"NCI-H1650 Adherent人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞是從一名27歲白人男性(10年煙齡)支氣管肺泡癌患者的胸腔積液中分離得到的。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題,客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說,針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不好》可能原因:細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多,細(xì)胞老化;2)細(xì)胞的接種量:接種量過低,細(xì)胞生長緩慢;3)細(xì)胞傳代時間過晚:細(xì)胞中毒,影響傳代后的細(xì)胞生長;4)胰酶消化時間過長或過短:時間過長,細(xì)胞死亡;時間過短,細(xì)胞未完全分離而成團,細(xì)胞死亡;5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應(yīng)是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據(jù)以上四個方面的可能原因,做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;2)避免產(chǎn)生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,經(jīng)過驗證;4)注意實驗室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2;2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大;3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積;解決方法:1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;3)取新的保存細(xì)胞種;4)檢測培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H1650 Adherent人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
常規(guī)的細(xì)胞實驗(增殖,凋亡,遷移,分化之類的),受消化影響不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細(xì)胞例外)。但少數(shù)實驗,比如病毒包裝,對細(xì)胞代數(shù),對細(xì)胞狀態(tài)要求極高。這個時候,胰酶消化,就是潤洗,都會對細(xì)胞包裝病毒的能力有影響,傳代次數(shù)一多,細(xì)胞包裝能力就會逐漸下降(當(dāng)然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化,用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性,來使得細(xì)胞脫離基質(zhì)附著表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。許多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白,trypsin切割ECM的一些負(fù)責(zé)粘連和附著的蛋白,而EDTA通過螯合Ca離子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者對付特別難消化的細(xì)胞,添加多一些EDTA,就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果10min還消化不徹底的話),而應(yīng)該想其它辦法;PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌,是常見的操作,因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問可以講,對于一些難消化細(xì)胞,那么可以配制不含Ca,Mg離子的PBS,因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細(xì)胞,不需要配制如此溶液。
MUTZ1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63Ag8細(xì)胞、Human Epithelioma-2細(xì)胞、HITT15細(xì)胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFB細(xì)胞、PL-5細(xì)胞、MCF 7B細(xì)胞
BrCL18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUTZ3細(xì)胞、SKMEL-2細(xì)胞、VK-2/E6E7細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:4-1:6傳代;2-3天換液1次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
BL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL62細(xì)胞、Hs729細(xì)胞、HemECs細(xì)胞
HCV 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly19細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞、OSRC2細(xì)胞
IM9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Chang Cells細(xì)胞、W256細(xì)胞、FTC133細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
NCI-H1650 Adherent人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣
傳代培養(yǎng)及其操作步驟:原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后,需要進行分離培養(yǎng),否則細(xì)胞會因生存空間不足或密度過大,營養(yǎng)障礙,影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴增(形成細(xì)胞株),可以進行細(xì)胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料,便于實驗?!静僮鞑襟E】1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液;2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜;3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進行消化,2~5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后,應(yīng)立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶內(nèi)加入Hanks液少量,輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化;5)使用彎頭吸管,吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液,按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞,使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時動作要輕柔,以防用力過猛損傷細(xì)胞;6)用計數(shù)板計數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng);7)細(xì)胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般2~3d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?!咀⒁馐马棥浚?掌握好細(xì)胞消化的時間,消化時間過短時,細(xì)胞不宜從瓶壁脫落,過長的消化會導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷;2)掌握好消化濃度,當(dāng)消化液濃度過高時,消化時間應(yīng)縮短,過低時細(xì)胞消化時間相對延長。
L 929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUNE-1細(xì)胞、HPAF-II/CD18細(xì)胞、H711細(xì)胞
VMRC-LCD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M059K細(xì)胞、NBL-S細(xì)胞、NCI-H1522細(xì)胞
HFF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC 97-L細(xì)胞、McARH7777細(xì)胞、HCC827細(xì)胞
NU-GC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK-1細(xì)胞、Ramos G6.C10細(xì)胞、BERH-2細(xì)胞
VM Cub 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS1E細(xì)胞、HLEpiC細(xì)胞、22Rv1細(xì)胞
SW579細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human ErythroLeukemia細(xì)胞、HS766T細(xì)胞、Ej138細(xì)胞
MDA-MB-231-GFP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EJ細(xì)胞、LuCL4細(xì)胞、BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞
HuP-T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-CO-1細(xì)胞、SMMC-7721細(xì)胞、HCT-116細(xì)胞
526mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1(C4)細(xì)胞、RPMI7951細(xì)胞、HD11細(xì)胞
VMM5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CX-1細(xì)胞、Fox/NY細(xì)胞、7860細(xì)胞
Tadarida brasiliensis 1 lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JCA-1細(xì)胞、SCC15細(xì)胞、P30/OHK細(xì)胞
OCI-LY-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEC-1細(xì)胞、SKml2細(xì)胞、HIT細(xì)胞
TE9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03569細(xì)胞、NCIH838細(xì)胞、RPMI-6666細(xì)胞
NCI-H1650 Adherent人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
WERIRb1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone 15 HL-60細(xì)胞、HCC0070細(xì)胞、Ly18細(xì)胞
HCC78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-SH細(xì)胞、SK-MEL2細(xì)胞、SW-837細(xì)胞
TE-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leydig細(xì)胞、KU1919細(xì)胞、T.T細(xì)胞
TE-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leydig細(xì)胞、KU1919細(xì)胞、T.T細(xì)胞
OAW 42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMG-I細(xì)胞、ME-180細(xì)胞、RPMI no 8226細(xì)胞
GM03569B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1819細(xì)胞、HCC1588細(xì)胞、MOLT 3細(xì)胞
HCC-1438細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN229細(xì)胞、PA I細(xì)胞、BpRcl細(xì)胞
SV40 MES 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DITNC1細(xì)胞、OCI-Ly 10細(xì)胞、HCC-95細(xì)胞
2780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:aTC1 Clone 6細(xì)胞、T-47D細(xì)胞、HCC-1428細(xì)胞
BT-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos (RA 1)細(xì)胞、H-1694細(xì)胞、MC-4細(xì)胞
H4-IIE-C3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 27細(xì)胞、Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞、Walker-Ca.256細(xì)胞
SKGT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 895 T細(xì)胞、SK LU 1細(xì)胞、TE 32細(xì)胞
HCC-1937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBMEC細(xì)胞、OE21細(xì)胞、MDAMB330細(xì)胞
NK-92 MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2291細(xì)胞、GP293細(xì)胞、BE(2)M17細(xì)胞
HHUA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266BL細(xì)胞、Hs-578Bst細(xì)胞、NK92-MI細(xì)胞
NP-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-4-II-E細(xì)胞、Huh7.5細(xì)胞、NCIH1105細(xì)胞
Ca761細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2170細(xì)胞、ST細(xì)胞、PTK 1細(xì)胞
RPMI6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM-C7細(xì)胞、MPP89細(xì)胞、DH 82細(xì)胞
HLE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC細(xì)胞、D10G41細(xì)胞、NB4細(xì)胞
MDA435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC-3細(xì)胞、MFE280細(xì)胞、JEG3細(xì)胞
FDCP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M21細(xì)胞、HCC1599細(xì)胞、GT1-1細(xì)胞
TYKnu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1915細(xì)胞、OVSAHO細(xì)胞、Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞
H548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞、CCD18Co細(xì)胞、TSCCa細(xì)胞
MCA205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB-6細(xì)胞、COLO 320DM細(xì)胞、293c18細(xì)胞
A375-MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 746.T細(xì)胞、SKLU-1細(xì)胞、Porcine Kidney-15細(xì)胞
OCM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTV-1細(xì)胞、hTERTHME1細(xì)胞、CL-11細(xì)胞
NKT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MASMC細(xì)胞、Tca8113細(xì)胞、SKMEL5細(xì)胞
SNU601細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE0030細(xì)胞、WiDr-TC細(xì)胞、KPNRTBM1細(xì)胞
Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO Lec1細(xì)胞、LM TK negative細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞
Y79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-1細(xì)胞、MAVER細(xì)胞、NCI-H211細(xì)胞
GM17346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-375.S2細(xì)胞、Line 697細(xì)胞、NCIH2342細(xì)胞
MDA453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EMT-6細(xì)胞、CEM clone 7細(xì)胞、P3/X63-Ag8細(xì)胞
CWR22-Rv1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞、Hs822T細(xì)胞、Panc203細(xì)胞
MCF 10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly01細(xì)胞、HBdSMC細(xì)胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細(xì)胞
NuTu-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP-B15細(xì)胞、WI 38細(xì)胞、Tb 1-Lu細(xì)胞
UCLA NPA871細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MADB106細(xì)胞、A2780 CP70細(xì)胞、MDAMB361細(xì)胞
SF-539細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCCVII細(xì)胞、HCC4006細(xì)胞、UMR 106細(xì)胞
SF-539細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCCVII細(xì)胞、HCC4006細(xì)胞、UMR 106細(xì)胞
TE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC316細(xì)胞、Sf-21細(xì)胞、HCC-1395細(xì)胞
GM2219C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AK細(xì)胞、HEK 293-EBNA細(xì)胞、Loucy細(xì)胞
3AA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞、LN299細(xì)胞、F9細(xì)胞
EA.Hy926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1770細(xì)胞、SCCVII細(xì)胞、P36細(xì)胞
NCI-H1650 Adherent人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
MDA MB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GS-9L細(xì)胞、T-ALL1細(xì)胞、KMST-6細(xì)胞
ARO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2PK3細(xì)胞、MOLM-14細(xì)胞、A375.S2細(xì)胞
Hs-940細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA RO-81-A-1細(xì)胞、SK-Hep1細(xì)胞、751-NA-15細(xì)胞
TE11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lung cancer-1/squamous細(xì)胞、OUMS-27細(xì)胞、U2OS細(xì)胞
OC316細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320HSR細(xì)胞、WEHI-279細(xì)胞、Human Embryo Kidney-2細(xì)胞
OCIAML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DF1細(xì)胞、Hk-2細(xì)胞、GM00637I細(xì)胞
CT26WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAW-264.7細(xì)胞、hRMECs細(xì)胞、P3JHR-1細(xì)胞
OCILY7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-520細(xì)胞、PT-67細(xì)胞、Hs839T細(xì)胞
CAL39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-UT-1細(xì)胞、RBE細(xì)胞、BT-20細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC PRF 5細(xì)胞、GalK1細(xì)胞、RMG-I細(xì)胞
CHL-CL-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AE1201細(xì)胞、HN4細(xì)胞、MCF7ADR細(xì)胞
HFF1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL 1ME A.7R.1細(xì)胞、U-226AR1細(xì)胞、32D/cl3細(xì)胞
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