"NCI-H1666 epithelioid cells人肺支氣管癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí),棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對(duì)細(xì)胞施加胰酶選擇,因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落,對(duì)腫瘤細(xì)胞來(lái)說(shuō),這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡(jiǎn)單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴(lài)殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對(duì)于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對(duì)細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn),直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問(wèn)題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過(guò)有人說(shuō)EDTA對(duì)細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡(jiǎn)單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞! 6-10B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ChA-1細(xì)胞、OVCA8細(xì)胞、SU-86-86細(xì)胞 NCIH650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K7M2 wt細(xì)胞、T 24細(xì)胞、MDA-361細(xì)胞 JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 Cl 30細(xì)胞、RS4;11細(xì)胞、RC92A細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 NCI-H1666 epithelioid cells人肺支氣管癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時(shí)因安剖未封嚴(yán),浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。3.剪開(kāi)紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺(tái)上打開(kāi)蓋,用吸管吸出細(xì)胞懸液,裝入離心管中,再補(bǔ)加10ml培養(yǎng)液,吹打使細(xì)胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細(xì)胞時(shí),處理方式為:在寄送過(guò)程中,為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡,T25 flask均加滿(mǎn)培養(yǎng)基。請(qǐng)檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況和有無(wú)污染現(xiàn)象,若有任何問(wèn)題,不要打開(kāi)蓋子,請(qǐng)立即通知細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細(xì)胞回溫至37°C,并讓運(yùn)送過(guò)程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長(zhǎng)。隔天后,于無(wú)菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中,或細(xì)胞已長(zhǎng)滿(mǎn)盤(pán),則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:4傳代;每周換液2次。 KU1919細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC9細(xì)胞、NMC-G1細(xì)胞、Panc 04.03細(xì)胞 NBL-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL952細(xì)胞、H-2085細(xì)胞、WSUDLCL2細(xì)胞 H-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞、ZR751細(xì)胞、NCI-H661細(xì)胞 SNU-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2E8細(xì)胞、JurkatE6-1細(xì)胞、X63-Ag8.653細(xì)胞 GM16136細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGM1細(xì)胞、MUS-M1細(xì)胞、C3H10T1-2細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 NCI-H1666 epithelioid cells人肺支氣管癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng),松散 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞 細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過(guò)72小時(shí));2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。 brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NH-6細(xì)胞、RPMI 7951細(xì)胞、OCI-Ly 3細(xì)胞 U-hth74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEL-526細(xì)胞、HuT-78細(xì)胞、P3HR1細(xì)胞 NCI H157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-606-T細(xì)胞、HPAF/CD18細(xì)胞、KGN細(xì)胞 KM H-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1838細(xì)胞、Kit 225細(xì)胞、AZ521細(xì)胞 AN3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kasumi 1細(xì)胞、alpha TC1 clone 6細(xì)胞、MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞 NCI-H-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BMDC細(xì)胞、HOS-TE85細(xì)胞、M619細(xì)胞 CF PAC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-DLCL(2)細(xì)胞、NCI-H841細(xì)胞、TE12細(xì)胞 L-cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC116細(xì)胞、TW-039細(xì)胞、NCI-H1755細(xì)胞 OCI-LY-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 445細(xì)胞、L6細(xì)胞、SMMC7721細(xì)胞 Farage Original Line細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE-Van細(xì)胞、HO1N1細(xì)胞、HEL 299細(xì)胞 NCI-H1666 epithelioid cells人肺支氣管癌細(xì)胞系 HCS2/8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUSM-1細(xì)胞、CHP126細(xì)胞、H-2227細(xì)胞 Glioma-261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHP 10-3細(xì)胞、H2141細(xì)胞、COLO 205細(xì)胞 DU_145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ETCC-007細(xì)胞、FT-293細(xì)胞、RCC 7860細(xì)胞 HS 683T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H522細(xì)胞、U266細(xì)胞、3T3-Swiss細(xì)胞 L-5178-Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone 929細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞、GM03569D細(xì)胞 Jurkat 77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QBI-293A細(xì)胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞、Kupffer細(xì)胞 ME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE9細(xì)胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞、NCI-H2228細(xì)胞 C8161細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1238細(xì)胞、H196細(xì)胞、FO [Mouse myeloma]細(xì)胞 SKGIIIA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Strain L-929細(xì)胞、MDAMB415細(xì)胞、H1672細(xì)胞 HMrSV5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL11細(xì)胞、NCIH1437細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞 OCI-Ly07細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-175細(xì)胞、Nthy-ori 3-1細(xì)胞、U118MG細(xì)胞 A549 ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC1細(xì)胞、NCI-H2023細(xì)胞、NCIH2122細(xì)胞 OPM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92MI細(xì)胞、OVCAR-420細(xì)胞、MSC細(xì)胞 OCILY-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8-653細(xì)胞、WM 239A細(xì)胞、Cor L51細(xì)胞 SN12-PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc08.13細(xì)胞、CNE-1細(xì)胞、108CC15細(xì)胞 Hs695細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB4細(xì)胞、C-33-A細(xì)胞、M109細(xì)胞 RPTEC TERT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:786O細(xì)胞、H2591細(xì)胞、CF PAC-1細(xì)胞 NIHOVCAR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL62891細(xì)胞、H2052細(xì)胞、MC-116細(xì)胞 KU812-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:639V細(xì)胞、B35細(xì)胞、Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞 Rat Lung-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-07e細(xì)胞、OCI Ly3細(xì)胞、Mv.1.Lu細(xì)胞 MC/9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A7r5細(xì)胞、H-1355細(xì)胞、CMEC/D3細(xì)胞 KU-812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC14細(xì)胞、2008細(xì)胞、NKT細(xì)胞 KLN205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa S 3細(xì)胞、ES-2細(xì)胞、H9c2 (2-1)細(xì)胞 MIMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780細(xì)胞、CCLP1細(xì)胞、SW-780細(xì)胞 WTRL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AAV-293細(xì)胞、H-920細(xì)胞、DanG細(xì)胞 Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs822T細(xì)胞、SNU-449細(xì)胞、U266 B1細(xì)胞 SNU-423細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE-2細(xì)胞、SRA01/04 (HLE)細(xì)胞、CTLA4 Ig-24細(xì)胞 CCRF-CEM C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIMEC細(xì)胞、FaDu細(xì)胞、HCT-GEO細(xì)胞 GM02132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-620細(xì)胞、VMM5A細(xì)胞、A549ATCC細(xì)胞 MNNG-HOS (Cl#5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31-FUJ細(xì)胞、HCGC細(xì)胞、Hi-5細(xì)胞 WTRL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AAV-293細(xì)胞、H-920細(xì)胞、DanG細(xì)胞 HTR8/SVneo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS7細(xì)胞、P19細(xì)胞、Hela-Ap-1細(xì)胞 CAL 12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS-TE85細(xì)胞、SW-1990細(xì)胞、MES-SA/Dx-5細(xì)胞 CHL/IU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-747細(xì)胞、DoTc2細(xì)胞、MOLP8細(xì)胞 MDAMB436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1990細(xì)胞、UMR-106細(xì)胞、SJRH-30細(xì)胞 LOU-NH91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-33細(xì)胞、MDA-MB-468細(xì)胞、RINm-5F細(xì)胞 4T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC40細(xì)胞、T173細(xì)胞、SK_HEP1細(xì)胞 SK_N_BE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSTO-211 H細(xì)胞、NCI-H865細(xì)胞、NCIH2126細(xì)胞 SNU-119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL7702細(xì)胞、IBRS2細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞 Epstein-Barr-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHG44細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞、NEC-8細(xì)胞 Neuro 2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A10細(xì)胞、HCC-95細(xì)胞、OLN 93細(xì)胞 HEI-193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNSC細(xì)胞、NIH:OVCAR-5細(xì)胞、NCI-H1819細(xì)胞 VMM39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A498細(xì)胞、SK-ML2細(xì)胞、KCL22細(xì)胞 HepG2-luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNO1細(xì)胞、TE 671細(xì)胞、NRK clone 49F細(xì)胞 SCC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2135細(xì)胞、CCD-841-CoTr細(xì)胞、NIH:OVCAR-10細(xì)胞 ZYM-SVEC01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB-1細(xì)胞、HOS-143B細(xì)胞、KTCTL-140細(xì)胞 NCI-BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC251細(xì)胞、TE15細(xì)胞、BJ1細(xì)胞 SUDHL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-119細(xì)胞、JIMT-1細(xì)胞、COS1細(xì)胞 HCC70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1819細(xì)胞、KHYG-1細(xì)胞、MCF-10 Attached細(xì)胞 MDA MB 453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-G63細(xì)胞、T47D:A細(xì)胞、C32-mel細(xì)胞 OCI-Ly 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H220細(xì)胞、253J-BV細(xì)胞、Tsup-1細(xì)胞 NCI-H1666 epithelioid cells人肺支氣管癌細(xì)胞系 BT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 19細(xì)胞、SHP-77細(xì)胞、SCC25細(xì)胞 MFE296細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL1細(xì)胞、P3-X63Ag8.653細(xì)胞、Henrietta Lacks cells細(xì)胞 CMT 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