"NCI-H1944 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞培養(yǎng)時分布不均勻,通常操作步驟:做細胞生物學實驗,細胞鋪板大概是我們最常見的一個實驗。但有時候鋪得不是很均勻:要么中間密周圍稀,要么周圍密中間禿頂。下面為大家分享幾點經驗。盡量消化細胞分散成單細胞懸液。對于易于消化的細胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶潤洗一遍(25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板),棄掉胰酶,37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右,鏡下觀察是否細胞消化較為分散。如果不夠,延長消化時間。96孔板一般以100微升每孔接種,直接用100微升移液器吸取細胞懸液,沿孔壁(稍離開一點孔底即可,不要離底太高)直接接入,移液器不需完全打到,輕輕按下即可,每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細胞懸液。都加完后蓋上蓋子,左手輕輕扶住板的左邊,右手輕輕敲擊板的右邊緣,注意把握力度(我一般輕巧敲三下),太強或次數太多會導致細胞集中成堆,將板順時針旋轉(逆時針效果不好),依次敲擊剩余三個邊,靜置約5分鐘,放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板,可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基,晃動浸潤整個孔底,然后用移液槍吸至第二孔,同樣方法浸潤孔底,其它孔依此類推,這樣整個孔底都是濕潤的,細胞懸液會平鋪在整個孔底,注意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點慢,但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式,但力度沒有96孔板好掌握,效果沒有96孔板好。培養(yǎng)瓶里面加好細胞以后(比如傳代好/分好細胞以后),先順時針搖晃3次,馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復延X軸Y軸分別水平搖動3次。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H1944 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
有關實驗室細胞培養(yǎng)基知識普及:經典的培養(yǎng)基有很多種,Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是應用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細胞的培養(yǎng);MEM是由Eagle’s基礎培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來的,其中增加了組分的范圍及濃度;BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細胞設計的,現在常用于貼壁細胞的培養(yǎng)。DMEM的基酸濃度是MEM的兩倍,維生素濃度是MEM的4倍,采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為1000mg/L,后來為了某些細胞的生長需要,將葡萄糖含量又調整為4500mg/L,這就是大家常說的低糖和高糖了;aMEM含有附加的基酸、維生素以及核苷和脂肪酸,它可廣泛應用于各種細胞類型,包括對營養(yǎng)成分要求苛刻的細胞;Ham’s F12是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設計的,現在也廣泛應用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F12還可以與DMEM等體積混合使用,得到一種高濃度與成分多樣化相結合的產物,這種培養(yǎng)基已應用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細胞系的培養(yǎng);RPMI 1640培養(yǎng)基是專為淋巴細胞培養(yǎng)而設計的,現在已廣泛應用于懸浮細胞的培養(yǎng)。
Lewis Lung細胞系相關產品:WEHI231細胞、UMNSAH/DF#1細胞、LIXC-002細胞
NIH/3T3細胞系相關產品:MDAPC2B細胞、MDA-MB 468細胞、MX-1細胞
HET-1A細胞系相關產品:GM3190細胞、Caco2-BBE細胞、LX-2細胞
細胞傳代方法:1:3—1:6傳代,每周換液2—3次
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
HUT 28細胞系相關產品:NCIH1666細胞、SNU-475細胞、MEG-01細胞
aTC1 Clone 6細胞系相關產品:D407 RPE細胞、NCTC 1469細胞、4T1細胞
LYR細胞系相關產品:SU-DHL6細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞、HSC6細胞
細胞生長特性:貼壁生長
NCI-H1944 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
養(yǎng)了幾年細胞,說一點自己培養(yǎng)細胞方面的看法:1)培養(yǎng)細胞前,可以看看細胞特點說明書,包括細胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等;2)不同細胞生長周期不同,有的生長很快,比如說MDA-MB-231,傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經足夠了,有的又是特別慢,等的人心焦,BT474就是,傳代是一分二,復蘇起始的時候兩周多才能長滿,所以就要在培養(yǎng)細胞的過程中多多摸索了;3)對于嬌弱的細胞,就得細心呵護了,胰酶消化不能過久,吹得時候要輕柔,離心時候也要注意轉速和時間,每天都要去看一下細胞,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細胞生長狀況;4)凍存細胞復蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基;5)培養(yǎng)箱隔一段時間徹底用酒精棉擦洗一次;6)養(yǎng)細胞的教訓:不能偷懶!細胞虐我千百遍,我待細胞如初戀。1)不管買的細胞、惠贈的細胞,剛拿到手趕緊做兩件事:檢測是否有支原體污染; 迅速擴增凍存;2)發(fā)現有污染迅速處理掉,特別是當你養(yǎng)了很多種細胞時; 細菌污染,真菌污染很容易發(fā)現,支原體污染的話,細胞會長的慢,買個支原體檢測的kit定期檢測一下;3)傳代細胞日常的值日清潔是必須的,此外還要定期熏蒸;4)細胞的傳代一定要規(guī)律,保持相同的confluency和傳代時間間隔,不要隨心所欲或者拖延;5)注意個人衛(wèi)生。
NCIH2342細胞系相關產品:RTMC細胞、ssMCF-7細胞、CAL148細胞
293 H細胞系相關產品:RGC5細胞、NCI-H2291細胞、H-125細胞
SNU-354細胞系相關產品:SK RC 20細胞、Ketr-3細胞、NCTC-1469細胞
K1735細胞系相關產品:C3H 10T1/2細胞、Hs 742.T細胞、LI7細胞
KM12 SM細胞系相關產品:Madin Darby Bovine Kidney細胞、SCH細胞、GAK細胞
Nb2細胞系相關產品:C-4I細胞、C32-mel細胞、U-251MG細胞
L5178Y細胞系相關產品:Transformed Human Liver Epithelial-3細胞、J774.A1細胞、PL-5細胞
7860細胞系相關產品:HPAF II細胞、IMR90細胞、RS411細胞
Hs 822.T細胞系相關產品:SK-N-MC細胞、CV 1細胞、GCT0404細胞
Co-115細胞系相關產品:RIN Cl-5F細胞、HCT-FET細胞、MDAMB415細胞
DHL-16細胞系相關產品:MyLa2059細胞、NS1-Ag4細胞、ARO81-1細胞
NCI-HUT-520細胞系相關產品:P3J HR-1細胞、RS(4;11)細胞、MF2059細胞
CNE1細胞系相關產品:OE33細胞、KMS-11細胞、HEK-293細胞
NCI-H1944 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
Huh-7.5.1細胞系相關產品:L-cells細胞、NPA87細胞、SMA-560細胞
MOVAS細胞系相關產品:SUM159PT細胞、KHYG細胞、M-O7e細胞
149PT細胞系相關產品:MOLT-4細胞、NCIH2405細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞
149PT細胞系相關產品:MOLT-4細胞、NCIH2405細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞
OCI-Ly01細胞系相關產品:Hs 578Bst細胞、COLO 699細胞、E6-1細胞
Tissue Culture-1細胞系相關產品:CA-46細胞、HCC1419細胞、WC00059細胞
Jurkat E6.1細胞系相關產品:H-1869細胞、H2291細胞、NCI522細胞
Colon26細胞系相關產品:ABE8.1/2細胞、TE 85.T細胞、BCECs細胞
UCLA SO M21細胞系相關產品:MAVER-1細胞、Mono Mac 6細胞、SF-295細胞
VP 267細胞系相關產品:Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞、ELD-1細胞、GM03190細胞
Clone 166細胞系相關產品:CCD-33Co細胞、COLO 320F細胞、SV40 MES 13細胞
HNSC細胞系相關產品:HCASMC細胞、MDAMB435S細胞、HEL細胞
Dysplastic Oral Keratinocyte細胞系相關產品:ACC2細胞、SK-RC-42細胞、SKMEL1細胞
Human Embryonic Skin細胞系相關產品:BeWo細胞、UMUC3細胞、SUDHL1細胞
MDAMB435S細胞系相關產品:Caco-2/BBe 1細胞、TOV21細胞、NCI-SNU-520細胞
Det 562細胞系相關產品:Loucy細胞、G402細胞、NCI-H1882細胞
Hs 683.T細胞系相關產品:TPC1細胞、RPTC細胞、HS5細胞
4-1st細胞系相關產品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HL 60細胞、NCI H548細胞
H-3255細胞系相關產品:HT 1080細胞、RL95細胞、B16-F10--RED細胞
SW-780細胞系相關產品:U-251 MG細胞、Kasumi 1細胞、ID8細胞
JKT-1細胞系相關產品:HEYA8細胞、NCI-SNU-449細胞、HCC0366細胞
BNCL-2細胞系相關產品:CAKI 2細胞、QGY-7701細胞、A72細胞
GM03569D細胞系相關產品:MSTO-211H細胞、MDA MB 175 VII細胞、HL-60 clone15細胞
HUT 125細胞系相關產品:LTEP a2細胞、TPC1細胞、SW260細胞
NCI-H2107細胞系相關產品:MCF-7/ADR-RES細胞、COLO206F細胞、K422細胞
Lung cancer-1/squamous細胞系相關產品:UM-UC-3細胞、QBC-939細胞、H220細胞
COV362細胞系相關產品:SKMEL-1細胞、L5178YR細胞、P30 OHK細胞
NCI-SNU-16細胞系相關產品:IHH細胞、NTERA-2細胞、T98細胞
SW 1353細胞系相關產品:Hs 729.T細胞、WM266-4細胞、alphaTC clone 6細胞
MCFs細胞系相關產品:HEK (AD293)細胞、PG-4 S+L-細胞、Ramos.G6.C10細胞
SK-N-BE(2C)細胞系相關產品:MOLP8細胞、INS1E細胞、LM2-4175細胞
UPCI-SCC-90細胞系相關產品:OCI AML4細胞、SU-DHL-10細胞、HCCC-9810細胞
WM239細胞系相關產品:GM03320D細胞、SNU-423細胞、TU 686細胞
EoL-1-cell細胞系相關產品:BRL細胞、H-1048細胞、SPCA-1細胞
HRC-99細胞系相關產品:CW-2細胞、HA1800細胞、MO59J細胞
CMT64細胞系相關產品:LN382細胞、Ramos(RA1)細胞、LMH細胞
HLEC-SRA 01/04細胞系相關產品:Hs675細胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞、Hs940.T細胞
BRL3A細胞系相關產品:WEHI-164細胞、NTera-2D1細胞、COLO-205細胞
MHCC97細胞系相關產品:SK N SH細胞、BPH1細胞、LN299細胞
H2085細胞系相關產品:Epstein-Barr-1細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞、H1618細胞
ML-2細胞系相關產品:CAMA細胞、H2452細胞、NCIH508細胞
NPC-TW01細胞系相關產品:Pfeiffer細胞、H1770細胞、C57/B6-L細胞
NCI-H1944 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
U-266 AR1細胞系相關產品:DI TNC1細胞、SU86.86細胞、H1819細胞
HSC-1細胞系相關產品:293 H細胞、HOP 62細胞、WI-38細胞
LUDLU-1細胞系相關產品:HOP62細胞、SY5Y細胞、NCIH1734細胞
3T3 J2細胞系相關產品:Henrietta Lacks cells細胞、RPMI 8402細胞、G-401細胞
SKMES1細胞系相關產品:MG63細胞、NU-GC-4細胞、SW-982細胞
NOR 10細胞系相關產品:Capan1細胞、CTX TNA2細胞、Hut292細胞
138MG細胞系相關產品:TYKnu細胞、HEK293-EBNA1細胞、DrG細胞
MDA-MB436細胞系相關產品:LA-795細胞、X63Ag8.653細胞、Colon 38細胞
NCI H2106細胞系相關產品:IPLB-SF-21細胞、Human podocyte細胞、TE671/RD細胞
NCI H82細胞系相關產品:SP2/0 Ag-14細胞、SCLC21H細胞、Clone Y1細胞
MEG-01細胞系相關產品:NCI-H165細胞、SK HEP-1細胞、H446細胞
SNU-354細胞系相關產品:SK RC 20細胞、HemECs細胞、KTA-7細胞
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