"SW948 Cell:人結(jié)腸腺癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
SUP-T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-2a細胞、A-431細胞、SN12C細胞
UMUC-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCAEC細胞、NS-20Y細胞、CTLL2細胞
NBLAN5T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KFB細胞、HEL-299細胞、CEK細胞
Ketr3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRA19細胞、VE細胞、RPMI7666細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
SW948 Cell:人結(jié)腸腺癌細胞系
細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2—1:5傳代,每周換液1-2次
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在1-2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NCI-H510A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-292 clone A141B1細胞、H209細胞、CL1.0細胞
Becker細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI38細胞、L cell line細胞、PCI:SG231細胞
SUP-T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-2a細胞、A-431細胞、SN12C細胞
MUS-M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE-37細胞、PCI-4M細胞、BNCL2細胞
H1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT 125細胞、OSK-1細胞、NK-10A細胞
細胞生長特性:貼壁生長
SW948 Cell:人結(jié)腸腺癌細胞系
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞!
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
HUT 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1666細胞、SNU-475細胞、MEG-01細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RINm-5F細胞、3T3-Swiss albino細胞、EBC1細胞
HCA-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP267細胞、Hep G2-Luc細胞、PBL細胞
SVEC 4-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-711細胞、RMG-1細胞、GLC-82細胞
LLCPK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NMC細胞、B-CPAP細胞、HBEpiC細胞
SH-SY5Y Parental細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-70細胞、YD38細胞、Calu6細胞
NCI-H1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL2H3細胞、RA細胞、NCI-H596細胞
SW948 Cell:人結(jié)腸腺癌細胞系
293H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMC-1細胞、HEK (AD293)細胞、MSB-1細胞
HSC/mHSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryonic Kidney 293細胞、Danio rerio Gill細胞、hESC細胞
H220細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-676細胞、L cells細胞、EL 4細胞
CWR22-R1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bat lung細胞、MCF-7B細胞、LS-411細胞
BS-C-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U87-MG細胞、RCC-4細胞、H-1693細胞
Hs274T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1437細胞、CAOV3細胞、PC-9/S1細胞
H378細胞系相關(guān)產(chǎn)品:McA-RH 8994細胞、H-929細胞、293H細胞
OVCAR432細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU-65M細胞、Malme-3M細胞、H-2030細胞
NRK52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1500細胞、SK-MEL-2細胞、SKNEP1細胞
NRK52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1500細胞、SK-MEL-2細胞、SKNEP1細胞
HEL-92-1-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-70細胞、Panc-3_27細胞、BNL.1ME A.7R.1細胞
GM00637I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH292細胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細胞、HS-940-T細胞
BV-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKG IIIa細胞、INS1-E細胞、Mo7e細胞
Huh7.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs819.T細胞、L-WRN細胞、Mono Mac6細胞
H-2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VB細胞、KE-39細胞、KP-N-RT-BM細胞
NCIH1693細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-2 B細胞、Metastatic Variant-522細胞、COLO-320DM細胞
BJAB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF767細胞、SkMel31細胞、Hs739T細胞
BGC-823細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa17C細胞、7404細胞、H-2106細胞
CCD-1095Sk細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC 9細胞、hFOB 1.19細胞、HCO細胞
5637細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2T細胞、H292細胞、SUP T1細胞
HEL-92-1-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-70細胞、Panc-3_27細胞、BNL.1ME A.7R.1細胞
NK92-MI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPP 89細胞、CHP 126細胞、BRL3A細胞
Epstein-Barr-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHG44細胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細胞、NEC-8細胞
Panc02-H0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-08-13細胞、Y-1細胞、VA-ES-BJ細胞
BEL-7405細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1793細胞、OSKM-1細胞、Kit225/K6細胞
KTC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 8226細胞、UMC11細胞、A 375細胞
HPDLF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2935細胞、MLO-Y4細胞、J774 A.1細胞
BMF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK10細胞、SW 1990細胞、N9細胞
OVTOKO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL-65細胞、Tn 5B1-4細胞、ketr 3細胞
beta TC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI1788細胞、HUVEC-C[HUVEC]細胞、STTG1細胞
MHCC-LM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-28I2細胞、JROECL19細胞、Hs934T細胞
Cates-1B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK 21細胞、AAV-293細胞、DC 2.4細胞
190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 888.T細胞、OCM1A細胞、Calu 3細胞
Mahlavu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/0-Ag14細胞、MB468細胞、HO-1-N-1細胞
HMrSV5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL11細胞、NCIH1437細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞
NCIH1650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUTZ1細胞、Anip973細胞、32Dc3細胞
MRMT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOEC細胞、SNU-638細胞、CORL88細胞
H676B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM T4細胞、AN3細胞、ROS1728細胞
TCMK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT.64細胞、OCI Ly1細胞、H-23細胞
Bovine ENDometrial cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N9細胞、MDA-MB-134-VI細胞、CF Pac1細胞
T 24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB415細胞、ECC 10細胞、SUNE1細胞
KP4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS653細胞、F9細胞、VP229細胞
253J-Bladder-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA 4細胞、KMST-6細胞、PAI細胞
SW948 Cell:人結(jié)腸腺癌細胞系
J-774細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR 90細胞、A9細胞、Rat-1細胞
FU-97細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCl-H157細胞、MAD109細胞、Hs819T細胞
LWnt-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549 ATCC細胞、Epstein-Barr-3細胞、DMS 114細胞
WSU-DLCL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1.289+BRCA1細胞、MuM-2C細胞、H.Ep.-2細胞
WiDr/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI-Rb1細胞、MDCK (NBL-2)細胞、Hs-343-T細胞
BS-C-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U87-MG細胞、RCC-4細胞、H-1693細胞
GM3570細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-729細胞、OCILY10細胞、GM02132細胞
L(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC57G細胞、SUNE-1細胞、RKO-AS-45-1細胞
MES-SA/Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Glioma-261細胞、B16-F1細胞、HANK1細胞
HEC-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Oka-C1細胞、SK Col 1細胞、OEC33細胞
KMST-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DF-1細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、NCIH441細胞
P30-OHKUBO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3 (clone A31)細胞、Cloudman S91 melanoma細胞、P3HR1細胞
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