"MIN6 Cell:小鼠胰島β細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
D341Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2405細(xì)胞、U20S細(xì)胞、MDA-MB-157細(xì)胞
HuH28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHH4細(xì)胞、LS 513細(xì)胞、PTK-2細(xì)胞
KYSE270細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2780CP細(xì)胞、P3JHR1細(xì)胞、BALB/3T3細(xì)胞
OVCA432_Bast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-A549細(xì)胞、130-T細(xì)胞、SW-1271細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
MIN6 Cell:小鼠胰島β細(xì)胞系
細(xì)胞的凍存:目前,細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×10(6)~1×10(7)/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會(huì)對細(xì)胞的生長會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因?yàn)楹窟^低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營養(yǎng)不足,過高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時(shí)須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間,按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換;3)購買的復(fù)蘇細(xì)胞,為何會(huì)有脫落?因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^程中不可避免的會(huì)有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
R1800[RA]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM-192A細(xì)胞、NCI H716細(xì)胞、NCI-SNU-398細(xì)胞
H-1568細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HKC細(xì)胞、Me Wo細(xì)胞、NP69SV40T細(xì)胞
HEL-92.1.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-35 Reuber細(xì)胞、SW620細(xì)胞、H-1836細(xì)胞
Ramos (RA 1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hESC細(xì)胞、K7M2 wt細(xì)胞、SW-1990細(xì)胞
NCIH1915細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW260細(xì)胞、293細(xì)胞、MDA 435細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
MIN6 Cell:小鼠胰島β細(xì)胞系
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng):細(xì)胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯(cuò),就是記得到時(shí)間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞:補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至70%單層時(shí)收獲細(xì)胞,計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個(gè)最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點(diǎn):當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí),有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實(shí),細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡單的實(shí)驗(yàn),不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會(huì)盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對細(xì)胞的損傷等等。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
Duck embryo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC12細(xì)胞、SCLC21H細(xì)胞、Sp 2817細(xì)胞
HN13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16-HBEo細(xì)胞、B16 F10細(xì)胞、R 1610細(xì)胞
TE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RASMC細(xì)胞、NKM-1細(xì)胞、PLA-801D細(xì)胞
Hs604T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TSCCa細(xì)胞、P3X63細(xì)胞、GA-10 clone 4細(xì)胞
NW-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3-Ag1.2.3細(xì)胞、BEAS-2B細(xì)胞、Mevo細(xì)胞
Hs274T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1437細(xì)胞、CAOV3細(xì)胞、PC-9/S1細(xì)胞
HT clone H9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AsPC-1細(xì)胞、KU-19-19細(xì)胞、NCI-H2081細(xì)胞
MIN6 Cell:小鼠胰島β細(xì)胞系
SW1990細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU1040細(xì)胞、CACO2細(xì)胞、C-4I細(xì)胞
MCF-7B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat E6.1細(xì)胞、TFK-1細(xì)胞、NCIH1703細(xì)胞
SW1116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE0520細(xì)胞、HT-1197細(xì)胞、NCI-H719細(xì)胞
C4-2 Bone metastatic細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-82細(xì)胞、SW-527細(xì)胞、NBL-7細(xì)胞
GL261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02131細(xì)胞、SK-N-MC細(xì)胞、HuH-1細(xì)胞
LX-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435S細(xì)胞、OVCA433_Bast細(xì)胞、GM04678細(xì)胞
NCI-SNU-C2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag8細(xì)胞、SUM 52細(xì)胞、GL261細(xì)胞
U-87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-WRC 256細(xì)胞、TE-12細(xì)胞、McArdle RH-7777細(xì)胞
1301細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L cell line細(xì)胞、CoCL2細(xì)胞、PSN-1細(xì)胞
1301細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L cell line細(xì)胞、CoCL2細(xì)胞、PSN-1細(xì)胞
MDCK (NBL-2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS-26細(xì)胞、As-PC1細(xì)胞、NCI-H69C細(xì)胞
RL952細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-4:11細(xì)胞、IA-LM細(xì)胞、Sf-21細(xì)胞
Ly1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細(xì)胞、Sp2/0細(xì)胞、NCIH847細(xì)胞
BHP10-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375-SM細(xì)胞、MES23.5細(xì)胞、SKGT2細(xì)胞
M3 Clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMy2.CIR細(xì)胞、HN-6細(xì)胞、T/G HA-VSMC細(xì)胞
HKC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-982細(xì)胞、PL9細(xì)胞、BL1339細(xì)胞
Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH/3T3細(xì)胞、BV-173細(xì)胞、HEK/293細(xì)胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 294T細(xì)胞、U-118MG細(xì)胞、HNE-1細(xì)胞
H157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-CEM C1細(xì)胞、NCIH1048細(xì)胞、NCIH841細(xì)胞
SKBr3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-281-T細(xì)胞、HFTF細(xì)胞、OAW 42細(xì)胞
NCI-H774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC14細(xì)胞、BE2_C細(xì)胞、CCC-HEL-1細(xì)胞
HPAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JVM-3細(xì)胞、H2198細(xì)胞、YES2細(xì)胞
TALL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞、SW837細(xì)胞、MPC-5細(xì)胞
OCI-AML-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-294T細(xì)胞、MHCC-97細(xì)胞、UMUC3細(xì)胞
A549/DDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2029細(xì)胞、SW 948細(xì)胞、COLO320 DM細(xì)胞
A431/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2135細(xì)胞、MCF12F細(xì)胞、LMTK-細(xì)胞
Nb2-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2444細(xì)胞、L-363細(xì)胞、MFE 280細(xì)胞
HuP-T4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN-6細(xì)胞、OCI/AML-2細(xì)胞、EL4細(xì)胞
B-cell with DC Morphology細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL2細(xì)胞、Caco-2/ATCC細(xì)胞、CA46細(xì)胞
MDA MB 453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-G63細(xì)胞、T47D:A細(xì)胞、C32-mel細(xì)胞
OK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3-Ag123細(xì)胞、C-8161細(xì)胞、KU 812細(xì)胞
NCIH1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1385細(xì)胞、Madison lung細(xì)胞、PL11細(xì)胞
LLC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC 52細(xì)胞、Eca 109細(xì)胞、OCI-AML-2細(xì)胞
Hs_578t細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOZC-1細(xì)胞、MILE SVEN 1細(xì)胞、NCIH1876細(xì)胞
Nb2-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2444細(xì)胞、L-363細(xì)胞、MFE 280細(xì)胞
ACC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1-LUC細(xì)胞、HRA 19細(xì)胞、SUM-149細(xì)胞
HS5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:huH 1細(xì)胞、PLB985細(xì)胞、COLO829細(xì)胞
HBdSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 52細(xì)胞、IHH細(xì)胞、H526細(xì)胞
MFE280細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBC1細(xì)胞、MG-63細(xì)胞、BaF3細(xì)胞
DMS-114細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB-231細(xì)胞、253J細(xì)胞、293AD細(xì)胞
DMS-114細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB-231細(xì)胞、253J細(xì)胞、293AD細(xì)胞
PC-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR-22rv1細(xì)胞、V79-GalK1細(xì)胞、JJN3細(xì)胞
Panc 8.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-3H-1細(xì)胞、TOV-112D細(xì)胞、Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞
MIN6 Cell:小鼠胰島β細(xì)胞系
Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2細(xì)胞、WM 239-A細(xì)胞、U-266 AR1細(xì)胞
Bac1 2F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63Ag8.653細(xì)胞、PanC1細(xì)胞、Hu-P-T4細(xì)胞
Turbot Embryonic Cell line細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAOEC細(xì)胞、SKNEP細(xì)胞、Caco-2/BBe細(xì)胞
TB1 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK_HEP1細(xì)胞、P3HR-1細(xì)胞、LA-N-1細(xì)胞
SW 839細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EL 4細(xì)胞、TT細(xì)胞、FU-97細(xì)胞
GM03573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞、GM03320細(xì)胞、H-2141細(xì)胞
H-1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549-Taxol細(xì)胞、NCI-322細(xì)胞、UO-31細(xì)胞
BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UO-31細(xì)胞、MC-38細(xì)胞、NIH:OVCAR-8細(xì)胞
PC3M-2B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO684細(xì)胞、Tu 212細(xì)胞、G361-mel細(xì)胞
MV-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1672細(xì)胞、Caco-2/BBe細(xì)胞、TGBC-11-TKB細(xì)胞
VK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L26細(xì)胞、H2170細(xì)胞、H2171細(xì)胞
GT39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H460細(xì)胞、HT1080細(xì)胞、McG-1細(xì)胞
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