"RTE Adherent大鼠氣管上皮細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
傳代的操作步驟注意事項:1)操作前要洗手,進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈,操作在火焰附近進行,耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼,金屬器械燒灼時間不能太長,以免退火,并冷卻后才能夾取組織,吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼,以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準確敏捷,但又不能太快,以防空氣流動,增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分,工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細胞傳代的操作步驟:1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許,以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘,當發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)回縮,細胞間隙增大后,立即終止消化。4)吸除消化液,向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升,輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶,把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時,動作要輕,以免把已松動的細胞沖掉流失,如用胰蛋白酶液單獨消化,吸除胰蛋白酶液后,可不用Hanks液沖洗,直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細胞,使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后,把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中,置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細胞傳代的操作步驟:1)吸出細胞培養(yǎng)液,放入離心管中,離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液,加入適量之新鮮培養(yǎng)基,混和均勻后,依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中,以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
RTE Adherent大鼠氣管上皮細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
常規(guī)的細胞實驗(增殖,凋亡,遷移,分化之類的),受消化影響不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數(shù)實驗,比如病毒包裝,對細胞代數(shù),對細胞狀態(tài)要求極高。這個時候,胰酶消化,就是潤洗,都會對細胞包裝病毒的能力有影響,傳代次數(shù)一多,細胞包裝能力就會逐漸下降(當然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化,用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性,來使得細胞脫離基質(zhì)附著表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。許多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白,trypsin切割ECM的一些負責粘連和附著的蛋白,而EDTA通過螯合Ca離子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者對付特別難消化的細胞,添加多一些EDTA,就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果10min還消化不徹底的話),而應(yīng)該想其它辦法;PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌,是常見的操作,因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學問可以講,對于一些難消化細胞,那么可以配制不含Ca,Mg離子的PBS,因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞,不需要配制如此溶液。
DMS53細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca-Ski細胞、L428細胞、H1836細胞
SW780細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV-21G細胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞、Vero E6細胞
RAW264細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TYK-nu細胞、CD18細胞、HIEC6細胞
細胞傳代方法:1:3傳代,3-4天換液一次
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:95D細胞、Hs 940.T細胞、UACC812細胞
SP-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FBHE細胞、U-226AR1細胞、BNL 1ME A.7R.1細胞
SVG p12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1688細胞、HEP3B2細胞、CAL78細胞
細胞生長特性:貼壁生長
RTE Adherent大鼠氣管上皮細胞系
細胞形態(tài)特性:多角
養(yǎng)了幾年細胞,說一點自己培養(yǎng)細胞方面的看法:1)培養(yǎng)細胞前,可以看看細胞特點說明書,包括細胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等;2)不同細胞生長周期不同,有的生長很快,比如說MDA-MB-231,傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了,有的又是特別慢,等的人心焦,BT474就是,傳代是一分二,復(fù)蘇起始的時候兩周多才能長滿,所以就要在培養(yǎng)細胞的過程中多多摸索了;3)對于嬌弱的細胞,就得細心呵護了,胰酶消化不能過久,吹得時候要輕柔,離心時候也要注意轉(zhuǎn)速和時間,每天都要去看一下細胞,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細胞生長狀況;4)凍存細胞復(fù)蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基;5)培養(yǎng)箱隔一段時間徹底用酒精棉擦洗一次;6)養(yǎng)細胞的教訓:不能偷懶!細胞虐我千百遍,我待細胞如初戀。1)不管買的細胞、惠贈的細胞,剛拿到手趕緊做兩件事:檢測是否有支原體污染; 迅速擴增凍存;2)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉,特別是當你養(yǎng)了很多種細胞時; 細菌污染,真菌污染很容易發(fā)現(xiàn),支原體污染的話,細胞會長的慢,買個支原體檢測的kit定期檢測一下;3)傳代細胞日常的值日清潔是必須的,此外還要定期熏蒸;4)細胞的傳代一定要規(guī)律,保持相同的confluency和傳代時間間隔,不要隨心所欲或者拖延;5)注意個人衛(wèi)生。
NCIH1836細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-451Lu細胞、HUT-125細胞、OVCAR 433細胞
H-211細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 190細胞、HT1197細胞、CEM C7細胞
NCI660細胞系相關(guān)產(chǎn)品:87 MG細胞、NCI-H23細胞、MV 4;11細胞
32D/cl3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4-II-E-C3細胞、Hs746-T細胞、EM-3細胞
LN382細胞系相關(guān)產(chǎn)品:526mel細胞、PL5細胞、GC1-SPG細胞
RKOE6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 190PT細胞、BCECs細胞、BC-3-H-I細胞
Functional Liver Cell-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OK-WT細胞、BC-3H-1細胞、CAMA1細胞
COLO679細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EPC細胞、Hs-940細胞、SCH細胞
NCIH2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品:74Int細胞、HPAFII細胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細胞
SHG 44細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HD-LM-2細胞、Hs840T細胞、RT4-D6P2T細胞
ELD-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNEP-1細胞、22Rv-1細胞、BT-483細胞
NKL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞、C4-2 B細胞、SW 1222細胞
3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1-Ag 4/1細胞、LTEP-a2細胞、CCD1112Sk細胞
RTE Adherent大鼠氣管上皮細胞系
SNU-423細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE-2細胞、SRA01/04 (HLE)細胞、CTLA4 Ig-24細胞
NCI-ADR-RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wayne State University-Head and Neck 13細胞、RPMI1846細胞、WEHI164細胞
RPMI-1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs940.T細胞、NCI-HUT-125細胞、HUASMC細胞
RPMI-1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs940.T細胞、NCI-HUT-125細胞、HUASMC細胞
Molm 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA2-cloneD1細胞、PNT1/A細胞、SK-NSH細胞
C17.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U 138 MG細胞、Eca109細胞、U266S細胞
SK-MEL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HemECs細胞、HUT-28細胞、SW 403細胞
Eca 109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO8910/PM細胞、PC 12細胞、SNU869細胞
Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHEE細胞、NCI-H660細胞、NS-1-Ag4-1細胞
MOLT 16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R.K.13細胞、HANK1細胞、NS20-Y細胞
NRCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fu97細胞、8505C細胞、COLO320HSR細胞
MEL-526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tj-905細胞、HEK 293-H細胞、WILL2細胞
BEL 7402細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8/SVneo細胞、SW403細胞、NT-2細胞
MKN-74細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMS 1598細胞、IHHA-1細胞、alpha-TC1-6細胞
CL11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH6細胞、P3-X63.Ag8.653細胞、HL7702細胞
HSC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M-2B4細胞、OVCAR.8細胞、Ca Ski細胞
SKRC-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1155細胞、SPDC-CCL141細胞、MOLT-3細胞
H820細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP-100細胞、PC 61細胞、IAR-20細胞
H1703細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DAKIKI Clone 1細胞、MDA1386細胞、CACO2細胞
LL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH-DF 1細胞、HL-60細胞、SW 1116細胞
Kit225-K6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H358細胞、Okayama University Medical School-27細胞、HeLa.S3細胞
JB6 [Mouse]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK49F細胞、CL1-5細胞、ST-2細胞
THP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBVP細胞、WM115-mel細胞、MUTZ3細胞
H1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 2細胞、NRK clone 49F細胞、D6P2T細胞
PTK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JIII細胞、OVCAR3細胞、MDA-MB-435 S細胞
NRK49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN4741細胞、GM04678細胞、3T3-L1 ad細胞
Keio University-19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF539細胞、RPMI no 8226細胞、IHH-4細胞
Hs 636.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFO-27細胞、HCC1428細胞、PAa細胞
KMB17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Verda reno細胞、CNE-2Z細胞、801-D細胞
H-146細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1359細胞、H64細胞、KALS1細胞
Panc_08_13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-112CoN細胞、Jurkat 77細胞、PCI-4M細胞
Ca-Ski細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIM1215細胞、KPNRTBM1細胞、L-1210細胞
UWB1.289細胞系相關(guān)產(chǎn)品:118MG細胞、NCIH196細胞、FD-LSC-1細胞
B16/BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ketr 3細胞、Huh-7.5細胞、RWPE2細胞
BC-024細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-UI細胞、SUM 159細胞、MV-1-Lu細胞
CT26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-EMC-SS細胞、GM03569B細胞、H-526細胞
SUM 159PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02132細胞、TE-5細胞、P3-X63Ag8.653細胞
LM(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0015細胞、373 MG細胞、B/C3T3細胞
C2-C12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AQ-Mel細胞、WEHI3細胞、KYSE-450細胞
CAL85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-684細胞、GM03569D細胞、SGC-7901/DDP細胞
NCI-H747細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C 6細胞、BIC-1細胞、MDAMB134VI細胞
Hs611T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F0細胞、MFD-1細胞、NCIH1385細胞
RTE Adherent大鼠氣管上皮細胞系
GM03569D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSTO-211H細胞、MDA MB 175 VII細胞、HL-60 clone15細胞
FRTL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-675-T細胞、P3X63Ag8.653細胞、SO-RB50細胞
COLO-320DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H510A細胞、L-cell細胞、PK-15細胞
BALL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepG2細胞、SACC-LM細胞、LCLC-103H細胞
NT2D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GAK細胞、NL20SV細胞、D10細胞
OACP4 C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1581細胞、LLCPK1細胞、MOLT4細胞
KS-1 [Human glioblastoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL 7405細胞、BC-021細胞、TE-7細胞
RT4-D6-P2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI.1細胞、H-2196細胞、AR-42J細胞
HOK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T98 G細胞、HSC-2細胞、SW962細胞
BMU-S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco 2細胞、NCI-H524細胞、NCIH841細胞
MFE-296細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PIG1細胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細胞、RTMC細胞
NCI660細胞系相關(guān)產(chǎn)品:87 MG細胞、HBZY1細胞、U-226AR1細胞
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