"NCI-H1666 Adherent人肺支氣管癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染:懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染,其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理,先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內(nèi)吞作用,將目的基因?qū)爰毎麅?nèi),而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍,所以,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次,脂質(zhì)體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外,懸浮細胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率,可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法,針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的,電擊對細胞有一定的損傷,選用具有細胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑,可以將電擊對細胞的傷害降到最低,懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染,選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H1666 Adherent人肺支氣管癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
【胰蛋白酶消化操作】1)加入消化液:小心吸出舊培養(yǎng)液,用PBS清洗(沖洗),加入適量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以蓋住細胞,消化溫度是37℃;2)顯微鏡下觀察細胞:倒置顯微鏡下觀察消化細胞,若胞質(zhì)回縮,細胞之間不再連接成片,表明此時細胞消化適度;(3)吸棄消化液加入培養(yǎng)液:棄去胰蛋白酶液,注意更換吸管,加入新鮮的培養(yǎng)液。【吹打分散細胞操作】1)吹打制懸:用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液;2)吸細胞懸液入離心管:將細胞懸液吸入10ml離心管中;3)平衡離心:平衡后將離心管放入臺式離心機中,以1000轉(zhuǎn)/分鐘離心6-8分鐘;4)棄上清液,加入新培養(yǎng)液:棄去上清液,加入2ml培養(yǎng)液,用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液?!痉盅b稀釋細胞操作】1)顯微鏡下觀察細胞:倒置顯微鏡下觀察細胞量,必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長,傳代細胞的密度應(yīng)該不低于5×105/ml。最后要做好標記;2)分裝:將細胞懸液吸出分裝至2~3個培養(yǎng)瓶中,加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋;3)繼續(xù)培養(yǎng):用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶,適當(dāng)旋松瓶蓋,放入CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞2小時后開始貼附在瓶壁上。
Tu-686細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-AD 293細胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞、ROS 17/2.8細胞
LLC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC 52細胞、Eca 109細胞、OCI-AML-2細胞
SK Mel 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 5細胞、MUG-Chor1細胞、SW-579細胞
細胞傳代方法:1:2-1:4傳代;每周換液2次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
BT-325細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU601細胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細胞、NCI-H87細胞
LS-174細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OLN-93細胞、NCI-H1703細胞、HCC-2279細胞
MUG-Chor1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv1.Lu細胞、L細胞、SW 1783細胞
細胞生長特性:貼壁生長,松散
NCI-H1666 Adherent人肺支氣管癌細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮細胞
細胞接收操作說明:請仔細閱讀本操作說明及相應(yīng)的細胞說明書。本公司細胞發(fā)貨有四種形式:T25培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細胞使用,懸浮細胞也可以)、離心管(懸浮細胞使用多,當(dāng)然,有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細胞,但是,長期經(jīng)驗來說,貼壁細胞容易發(fā)生形態(tài)變化,估計是細胞培養(yǎng)空間狹小,血清不足導(dǎo)致(最主要是怕運輸延誤導(dǎo)致這些情況發(fā)生),個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細胞)及干冰(凍存細胞用,主要是冬天天氣冷,溫度低于4℃的地方,都要考慮凍存細胞)。T25培養(yǎng)瓶:是用T25細胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細胞后,拆開包裝T25培養(yǎng)瓶的自封袋,不拆封口膜,表面噴75%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細胞照片)。將細胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上,再處理細胞。首先將T25中培養(yǎng)基取出裝好備用,如細胞密度高于80%,可以直接消化傳代,相反則加入5-6ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管:是用15ml離心管發(fā)貨的形式,只用于懸浮細胞發(fā)貨。收到細胞后消毒處理及將細胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上,再處理細胞。首先將T25中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實驗室沒有T25培養(yǎng)瓶,可以暫時T75培養(yǎng)瓶,加入10-15ml培養(yǎng)基,建議10ml培養(yǎng)基,也可以使用T175培養(yǎng)瓶,加入50-60ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)瓶越大,需要的培養(yǎng)基越多。當(dāng)然如果剛接收到細胞密度不夠的話,不用大瓶子,先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的,不然會長得很慢,嚴重的,會導(dǎo)致細胞死亡等危險),平衡完成后,離心(1000rpm,3min)收集細胞,棄上清,用新的培養(yǎng)基重懸細胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰:是用本公司凍存液凍存細胞后,直接用干冰將凍存的細胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細胞后按照細胞復(fù)蘇的步驟操作即可。
SW620細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Granta 519細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞、Vero-76細胞
LC-2/ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-85 clone 5細胞、SDBMSC細胞、AG 9細胞
LIXC-002細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B4G12細胞、MRC9細胞、M059J細胞
B16 melanoma F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH69細胞、OKT3細胞、EFO-27細胞
Pa017C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA802細胞、CWR22Rv1細胞、Li-7細胞
MKN 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG06814-N細胞、RPMI #1846細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞
SR786細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOR-10細胞、NCIH1944細胞、639-V細胞
SW13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1436細胞、WERI-Rb1細胞、hTERT-HME-1細胞
COS7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3 cl. A31細胞、HR1K細胞、Vx2細胞
WRL68細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283細胞、H-2107細胞、LC-2/ad細胞
NB1-RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D10.G4.1細胞、SW 1116細胞、C-4 I細胞
D-324MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 539細胞、A-875細胞、OE-33細胞
U 266細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-4細胞、AML-EOL-1細胞、HCS-2/8細胞
NCI-H1666 Adherent人肺支氣管癌細胞系
BeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-5細胞、TE-3A細胞、UM-UC-3細胞
RGM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C1R細胞、HT-29細胞、SKMel-28細胞
EFM-192B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH548細胞、CEK細胞、Hs 578T細胞
EFM-192B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH548細胞、CEK細胞、Hs 578T細胞
NCIH187細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774.A1細胞、CMT.64細胞、HMEC1細胞
Clone Y-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-Lu65細胞、H1666_DA細胞、CCLP1細胞
HEC-1B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPB/ALL細胞、SW-982細胞、H226細胞
LTEP-a-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BOWES細胞、SKNBE(2c)細胞、A498細胞
HCC-366細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2591細胞、A 549細胞、LC-1細胞
PANC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIEC-6細胞、HIT T15細胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細胞
LS 1034細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、LY細胞、OVCA 433細胞
HuT 102細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI 1細胞、GM15452細胞、SW954細胞
CNE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT15細胞、RMC-1細胞、MDA-330細胞
BMDC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KGN細胞、AHH-1細胞、MDA MB 231細胞
Mino細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EoL-1-cell細胞、LM6細胞、RPMI.8226細胞
H.Ep.-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-886細胞、PLA802細胞、BT-B細胞
SC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU145細胞、HT 115細胞、H87細胞
CAL62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2405細胞、NCI-H-82細胞、AgC11x3A細胞
CL1.0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L 105細胞、M14-MEL細胞、MMAc-Serum Free細胞
DoTc2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 688(A).T細胞、FU-OV-1細胞、MV4:11細胞
PC.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NM-C細胞、AZ 521細胞、SK-NM-C細胞
H-1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HKC細胞、Me Wo細胞、NP69SV40T細胞
IGROV細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT8細胞、NFHIOSE-80細胞、PA-1細胞
2PK3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH 3T6細胞、Lewis-Lung細胞、NTERA2D1細胞
RERFLCMS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DI TNC-1細胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞、CV-1 in Origin Simian-1細胞
GM00215細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OS-RC-2細胞、NCIH524細胞、OCI AML2細胞
NCIH322細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1116細胞、H-865細胞、Henrietta Lacks cells細胞
HPAF-II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Reh細胞、DMS114細胞、A375-SM細胞
EOL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2126細胞、NCI-SNU-475細胞、CMT.64細胞
SK HEP 01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HcaF細胞、Wien-133細胞、CAMA-1細胞
SK-OV-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-450細胞、WIL2S細胞、DMS 273細胞
SNK-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Turbot Embryonic Cell line細胞、HepaRG細胞、HL1細胞
HEL-92.1.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-35 Reuber細胞、SW620細胞、H-1836細胞
Jurkat E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CLL-CII細胞、Colon-26細胞、HB 611細胞
SNK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1882細胞、NCI-H847細胞、Human Hepatocyte Line 5細胞
ZR75_1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML193細胞、CCC-ESF-1細胞、RPMI 2650細胞
M-07e細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-2細胞、TGW-nu-1細胞、NCI-H2108細胞
M-07e細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-2細胞、TGW-nu-1細胞、NCI-H2108細胞
Human Kidney-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1975細胞、B16-F10細胞、H-1876細胞
HOP-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LK2細胞、HUTU80細胞、T24細胞
NCIH929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251MG細胞、HuCCT-1細胞、MARC145細胞
N1E115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST-2細胞、Calu-6細胞、Kit225 K6細胞
NCI-H1666 Adherent人肺支氣管癌細胞系
Ly10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-LU-1細胞、NRK 52E細胞、HT 144細胞
IM 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3 J2細胞、16HBEo-細胞、PANC 203細胞
NCI-H727細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-ALL 1細胞、NCI-H1993細胞、KG-1細胞
TGBC-11-TKB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI7951細胞、J82 COT細胞、LC-1 sq細胞
HBSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 832(C).T細胞、SW1222細胞、CWR22R細胞
Panc-10.05細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA432_Bast細胞、GP2-293細胞、Rat1細胞
THEECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE2細胞、NTC200細胞、L-5178-Y-R細胞
Molm 14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-O7e細胞、HCO細胞、38C-13細胞
JB-6 Cl 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-343 MG細胞、EC-109細胞、V79細胞
C8161細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1238細胞、Hs742T細胞、NCI-H1792細胞
U251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3AO細胞、LNCaP C4-2細胞、NCI-H929細胞
LIXC-002細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B4G12細胞、SKG3A細胞、BC3H-1細胞
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