"NCI-H647細(xì)胞：人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：３-１：６傳代；每周換液２次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
養(yǎng)了幾年細(xì)胞，說(shuō)一點(diǎn)自己培養(yǎng)細(xì)胞方面的看法：１)培養(yǎng)細(xì)胞前，可以看看細(xì)胞特點(diǎn)說(shuō)明書，包括細(xì)胞正常生長(zhǎng)的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等；２)不同細(xì)胞生長(zhǎng)周期不同，有的生長(zhǎng)很快，比如說(shuō)MDA-MB-２３１，傳代的時(shí)候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了，有的又是特別慢，等的人心焦，BT４７４就是，傳代是一分二，復(fù)蘇起始的時(shí)候兩周多才能長(zhǎng)滿，所以就要在培養(yǎng)細(xì)胞的過(guò)程中多多摸索了；３)對(duì)于嬌弱的細(xì)胞，就得細(xì)心呵護(hù)了，胰酶消化不能過(guò)久，吹得時(shí)候要輕柔，離心時(shí)候也要注意轉(zhuǎn)速和時(shí)間，每天都要去看一下細(xì)胞，肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況；４)凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基；５)培養(yǎng)箱隔一段時(shí)間徹底用酒精棉擦洗一次；６)養(yǎng)細(xì)胞的教訓(xùn)：不能偷懶!細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。１)不管買的細(xì)胞、惠贈(zèng)的細(xì)胞，剛拿到手趕緊做兩件事：檢測(cè)是否有支原體污染; 迅速擴(kuò)增凍存；２)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉，特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時(shí); 細(xì)菌污染，真菌污染很容易發(fā)現(xiàn)，支原體污染的話，細(xì)胞會(huì)長(zhǎng)的慢，買個(gè)支原體檢測(cè)的kit定期檢測(cè)一下；３)傳代細(xì)胞日常的值日清潔是必須的，此外還要定期熏蒸；４)細(xì)胞的傳代一定要規(guī)律，保持相同的confluency和傳代時(shí)間間隔，不要隨心所欲或者拖延；５)注意個(gè)人衛(wèi)生。
在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來(lái)說(shuō)，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過(guò)低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過(guò)晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短：時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過(guò)短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無(wú)誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過(guò)驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過(guò)程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
我常看到一個(gè)比較復(fù)雜的四步消化法，這個(gè)挺有意思，我也是次聽說(shuō)，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來(lái)的方法，很有參考價(jià)值。但我估計(jì)這個(gè)方法可能對(duì)付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過(guò)的近３００株細(xì)胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實(shí)是很好消化的細(xì)胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點(diǎn)成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個(gè)視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細(xì)胞的特性，是因?yàn)橘N壁過(guò)程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細(xì)胞之后會(huì)對(duì)你越來(lái)越不好；比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過(guò)５min，即可見細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
LIXC002細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML4細(xì)胞、Becker細(xì)胞、PC2細(xì)胞
CCD-112CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M 2B4細(xì)胞、EHEB細(xì)胞、RPMI 8402細(xì)胞
NCIH196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YES 2細(xì)胞、AZ521細(xì)胞、ZR75-1細(xì)胞
Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2細(xì)胞、WM 239-A細(xì)胞、U-266 AR1細(xì)胞
H2107細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：38C-13細(xì)胞、HIT T-15細(xì)胞、KB細(xì)胞
U118MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2141細(xì)胞、TCCSUP細(xì)胞、SNU-878細(xì)胞
Pa14C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DLD 1細(xì)胞、HL7702細(xì)胞、RPMI no. 8226細(xì)胞
OACP4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、EOC 20細(xì)胞、NB-4細(xì)胞
NCI-H1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO-8910PM細(xì)胞、U87MG細(xì)胞、FHCRC-11細(xì)胞
H2444細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1437細(xì)胞、NCI-H1568細(xì)胞、SW 48細(xì)胞
ARPE-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CoCL3細(xì)胞、TMK-1細(xì)胞、MDA 1386細(xì)胞
HCC-2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryonic Skin細(xì)胞、N-9細(xì)胞、KYSE-520細(xì)胞
HEK-293H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC7901/DDP細(xì)胞、H1650_CO細(xì)胞、10T1/2細(xì)胞
HCoEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P36細(xì)胞、C8D1A細(xì)胞、HONE-1細(xì)胞
OCI-Ly18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC9724細(xì)胞、C-643細(xì)胞、LoVo細(xì)胞
B16F0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-FT細(xì)胞、NCI H2106細(xì)胞、MLA144細(xì)胞
B16F0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-FT細(xì)胞、NCI H2106細(xì)胞、MLA144細(xì)胞
BEL-7402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：5-8F細(xì)胞、P-36細(xì)胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞
BEND細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJ-Rh 30細(xì)胞、HBMEC細(xì)胞、MOLP-2細(xì)胞
22Rv-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC7901細(xì)胞、HCC-70細(xì)胞、Monomac-1細(xì)胞
HCT15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-3J細(xì)胞、HuT 102細(xì)胞、OVCAR 8細(xì)胞
MV4:11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30OHK細(xì)胞、K1細(xì)胞、BXPC3細(xì)胞
OUMS-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE270細(xì)胞、H774細(xì)胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞
SKMEL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-60 Clone 15細(xì)胞、HCC1954BL細(xì)胞、CHO-Lec1細(xì)胞
NCI-SNU-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-159細(xì)胞、H-2029細(xì)胞、NCIH1770細(xì)胞
NCI-H1238細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1668細(xì)胞、BAC1.2F5細(xì)胞、SKMEL-31細(xì)胞
Spodoptera frugiperda clone 9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-Sf21細(xì)胞、VP 267細(xì)胞、KBM5細(xì)胞
A 375細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 746T細(xì)胞、MCF-7/ADR細(xì)胞、451Lu細(xì)胞
SKNFI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞、NCI-H1155細(xì)胞、WBF344細(xì)胞
C38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL1細(xì)胞、NCI-H441-4細(xì)胞、RBL 2H3細(xì)胞
H2227細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARPE19細(xì)胞、TW01細(xì)胞、COLO 741細(xì)胞
L 363細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 3B細(xì)胞、MDCK.2細(xì)胞、LU451細(xì)胞
OAC-P4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hut292細(xì)胞、Karpas 422細(xì)胞、AG06814-M細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LWnt-3A細(xì)胞、HT 1197.T細(xì)胞、SRA01/04細(xì)胞
SCL I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCW 100細(xì)胞、SF-295細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞
L23/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ETCC007細(xì)胞、Mink細(xì)胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞
MDA-MB436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-795細(xì)胞、X63Ag8.653細(xì)胞、Colon 38細(xì)胞
CHL-CL-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AE1201細(xì)胞、H-2228細(xì)胞、H125細(xì)胞
NCI-841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-2細(xì)胞、Rat1細(xì)胞、LS180細(xì)胞
HSAS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hEM15A細(xì)胞、NSH細(xì)胞、rHSC-99細(xì)胞
UACC-893細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGC27細(xì)胞、NCIH810細(xì)胞、NB19細(xì)胞
CORL51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1299細(xì)胞、CF Pac1細(xì)胞、Hs746-T細(xì)胞
MUVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-25細(xì)胞、MOLT-3細(xì)胞、SNB19細(xì)胞
N1E115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST-2細(xì)胞、Calu-6細(xì)胞、Kit225 K6細(xì)胞
H719細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-78細(xì)胞、MV411細(xì)胞、HuT 78細(xì)胞
OVHM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-522細(xì)胞、NCIH1963細(xì)胞、H9c2(2-1)細(xì)胞
SUDHL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-1 spg細(xì)胞、ZR7530細(xì)胞、Huh 7.5.1細(xì)胞
SW1463細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H69細(xì)胞、SF539細(xì)胞、TE1細(xì)胞
YAC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：THLE-3細(xì)胞、Hu-P-T3細(xì)胞、THP 1細(xì)胞
CAL 27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-4細(xì)胞、OCI Ly19細(xì)胞、H1373細(xì)胞
HPAF II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞、Caki-1細(xì)胞、NUGC2細(xì)胞
WEHI164細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMS 13細(xì)胞、BL2141細(xì)胞、HCC0202細(xì)胞
L 363細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 3B細(xì)胞、MDCK.2細(xì)胞、LU451細(xì)胞
Psi2-DAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca759細(xì)胞、UACC812細(xì)胞、TC-1[JHU-1]細(xì)胞
H-2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：67NR細(xì)胞、TK10細(xì)胞、bEND.3細(xì)胞
Molm 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-O7e細(xì)胞、HCO細(xì)胞、38C-13細(xì)胞
Molm 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-O7e細(xì)胞、HCO細(xì)胞、38C-13細(xì)胞
NCI-H2444細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-5細(xì)胞、NCI-H2009細(xì)胞、KPL4細(xì)胞
MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS411細(xì)胞、QGP1細(xì)胞、TE 85 ClF-5細(xì)胞
HS 1.Tes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCFs細(xì)胞、NCI-747細(xì)胞、NCI-H-69細(xì)胞
Dakiki細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS411N細(xì)胞、DU 145細(xì)胞、U031細(xì)胞
NCI-H526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8.653細(xì)胞、HS-940-T細(xì)胞、MCMEC細(xì)胞
HSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-596細(xì)胞、Kasumi-1細(xì)胞、NCI-SNU-C2A細(xì)胞
Hs294細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT細(xì)胞、COLO 201細(xì)胞、MDA-MB435細(xì)胞
HTR-8/SV neo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BDCM細(xì)胞、RMa-bm細(xì)胞、NCI-H747細(xì)胞
HBL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U2-OS細(xì)胞、VSMC細(xì)胞、D324細(xì)胞
Vero 76 clone E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFO 27細(xì)胞、HMCB細(xì)胞、PaTu-8988s細(xì)胞
SKHEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNT-8細(xì)胞、NCI-H1436細(xì)胞、Human Microvascular Endothelial細(xì)胞：-1細(xì)胞
SK-MEL28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 606.T細(xì)胞、Hs863T細(xì)胞、FRTL-5 Cl 2細(xì)胞
HCC-1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMECs細(xì)胞、P3-X63Ag8細(xì)胞、EST50細(xì)胞
NCI-H1792細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA 104細(xì)胞、HOS-TE85細(xì)胞、CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞
JHH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 153細(xì)胞、HNE2細(xì)胞、OCI AML3細(xì)胞
NCIH196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YES 2細(xì)胞、C4I細(xì)胞、BJ [Human fibroblast]細(xì)胞
B-95-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS23細(xì)胞、HEY A8細(xì)胞、B95.8細(xì)胞
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