"MIN6 Adherent小鼠胰島β細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當細胞剛開始脫落時，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做好標記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
MIN6 Adherent小鼠胰島β細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代培養(yǎng)(消化法)標準操作規(guī)程【原理】細胞在培養(yǎng)瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細胞能繼續(xù)生長，同時也將細胞數(shù)量擴大，就必須進行傳代(再培養(yǎng))。傳代培養(yǎng)也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養(yǎng)細胞進行各種實驗的必經(jīng)過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以，而貼壁細胞需經(jīng)消化后才能分瓶?！静牧虾驮噭浚?無菌生理緩沖液(PBS)；２)胰酶-EDTA溶液(０.０５%胰酶-０.５３mM EDTA-４Na): 以１０ml分裝于１５ ml無菌離心管中，保存于–２０℃，使用前放在３７℃水槽回溫；３)新鮮培養(yǎng)基；４)無菌吸管/離心管/培養(yǎng)瓶【傳代前準備操作】１)預熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入３７℃水浴鍋內(nèi)預熱；２)用７５％酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；３)正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且可減少污染；４)點燃酒精燈：注意火焰不能太?。唬?準備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶；６)取出預熱好的培養(yǎng)用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內(nèi)；７)從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細胞：注意取出細胞時要旋緊瓶蓋，用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面，再在鏡下觀察細胞；８)打開瓶口：將各瓶口一一打開，同時要在酒精燈上燒口消毒。
WiDr/S細胞系相關產(chǎn)品：WERI-Rb1細胞、MDCK (NBL-2)細胞、Hs-343-T細胞
LIM1215細胞系相關產(chǎn)品：HCC44細胞、HL60細胞、MDAMB468細胞
B6Tert-1細胞系相關產(chǎn)品：CEM-0細胞、EL4細胞、SNT8細胞
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
LU65細胞系相關產(chǎn)品：130 T細胞、H2405細胞、SW 1573細胞
UMC-11細胞系相關產(chǎn)品：Human Embryo Kidney-2細胞、TSCCa細胞、SNU-620細胞
GalK1細胞系相關產(chǎn)品：CaEs17細胞、T/G HA VSMC細胞、MB-49細胞
細胞生長特性：貼壁生長
MIN6 Adherent小鼠胰島β細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
【細胞培養(yǎng)中支原體、黑蛟蟲、真菌的污染情況總結(jié)】支原體：黑色的，好象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁，原體感染，國內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中最常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后，細胞病變不很明顯，只是慢慢死去。用泰樂菌素，獸用支原體病的藥，但可用于細胞培養(yǎng)，無任何不良反應。如果作為常用的抗生素的話, 建議用８ug/ml的濃度；黑蛟蟲：可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會太影響，細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態(tài)良好，且觀測到的運動物無明顯增多，且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化，可在同一批號的血清養(yǎng)的細胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響，在細胞增殖旺盛之后會自然消失，除更換血清外無須特殊處理。建議如果細胞有可能是此種污染的話，可以增加細胞的種板密度，以提高細胞的生存率；真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細胞碎片分不清，慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢，不象細菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了，也很難救活了。
624mel細胞系相關產(chǎn)品：COLO206細胞、K-562細胞、HUT-28細胞
Mc Coy細胞系相關產(chǎn)品：FHs74 Int細胞、526細胞、KASUMI1細胞
MESSA-DX5細胞系相關產(chǎn)品：GLC-15細胞、PLA801D細胞、OCI-AML2細胞
Panc_05_04細胞系相關產(chǎn)品：JIMT1細胞、H2172細胞、McARH7777細胞
CNE1細胞系相關產(chǎn)品：OE33細胞、KMS-11細胞、HEK-293細胞
SKCol1細胞系相關產(chǎn)品：AtT 20細胞、NCIH250細胞、OVCAR-8/ADR細胞
BMSC/hBMSCs細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-398細胞、H-820細胞、251MG細胞
HPAF-I細胞系相關產(chǎn)品：KM.12細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞、Hs 832(C).T細胞
H250細胞系相關產(chǎn)品：VM-CUB1細胞、RERF-LC-MS細胞、NU-GC-2細胞
NSC-34細胞系相關產(chǎn)品：CMK細胞、FRhK-4細胞、SKRC 39細胞
NKT細胞系相關產(chǎn)品：MASMC細胞、Tca8113細胞、SKMEL5細胞
Molm14細胞系相關產(chǎn)品：CAL78細胞、HCE-2 [50.B1]細胞、HS 445T細胞
KYSE 180細胞系相關產(chǎn)品：H2108細胞、OVCAR-8細胞、SBC-3細胞
MIN6 Adherent小鼠胰島β細胞系
HMEC1細胞系相關產(chǎn)品：LTEP-sm 1細胞、PCI-4B細胞、MDA-MB-134 VI細胞
TE-11細胞系相關產(chǎn)品：HuPT4細胞、COV434細胞、RPMI6666細胞
KOPN-8細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1954細胞、FRO 81-2細胞、SW 1088細胞
KOPN-8細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1954細胞、FRO 81-2細胞、SW 1088細胞
TALL1細胞系相關產(chǎn)品：VERO76細胞、293-H細胞、SHZ-88細胞
UPCI:SCC90細胞系相關產(chǎn)品：Jurkat (clone E6-1)細胞、NCIH1155細胞、GM00637B細胞
RDES-1細胞系相關產(chǎn)品：HuT 78細胞、U-373-MG細胞、C-Lu-65細胞
PNEC30細胞系相關產(chǎn)品：Ly7細胞、FHC細胞、BCPAP細胞
HCC-70細胞系相關產(chǎn)品：Swiss/3T3細胞、HBL100細胞、C8D1A細胞
Hep 3B細胞系相關產(chǎn)品：Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞、SNGM細胞、HEK 293 c18細胞
SW948細胞系相關產(chǎn)品：CL1-5細胞、Ramos 2G6.4C10細胞、Hs895T細胞
H-1688細胞系相關產(chǎn)品：MDA330細胞、LLC-PK-1細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞
CHP100細胞系相關產(chǎn)品：NIH:OVCAR-5細胞、NCI-1155細胞、PLB985細胞
JROECL 19細胞系相關產(chǎn)品：BI-Mel細胞、KRC Y細胞、HBSMC細胞
AZ-521細胞系相關產(chǎn)品：MADISON LUNG TA-109細胞、MOLT.4細胞、T98-G細胞
HEC-1A細胞系相關產(chǎn)品：Oka-C1細胞、SK Col 1細胞、OEC33細胞
HS0578T細胞系相關產(chǎn)品：L cells (TK-)細胞、TK 10細胞、MGc80-3細胞
RPMI 6666細胞系相關產(chǎn)品：TOV-112細胞、Fetal Human Colon細胞、NCI-H1437細胞
NCI-H747細胞系相關產(chǎn)品：C 6細胞、BIC-1細胞、MDAMB134VI細胞
L 540細胞系相關產(chǎn)品：JKT1細胞、RWPE-2細胞、UACC 893細胞
ANA-1細胞系相關產(chǎn)品：RBE4細胞、Rat 2細胞、NCI-460細胞
HCEC-12細胞系相關產(chǎn)品：GM-637細胞、HSF2細胞、Normal Rat Kidney-49F細胞
SV-HUC細胞系相關產(chǎn)品：AD-293細胞、231-luc細胞、NCM356細胞
7860細胞系相關產(chǎn)品：HPAF II細胞、IMR90細胞、RS411細胞
H-510細胞系相關產(chǎn)品：LC-2 ad細胞、FHL124細胞、SK-BR3細胞
Rat-1細胞系相關產(chǎn)品：GM00215A細胞、MDA231細胞、KU-812-F細胞
D-341細胞系相關產(chǎn)品：NHA細胞、COLO684細胞、BE2-M17細胞
Panc_03_27細胞系相關產(chǎn)品：A2780/Taxol細胞、Strain KB細胞、GP293細胞
NHA細胞系相關產(chǎn)品：MPP-89細胞、CNE細胞、NIE 115細胞
MyLa 2059細胞系相關產(chǎn)品：B16 melanoma細胞、KYSE 520細胞、mRTEC細胞
HCC44細胞系相關產(chǎn)品：NCIH358細胞、SF295細胞、ME1細胞
J774細胞系相關產(chǎn)品：LuCL4細胞、SKM1細胞、H-2066細胞
PK(15)細胞系相關產(chǎn)品：SW403細胞、T/G HA-VSMC細胞、BGC823細胞
HCC44細胞系相關產(chǎn)品：NCIH358細胞、SF295細胞、ME1細胞
PA-1細胞系相關產(chǎn)品：Becker細胞、NUGC-2細胞、NCIH1819細胞
TGBC11T細胞系相關產(chǎn)品：Co 205細胞、CLONE M3細胞、CMT167細胞
ACC2細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL-8細胞、GM637細胞、EFO27細胞
HPDE細胞系相關產(chǎn)品：PC2細胞、CTSC-3細胞、P3X63 AG 8.653細胞
HD-LM-2細胞系相關產(chǎn)品：EOC 20細胞、GM04679細胞、FU-MMT-1細胞
NCI-H2030細胞系相關產(chǎn)品：TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、H-2591細胞、BIU-87/Adr細胞
SKNAS細胞系相關產(chǎn)品：SNK-6細胞、Super Tube細胞、NIH:OVCAR4細胞
WM2664細胞系相關產(chǎn)品：A-172 MG細胞、P3J HR1-K細胞、KYSE 50細胞
MIN6 Adherent小鼠胰島β細胞系
NCI-H2452細胞系相關產(chǎn)品：SKMEL28細胞、L1210細胞、SCC-4細胞
JM-Jurkat細胞系相關產(chǎn)品：PFSK-1細胞、TE85細胞、Hs274T細胞
RKO_AS45細胞系相關產(chǎn)品：NCL-H548細胞、X63-Ag8.653細胞、Saos2細胞
DBTRG-05MG細胞系相關產(chǎn)品：EBTr細胞、HB611細胞、NCI-SNU-216細胞
SCC-4細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1048細胞、TE7細胞、SUM-149PT細胞
NPC-TW-039細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB231細胞、OV433細胞、LWnt3A細胞
LNCaP細胞系相關產(chǎn)品：Y79細胞、CCK81細胞、PE/CA-PJ34細胞
NRK-49F細胞系相關產(chǎn)品：SK-MEL 28細胞、SK-N-BE細胞、MCCAR細胞
10T1/2細胞系相關產(chǎn)品：BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞
NCI-H2085細胞系相關產(chǎn)品：L-6細胞、ZR75-30細胞、T2細胞
P30-OHKUBO細胞系相關產(chǎn)品：BALB/3T3 (clone A31)細胞、Cloudman S91 melanoma細胞、P3HR1細胞
MESSA-DX5細胞系相關產(chǎn)品：GLC-15細胞、PC-3M細胞、Mono Mac 1細胞
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