的酸銅。或者在培養(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有細胞暫時轉(zhuǎn)移,采用擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把放置在孵箱內(nèi)一個小時,使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后,再移入細胞。孵箱應(yīng)定期清潔(2月左右),尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外燈照。預(yù)防霉菌污染,可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗;但細胞一旦污染,很難挽救,制霉菌素或D或雙抗都于事無補,建議舍棄該污染細胞,將環(huán)境徹底消毒,如果所有細胞都污染,可能是系統(tǒng)污染,檢查一下培養(yǎng)基和器材,如果只是個別污染,可能是操作問題,就要注意操作。
MKN-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNB-19細胞、SUM-159-PT細胞、HDLM-2細胞
Normal Rat, August 3, 1983細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-60 clone15細胞、Rat 1細胞、HOK細胞
NCI-841細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML-2細胞、Rat1細胞、LS180細胞
NCI-H2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-292細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HOS (TE85)細胞
hEM15A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2591細胞、U-251_MG細胞、M-14細胞
HNSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCASMC細胞、MDAMB435S細胞、HEL細胞
OCI-AML-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU398細胞、16HBE細胞、SK-N-BE(2C)細胞
KM-H2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMC-1細胞、CaSki細胞、KP-2細胞
EBC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCMEC細胞、Institute for Medical Research-32細胞、NCI-H650細胞
HPDEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO_320DM細胞、Jurkat Clone E6-1細胞、HRGEC細胞
H-292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI164細胞、PC3M細胞、NCI-H-128細胞
McA-RH 7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H157細胞、Gerner 7666細胞、COR-L279細胞
H-1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFPAC1細胞、NCIH1581細胞、KOSC-2 cl3-43細胞
NCI-H647 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
HCA 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-292細胞、GC1-SPG細胞、AR4-IP細胞
HS852.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-299細胞、NCIH1915細胞、Fetal Rhesus Kidney-4細胞
T/GHA-VSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC-7901細胞、NCIH441細胞、KOSC2細胞
H-865細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh-7.5細胞、A20細胞、SKES-1細胞
B16 melanoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品:As-PC1細胞、End1/E6E7細胞、H889細胞
COLO 16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM192C細胞、MSTO-211H細胞、MES23.5細胞
FL62891細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI-SG231細胞、SNU-601細胞、SNU-668細胞
LLC-PK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TR146細胞、RBE4細胞、A549/ATCC細胞
32D clone3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A9細胞、4T1-A細胞、PANC-02-03細胞
NCI-H1522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H441細胞、GM03671細胞、SK-HEP-1細胞
KMB 17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF10A細胞、COV362細胞、SNU216細胞
GTL-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H35 Reuber細胞、SNG-M細胞、Colo205細胞
P3HR1-BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pan02細胞、MCA-205細胞、SK-ES-1細胞
NKL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞、C4-2 B細胞、SW 1222細胞
HLEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tca8113細胞、AAV293細胞、DHL5細胞
OK-WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BBE細胞、AML-193細胞、PLA-801C細胞
BSC40細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J 82細胞、HCC-1599細胞、751-NA細胞
TFH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAW 264.7細胞、NU-GC-2細胞、OCILY-10細胞
MRCV細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H524細胞、BEP2D細胞、D-283細胞
UO31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHH-CALL-2細胞、MV-4:11細胞、293 HEK細胞
H-2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera 2細胞、SJSA-1細胞、Caco2-BBE細胞
D341Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2405細胞、U20S細胞、MDA-MB-157細胞
JF305細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT115細胞、HT22細胞、HTh74細胞
B16 F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-704細胞、253JBV細胞、LNCaP subline C4-2細胞
PLC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs739T細胞、RPMI-1788細胞、OVCA-432細胞
MN9D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251n細胞、Vero from pool #76細胞、HAPI細胞
OCI/AML-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-GI-10細胞、253J-Bladder-V細胞、MHCC97-H細胞
NE1-E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU668細胞、H-1105細胞、MOLT 4細胞
Huh-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCM細胞、EAhy926細胞、MDAMB435S細胞
C-33 A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST2細胞、KRC-Y細胞、VP 229細胞
SUM-190細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1355細胞、FL62891細胞、Oka-C1細胞
HEK-293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16F10細胞、Jiyoye(P-2003)細胞、High 5細胞
MLE12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KATO 3細胞、Hs 606.T細胞、SK-ES1細胞
SU-DH-L5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61細胞、RetroPack PT67細胞、EBTr細胞
451Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1-1 Ag4.1細胞、RPMI No. 1846細胞、HCa/16A3-F細胞
MDA-MB-134 VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G292細胞、Centre Antoine Lacassagne-33細胞、Plaepi 34細胞
RMG-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMCB細胞、C3H-10T1/2細胞、293T/17細胞
SaOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EA.Hy926細胞、RPMI #8226細胞、CWR22R-V1細胞
OV-2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPAM-WT細胞、MHCCLM3細胞、R1610細胞
CCD1095Sk細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H711細胞、ETCC-007細胞、MM134細胞
NU-GC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGC803細胞、ACCM細胞、MC 116細胞
HREC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1672細胞、J.E6-1細胞、PLC-PRF-5細胞
NCI-H647 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
293F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1876細胞、T_T_細胞、MV4;11細胞
SW-403細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TF-1a細胞、HSC5細胞、Lewis-Lung細胞
A-2780細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H9c2細胞、SCL-2細胞、BALL1細胞
Reh細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA922細胞、BT-474細胞、FHs74 Int細胞
PC-3M-2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GBC-SD細胞、HUT125細胞、Jurkat77細胞
HOP 92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WiDr/S細胞、624mel細胞、DI-TNC1細胞
Japanese Tissue Culture-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH-28細胞、Pa18C細胞、Molm14細胞
TSCC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-756細胞、M4e細胞、HuP-T4細胞
NCIH1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP-T1細胞、E.L.4細胞、Panc 2.03細胞
SUM 102細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss-3T3細胞、H647ell細胞、RPMI8226細胞
A2058細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-480細胞、LA-N-1細胞、OCI-Ly 3細胞
NCI-841細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML-2細胞、Hs 600.T細胞、huH 1細胞
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