"SW948 Adherent人結腸腺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染:懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染,其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理,先形成脂質(zhì)體-DNA復合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內(nèi)吞作用,將目的基因?qū)爰毎麅?nèi),而脂質(zhì)體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍,所以,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次,脂質(zhì)體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外,懸浮細胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率,可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法,針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的,電擊對細胞有一定的損傷,選用具有細胞膜修復功能的電轉(zhuǎn)染試劑,可以將電擊對細胞的傷害降到最低,懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染,選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
SW948 Adherent人結腸腺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。
A549細胞系相關產(chǎn)品:D-341Med細胞、38C13細胞、CATHa細胞
HuT-102細胞系相關產(chǎn)品:102PT細胞、SK-UT-1細胞、P3-X63Ag8細胞
DV-90細胞系相關產(chǎn)品:Eca-109細胞、Wayne State University-Head and Neck 13細胞、Duck embryo細胞
細胞傳代方法:1:2—1:5傳代,每周換液1-2次
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
LP1細胞系相關產(chǎn)品:SW480細胞、HCC 94細胞、AML12細胞
PC-9/GR細胞系相關產(chǎn)品:PC 61-5-3細胞、NCI-H2172細胞、MDA MB 134VI細胞
SW-527細胞系相關產(chǎn)品:293E細胞、Capan-1細胞、PASMCS細胞
細胞生長特性:貼壁生長
SW948 Adherent人結腸腺癌細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
傳代培養(yǎng)及其操作步驟:原代細胞培養(yǎng)成功以后,需要進行分離培養(yǎng),否則細胞會因生存空間不足或密度過大,營養(yǎng)障礙,影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株),可以進行細胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料,便于實驗?!静僮鞑襟E】1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液;2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜;3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進行消化,2~5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察,當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后,應立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶內(nèi)加入Hanks液少量,輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化;5)使用彎頭吸管,吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液,按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞,使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔,以防用力過猛損傷細胞;6)用計數(shù)板計數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng);7)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般2~3d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?!咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間,消化時間過短時,細胞不宜從瓶壁脫落,過長的消化會導致細胞脫落、損傷;2)掌握好消化濃度,當消化液濃度過高時,消化時間應縮短,過低時細胞消化時間相對延長。
H250細胞系相關產(chǎn)品:VM-CUB1細胞、RERF-LC-MS細胞、NU-GC-2細胞
CMT167細胞系相關產(chǎn)品:NS1/1-Ag4.1細胞、LIM-1215細胞、MC/CAR細胞
alpha TC1-6細胞系相關產(chǎn)品:Namalva細胞、H-1688細胞、NCIH2228細胞
MOLT 16細胞系相關產(chǎn)品:R.K.13細胞、HANK1細胞、NS20-Y細胞
D-341 Med細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR8/ADR細胞、EOC-20細胞、HuCC-T1細胞
H-2066細胞系相關產(chǎn)品:OVCA433_Bast細胞、RKO-AS-45-1細胞、Panc 02細胞
Hs940T細胞系相關產(chǎn)品:A549/ATCC細胞、OCI AML5細胞、SGC-996細胞
H1975細胞系相關產(chǎn)品:GM0637細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞
BT-483細胞系相關產(chǎn)品:C8161細胞、JROECL33細胞、U-87-MG細胞
SW 48細胞系相關產(chǎn)品:HCe-8693細胞、MFHL-2細胞、Detroit-562細胞
EFO27細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2171細胞、H1417細胞、Balb/c 3T3細胞
UWB1-289細胞系相關產(chǎn)品:A2780/CP細胞、HHFK細胞、DBTRG-05MG細胞
NCI-H1155細胞系相關產(chǎn)品:H-146細胞、MDCK-II細胞、RSMC細胞
SW948 Adherent人結腸腺癌細胞系
SW-756細胞系相關產(chǎn)品:CD-18細胞、H250細胞、PTK2細胞
OCI-LY-10細胞系相關產(chǎn)品:Tb1Lu細胞、OAW 42細胞、Tn-5細胞
SCC VII細胞系相關產(chǎn)品:AN3-CA細胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞、MFE296細胞
SCC VII細胞系相關產(chǎn)品:AN3-CA細胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞、MFE296細胞
OV 2008細胞系相關產(chǎn)品:FOXNY細胞、HFF-1細胞、NCI-H78細胞
3LL細胞系相關產(chǎn)品:HT-22細胞、PA-TU S細胞、SH-SY5Y Parental細胞
X63-AG 8.653細胞系相關產(chǎn)品:LAN-5細胞、OVCAR433細胞、H-157細胞
H1618細胞系相關產(chǎn)品:TE-12細胞、TCMK-1細胞、H810細胞
SKG IIIa細胞系相關產(chǎn)品:HS578T細胞、NIH:OVCAR-3細胞、WEHI 3細胞
Vero E6細胞系相關產(chǎn)品:HL-60細胞、OCIAML3細胞、HOS TE 85細胞
OC-3-VGH細胞系相關產(chǎn)品:SUDHL-6細胞、PJ34細胞、SUD-4細胞
KM12-SM細胞系相關產(chǎn)品:143B TK-細胞、Potorous tridactylus Kidney 2細胞、HLFa細胞
Kit-225-K6細胞系相關產(chǎn)品:OVCA-420細胞、H4IIEC3細胞、ABE8.1/2細胞
P3X63NS1細胞系相關產(chǎn)品:KYSE 30細胞、RSC 96細胞、VP 267細胞
LAD-2細胞系相關產(chǎn)品:293FT細胞、PLC-PRF-5細胞、TB1 Lu細胞
NCI-H2029細胞系相關產(chǎn)品:Ku812細胞、P30 OHK細胞、SK-NEP-1細胞
253J-Bladder-V細胞系相關產(chǎn)品:LA 4細胞、KMST-6細胞、PAI細胞
MFE 296細胞系相關產(chǎn)品:SK UT 1細胞、RPMI-7666細胞、NCI-SNU-1040細胞
Mel-624細胞系相關產(chǎn)品:CCK81細胞、OCI-Ly8細胞、KYSE-30細胞
LS 174T細胞系相關產(chǎn)品:HS 445T細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞、L 540細胞
HuT-78細胞系相關產(chǎn)品:LLC-PK1細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞、LS-513細胞
KM12 SM細胞系相關產(chǎn)品:Madin Darby Bovine Kidney細胞、SCH細胞、GAK細胞
C-6細胞系相關產(chǎn)品:MRC9細胞、JIMT細胞、GM-637細胞
MRMT-1細胞系相關產(chǎn)品:HOEC細胞、SNU-638細胞、CORL88細胞
MV-1-Lu細胞系相關產(chǎn)品:BIU-87/Adr細胞、NOZC-1細胞、T 98 G細胞
T. T細胞系相關產(chǎn)品:Experimental Mammary Tumour-6細胞、FDC-P1細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞
Capan 2細胞系相關產(chǎn)品:CHO-K1細胞、NCI-H128細胞、ACC-3細胞
B16-F10-BL6細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR.4細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NP69細胞
ASH-3細胞系相關產(chǎn)品:H-1703細胞、SW756細胞、NCI-H2342細胞
95D細胞系相關產(chǎn)品:OCUM-1細胞、C4-2細胞、NTHY-ORI3.1細胞
HPMC細胞系相關產(chǎn)品:FF-WT-BJ細胞、HEL-92_1_7細胞、RFL6細胞
SN-12C細胞系相關產(chǎn)品:BRL 3A細胞、KM.12細胞、MCF7細胞
GM00346B細胞系相關產(chǎn)品:ReNcell CX細胞、RCC10 RGB細胞、TR-146細胞
SUP-T1細胞系相關產(chǎn)品:N-2a細胞、A-431細胞、SN12C細胞
HS-695T細胞系相關產(chǎn)品:HCV29細胞、SCC 25細胞、L M (TK-)細胞
NCI-H498細胞系相關產(chǎn)品:RPE1-hTERT細胞、B16 subline B78細胞、22Rv-1細胞
OE-33細胞系相關產(chǎn)品:MEC1細胞、Hs 934.T細胞、KM12 SM細胞
G-Olig2細胞系相關產(chǎn)品:C3H10T1-2細胞、SNUC1細胞、Calu 6細胞
YH-13細胞系相關產(chǎn)品:HEp-2細胞、NT2細胞、SHEE細胞
NCI-H78細胞系相關產(chǎn)品:SK LU 1細胞、PK-136細胞、HEL-1細胞
HSF2細胞系相關產(chǎn)品:ssMCF-7細胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、NCI-H2196細胞
Hepatoma 22細胞系相關產(chǎn)品:GM03190A細胞、NCI-H1563細胞、OCILY-19細胞
SW948 Adherent人結腸腺癌細胞系
SKHEP-1細胞系相關產(chǎn)品:SNT-8細胞、NCI-H1436細胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞
SH-SY5Y細胞系相關產(chǎn)品:HMEC1細胞、COR L279細胞、ES-2細胞
OCI Ly3細胞系相關產(chǎn)品:Tokyo Medical and Dental university 8細胞、MDAMB436細胞、CESS細胞
GLAG-66細胞系相關產(chǎn)品:Molm 13細胞、RPMI7666細胞、SV-HUC-1細胞
SNK-6細胞系相關產(chǎn)品:Turbot Embryonic Cell line細胞、HepaRG細胞、HL1細胞
H1618細胞系相關產(chǎn)品:TE-12細胞、TCMK-1細胞、H810細胞
16HBE細胞系相關產(chǎn)品:MC38細胞、RASMC細胞、SNB.19細胞
IOSE-Van細胞系相關產(chǎn)品:VM Cub 1細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞、HMO6細胞
H2170細胞系相關產(chǎn)品:MBdSMC細胞、IM95細胞、MADB 106細胞
X63-Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品:LU451細胞、WM-239A細胞、MDA-175細胞
HR-1細胞系相關產(chǎn)品:HEK293F細胞、hRPTC細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞
alpha TC1-6細胞系相關產(chǎn)品:Namalva細胞、AtT 20細胞、HPAC細胞
"